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新疆雪莲组织培养体系的RAPD和ISSR遗传稳定性评价

作　者: 戴卓昊
导　师: 欧阳杰；袁晓凡
学　校: 北京林业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 新疆雪莲 植物组织培养 RAPD ISSR 分子标记 遗传稳定性
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 135次
引　用: 5次
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内容摘要


本文通过应用Random amplified polymorphic DNA(RAPD)和Inter-SimpleSequence Repeat(ISSR)分子标记技术,来检测新疆雪莲在整个组织培养过程中再生体系的变异程度;并通过这两种技术其反应出的DNA多态性,来评价新疆雪莲再生体系的遗传稳定性。本文以实验室组培种子苗DNA为模版,进行RAPD和ISSR反应条件优化。通过11种新疆雪莲样品的RAPD和ISSR分析得出:11种雪莲样品中多态性条带的比率分别为35%和33%;根据总RAPD的聚类分析图可得,11种新疆雪莲样品两两之间的相似系数为0.823-0.995,平均为0.878;根据总ISSR的聚类分析图可得,11种新疆雪莲样品两两之间的相似系数为0.824-0.974,平均为0.885。因此说明新疆雪莲在组培过程中发生了一定程度的变异,从分子水平为组织培养和人工种植途径实现新疆雪莲资源的可持续利用提供依据。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-7
第一章 绪论  7-23
  1.1 新疆雪莲研究概况  7-10
    1.1.1 新疆雪莲的生物学特性  7-8
    1.1.2 新疆雪莲的有效成分  8-9
    1.1.3 新疆雪莲的药理学研究  9-10
  1.2 新疆雪莲的人工繁殖进展  10-12
    1.2.1 新疆雪莲的人工种植  11
    1.2.2 新疆雪莲的组织培养  11-12
  1.3 雪莲愈伤组织的诱导和分化  12-13
  1.4 DNA指纹图谱  13-17
    1.4.1 DNA指纹技术发展简况  13-14
    1.4.2 DNA指纹图谱的特点  14-15
    1.4.3 DNA指纹图谱的应用  15-16
    1.4.4 DNA指纹图谱的重要发展  16-17
  1.5 新疆雪莲再生质量体系分析评价  17-20
    1.5.1 新疆雪莲再生体系质量评价现状  17
    1.5.2 再生植株的鉴定与质量检测  17-18
    1.5.3 应用DNA指纹图谱技术进行质量评价的研究进展  18-20
  1.6 研究的目的及意义  20-21
  1.7 课题的研究内容及技术路线  21-23
第二章 新疆雪莲愈伤组织的诱导和再分化及DNA提取  23-31
  2.1 材料与方法  23-25
    2.1.1 实验仪器:  23
    2.1.2 实验材料:  23
    2.1.3 实验方法:  23-25
  2.2 结果与讨论:  25-28
    2.2.1 消毒时间对种子萌发的影响  25-26
    2.2.2 外植体及苗龄对愈伤诱导率的影响  26-27
    2.2.3 愈伤组织分化成再生苗的结果  27
    2.2.4 新疆雪莲总DNA的提取  27-28
  2.3 本章小结  28-31
第三章 新疆雪莲RAPD反应条件的优化与再生体系遗传稳定性评价  31-45
  3.1 材料与方法  31-35
    3.1.1 仪器与试剂  31
    3.1.2 实验材料  31-32
    3.1.3 实验方法  32-35
  3.2 结果与讨论  35-43
    3.2.1 RAPD PCR预实验  35
    3.2.2 RAPD反应条件的优化  35-40
    3.2.3 RAPD引物筛选及扩增结果  40-42
    3.2.4 聚类结果及新疆雪莲组培材料的RAPD遗传稳定性评价  42-43
  3.3 本章小结  43-45
第四章 新疆雪莲ISSR反应条件的优化与再生体系遗传稳定性评价  45-57
  4.1 材料与方法  45-47
    4.1.1 仪器与试剂  45-46
    4.1.2 实验材料  46
    4.1.3 实验方法  46-47
  4.2 结果与讨论  47-56
    4.2.1 ISSR-PCR预实验  47-49
    4.2.2 ISSR反应条件的优化  49-52
    4.2.3 ISSR引物选择及扩增  52-54
    4.2.4 聚类结果及新疆雪莲组培材料ISSR遗传稳定性评价  54-56
  4.3 本章小结  56-57
第五章 结论与展望  57-59
  5.1 结论  57-58
  5.2 展望  58-59
参考文献  59-63
附录  63-67
个人简介  67-69
导师简介  69-71
致谢  71

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