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大豆对大豆花叶病毒SC10株系抗性的遗传和抗性基因的定位及标记辅助选择

作 者: 李春燕
导 师: 智海剑
学 校: 南京农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 大豆花叶病毒 抗性遗传 抗性基因等位性 分子标记 辅助选择
分类号: S565.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus, SMV)病是一种世界性的大豆病害,在我国各大豆产区均有发生,严重影响了大豆的产量与品质。培育抗病品种是控制其危害的最有效手段。国内外学者对SMV的抗性遗传分子标记进行了广泛的研究。本文针对SMV南方流行株系SC10进行抗源筛选、抗性遗传和抗性基因的分子标记定位研究,为大豆抗病育种以及抗性基因的精细定位和图位克隆奠定基础;并利用与SMV抗性基因连锁的SSR标记对大豆种质进行辅助选择,为筛选新的抗性品种提供一定的依据。主要结论如下:1.26个大豆品种分别接种SC4、SC8、SC10三个SMV株系进行抗性鉴定,明确了各品种对3个株系的抗性反应。发现科丰1号,晋大74,大白麻等品种对3个株系均表现抗侵染,南农1138-2,东大2号,8101等品种对3个株系均表现感病。2.利用对我国南方大豆产区流行株系SC10抗病的材料科丰1号、晋大74、大白麻、汾豆56、中作229、徐豆1号、邳县茶豆、广吉和跃进4号与感病材料南农1138-2和8101配制抗感和抗抗杂交组合,研究了对SC10的抗性遗传方式以及不同材料的抗性基因间的等位性关系。结果表明,科丰1号、晋大74、大白麻、汾豆56、中作229和徐豆1号与感病品种杂交的F1表现抗病,F2呈3抗:1感分离比例,F2:3家系呈1抗:2分离:1感病的分离比例,证明它们对SC10的抗性由单显性基因控制。晋大74x汾豆56和徐豆1号×邳县茶豆的Fl表现抗病、F2未发现感病株,表明晋大74与汾豆56及徐豆1号与邳县茶豆所携带的对SC10的抗病基因是等位的或紧密连锁的。科丰1号×广吉、汾豆56、中作229,晋大74x中作229、广吉,大白麻×汾豆56、科丰1号和跃进4号×广吉的F1表现抗病,F2呈15R:1S的分离比例,F2:3家系符合7抗:4分离(15R:1S):4分离(3R:1S):1感的分离比例,表明科丰1号与广吉、汾豆56、中作229,晋大74与中作229、广吉,大白麻与汾豆56、科丰1号和跃进4号与广吉各携带一个抗SC10株系的基因,且在不同位点,分离结果的测验也显示2个基因独立遗传。3.用分离群体分组分析法(BSA)研究发现,在科丰1号×南农1138-2的F2群体中,D1b连锁群上的微卫星标记Satt558、Satt254、Satt634、gm020580、gm020584、gm020562和gm020546均与抗病基因Rsclo连锁,遗传距离分别为6.1cM、2.0cM、0.9cM、0.8cM、2.0cM、4.6cM和9.2cM,由此推测抗病基因位于D1b连锁群。4对已经进行表型鉴定的176份大豆种质资源,利用与SMV抗性基因连锁的SSR标记验证分子辅助选择抗病材料的可行性。结果表明:分别利用与Rsc13-1连锁的SSR标记Satt558和Sat254进行检测,抗病材料筛选的准确率分别达到51.5%和59.1%,两个标记联合筛选的准确率可达到65.4%。

全文目录


摘要  7-9ABSTRACT  9-11第一章 文献综述  11-29  1.1 大豆花叶病毒  11-17    1.1.1 大豆花叶病毒的特性  11-12    1.1.2 SMV侵染大豆后的症状  12    1.1.3 大豆花叶病毒的株系鉴定  12-15    1.1.4 大豆对大豆花叶病毒的抗源筛选  15-17  1.2 大豆花叶病毒病的抗性遗传  17-21    1.2.1 成株抗性遗传  17-20      1.2.1.1 抗侵染的遗传研究  17-19      1.2.1.2 抗扩展的遗传研究  19      1.2.1.3 症状反应的遗传研究  19-20    1.2.2 种粒抗性遗传  20    1.2.3 大豆对SMV抗性基因的等位性研究  20-21  1.3 大豆对大豆花叶病毒(SMV)抗性基因的分子标记定位  21-28    1.3.1 分子标记概述  21-22    1.3.2 SSR分子标记应用  22-25      1.3.2.1 构建大豆分子遗传图谱  22-23      1.3.2.2 标记辅助选择  23-24      1.3.2.3 遗传多样性及遗传距离  24-25    1.3.3 大豆对SMV的抗性(抗侵染)基因定位及其分子标记  25-28  1.4 研究目的和技术路线  28-29第二章 大豆对SMV株系SC10的抗性遗传与抗性基因的等位性研究  29-39  2.1 引言  29  2.2 材料和方法  29-32    2.2.1 试验材料  29-30      2.2.1.1 病毒株系  29      2.2.1.2 供试材料  29-30      2.2.1.3 杂交组合的配制  30    2.2.2 试验方法  30-32      2.2.2.1 病毒保存方法  30      2.2.2.2 抗源筛选的接种方法  30-31      2.2.2.3 田间试验与网室接种  31      2.2.2.4 接种方法  31      2.2.2.5 磷酸缓冲液的配制  31      2.2.2.6 抗性遗传分析  31-32  2.3 结果与分析  32-38    2.3.1 抗源筛选  32-33    2.3.2 抗性鉴定与遗传分析  33-34    2.3.3 抗性基因的等位性分析  34-38  2.4 讨论  38-39第三章 大豆对大豆花叶病毒抗性基因的分子标记研究  39-55  3.1 引言  39  3.2 材料和方法  39-44    3.2.1 试验材料  39      3.2.1.1 亲本材料  39      3.2.1.2 病毒株系  39    3.2.2 试验方法  39-44      3.2.2.1 DNA的提取  39-40      3.2.2.2 提取叶片DNA涉及的试剂及配方  40      3.2.2.3 模板DNA浓度检测  40-41      3.2.2.4 抗感池的制备  41      3.2.2.5 引物  41      3.2.2.6 PCR扩增反应  41      3.2.2.7 PCR扩增产物的电泳检测  41-43      3.2.2.8 试验过程中涉及的主要试验仪器  43-44      3.2.2.9 连锁分析与连锁图绘制  44  3.3 结果与分析  44-52    3.3.1 多态性引物筛选  44-45    3.3.2 科丰1号×南农1138-2 F2代群体SSR带型分析及抗病基因的标记定位  45-52      3.3.2.1 与抗病基因连锁的分子标记的电泳图  45-47      3.3.2.2 科丰1号×南农1138-2 F2代群体SSR带型分析  47-52      3.3.2.3 抗病基因的标记定位  52  3.4 讨论  52-55第四章 大豆种质对SMV抗性的SSR标记辅助选择  55-59  4.1 引言  55  4.2 材料和方法  55-56    4.2.1 实验材料  55-56      4.2.1.1 所用品种  55      4.2.1.2 所用引物  55-56    4.2.2 实验方法  56      4.2.2.1 DNA的提取与检测  56      4.2.2.2 SSR引物的来源及合成  56      4.2.2.3 PCR扩增反应及扩增产物的电泳检测  56  4.3 结果与分析  56-57    4.3.1 SSR分子鉴定结果与接种鉴定结果的比较  56-57  4.4 讨论  57-59第五章 全文结论  59-61  5.1 全文结论  59-60    5.1.1 大豆对SC10株系的抗性遗传  59    5.1.2 大豆对SC10株系抗性基因的等位性研究  59    5.1.3 大豆对SC10株系抗性基因的定位  59    5.1.4 分子标记辅助对SC13株系抗性基因的选择  59-60  5.2 创新点  60-61参考文献  61-73附录1 聚类用品种名称和鉴定结果  73-77致谢  77

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 大豆
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