学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

番茄抗TYLCV相关分子标记筛选及其分子标记辅助选择抗性聚合研究

作　者: 侯富恩
导　师: 余文贵
学　校: 南京农业大学
专　业: 蔬菜学
关键词: TYLCV 分子标记 AFLP SSR 分子标记辅助选择
分类号: S641.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 25次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


番茄黄化曲叶病(Tomato yellow leaf curl disease)已经成为世界番茄生产上的主要病害之一,近几年,在我国迅速传播,严重威胁到我国的番茄生产。该病由双生病毒科菜豆金色花叶病毒属番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV)引起,主要通过烟粉虱(Bemisia tabaci).培育抗病品种是阻止该病蔓延的最根本有效的途径,据报道,番茄栽培种种质资源中缺乏抗TYLCV的基因,仅有一些表现为耐病的种质。高抗TYLCV的基因都存在于近缘野生种质中,目前已报道的抗番茄黄化曲叶病的近缘野生种主要有醋栗番茄(S.pimpinellifolium)、秘鲁番茄(S.peruvianum)、多毛番茄(S.habrochaites)、智利番茄(S.chilense)和契斯曼尼番茄(S.cheesmanii)。因此,TYLCV的抗性育种很大程度上基于从野生种向栽培种中转入抗性基因。为了应用分子标记辅助选择技术加快抗病品种培育进程,阻止该病蔓延,本试验以抗病亲本CLN2777A和感病亲本TMXA48-4-0及其F2分离群体为材料,应用AFLP和SSR两种标记技术以及BSA法进行与抗TYLCV基因连锁标记的筛选。同时利用国外开发的分别与抗TYLCV基因Ty-1, Ty-2, Ty-3连锁的标记进行分子标记辅助选择聚合研究,研究结果如下：1.通过对亲本及F2分离群体进行TYLCV接种,发现F2代抗感病分离比率接近3：1,表明抗性受单个显性基因控制。用512对Mse I/Pst I引物组合对亲本及F2代抗感基因池进行AFLP分析,最终引物组合P15/M28与P16/M10在亲本及抗感组间表现多态性,,回收并克隆测序,两片段大小分别为106bp,180bp,分别命名为P15M28-106,P16M10-180.重新设计引物,将P15M28-106成功转化为CAPS标记,命名为P15M28.应用一个F2群体对其进行验证,遗传连锁分析结果表明标记P15M28与抗性基因Ty-2之间的遗传距离为8.8cM,可以应用于标记辅助选择育种。除此之外,根据Kenta Shirasawa (2010)构建的番茄遗传图谱,选取11号染色体末端,TG36到TG393区间上的7个SSR标记,应用同样的亲本和F2群体进行筛选,发现一个与抗TYLCV连锁的EST-SSR标记TES0344,与抗性基因遗传距离为7.8 cM。2.应用分别含有Ty-1, Ty-2, Ty-3三个抗TYLCV基因的育种材料TY52,CLN2777A,99S-C-39-20-1-1-24-17-0-0,以及三个园艺性状优良的感病材料Tmm9060-0, TMXA48-4-0, TA1218,按计划配置杂交组合,每一代都应用对应的标记进行分子标记进行筛选,目前已得到Ty-1与Ty-2, Ty-1与Ty-3, Ty-2与Ty-3两两聚合的纯合抗病材料各一株系。

全文目录


摘要  7-9ABSTRACT  9-11第一部分 文献综述  11-29  1 番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)的研究进展  11-16    1.1 番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)的发病症状  11    1.2 番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)及其传播  11-12    1.3 番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的检测  12-14    1.4 抗性机理的研究  14    1.5 番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)接种及抗性鉴定  14-16    1.6 主要防治方法  16  2 抗TYLCV育种进展  16-20    2.1 抗性遗传规律及抗原材料的筛选  17-18    2.2 抗TYLCV育种进展  18-19    2.3 生物工程技术在抗TYLCV育种中的应用  19-20  3 分子标记技术及分子标记辅助选择育种  20-29    3.1 分子标记的特点  20-21    3.2 常用分子标记技术及其原理  21-23    3.3 标记筛选方法  23    3.4 标记筛选所用群体构建常用方法  23-25    3.5 与抗TYLCV基因相关标记的开发  25-26    3.6 分子标记辅助选择原理及在番茄抗病育种中的应用  26-27    3.7 聚合育种及分子标记辅助选择在聚合育种中的应用  27-28    3.8 分子标记辅助选择目前存在的问题  28-29第二部分 研究报告  29-63  第一章 番茄基因组AFLP反应体系的优化  29-37    1 材料与方法  29-33      1.1 材料与试剂  29      1.2 方法  29-33    2 结果分析  33-35      2.1 DNA模板检测  33-34      2.2 酶切与连接  34      2.3 预扩增  34      2.4 选择性扩增  34-35    3 小结  35-37  第二章 抗TYLCV相关标记筛选  37-49    1 材料及方法  37-42      1.1 试验材料  37-38      1.2 接种方法  38      1.3 TYLCV检测  38      1.4 AFLP分析  38      1.5 特异片段的回收  38-39      1.6 特异片段的克隆  39-40      1.7 CAPS标记转化及分析  40      1.8 SSR分析  40-42    2 结果分析  42-47      2.1 F_2单株抗病性鉴定  42-43      2.2 AFLP标记筛选  43-46      2.3 SSR标记筛选  46-47    3 小结  47-49  第三章 分子标记辅助选择聚合抗TYLCV基因研究  49-63    1 材料及方法  49-53      1.1 供体亲本  49      1.2 受体亲本  49-50      1.3 感病对照  50      1.4 抗性鉴定所用烟粉虱的饲养  50      1.5 分子检测  50-53      1.6 TYLCV接种鉴定及抗性调查分级标准  53      1.7 田间试验  53    2 结果分析  53-61      2.1 亲本间多态性检测  53-55      2.2 Ty-1与Ty-2聚合  55-57      2.3 Ty-1与Ty-3聚合  57-59      2.4 Ty-2与Ty-3聚合  59-61    3 讨论  61-63全文结论  63-65参考文献  65-73缩略表  73-75附录  75-77硕士期间发表的学术论文  77-79致谢  79

相似论文

  1. 牡丹EST-SSR引物开发及其亲缘关系分析,S685.11
  2. 利用AFLP标记对四个多鳞鱚群体的遗传结构分析,S917.4
  3. 运用SRAP和SSR分子标记研究粉花石斛的遗传多样性和居群遗传结构,S567.239
  4. 黄瓜渐渗系抗南方根结线虫病遗传规律及分子标记研究,S436.421
  5. 黄瓜—酸黄瓜抗霜霉病渐渗系分子标记的筛选及细胞程序性死亡相关基因的表达分析,S436.421.11
  6. 涉及大赖草7Lr染色体的普通小麦—大赖草易位系的分子细胞学鉴定,S512.1
  7. 一个新的小麦白粉病抗性基因的发现与分子标记定位,S512.1
  8. 簇毛麦6V染色体短臂小片段易位系的分子细胞遗传学鉴定,S512.1
  9. 荆州黑麦6R染色体抗白粉病基因的定位及分子标记,S512.1
  10. 陆地棉矮化突变体Ari1327的形态、生理和分子标记研究,S562
  11. 苏麦3号矮秆密穗突变体NAUH164的遗传分析及突变座位的分子标记定位,S512.1
  12. 大豆杂种优势及其遗传基础研究,S565.1
  13. 望水白×Alondra’s RIL群体分子标记遗传图谱构建及小麦赤霉病抗性相关EST定位,S512.1
  14. 粳稻直立穗型恢复系选育和大剑叶角度等位变异的SSR标记,S511.22
  15. 大豆细胞质雄性不育系与保持系基因差异表达的cDNA-AFLP分析及atp6基因RNA编辑研究,S565.1
  16. 中国大豆地方品种群体的遗传结构和连锁不平衡特征及主要育种性状QTL的关联分析,S565.1
  17. 玉米叶色突变基因al和yl的精细定位,S513
  18. 普通小麦—百萨偃麦草染色体易位系的选育与效应分析,S512.1
  19. 黄瓜单性结实相关基因的分离、表达及SSR标记分析,S642.2
  20. 甘肃桃遗传连锁图谱的构建及抗南方根结线虫的分子标记,S662.1
  21. 利用DNA分子标记研究梨、樱桃种质资源遗传多样性,S661.2

中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 茄果类 > 番茄（西红柿）
© 2012 www.xueweilunwen.com