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间斑寇蛛幼蛛体内毒性成分的分离与活性分析

作　者: 王素娥
导　师: 王贤纯
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 间斑寇蛛幼蛛毒性成分分离纯化活性分析
分类号: Q51
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 6次
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内容摘要

间斑寇蛛(Latrodectus tredecimguttatus)俗称黑寡妇,是一种中型毒蜘蛛,在分类学上属于节肢动物门,蛛形纲,蜘蛛目,球蛛科,寇蛛属。间斑寇蛛是目前世界上发现的最毒的蜘蛛之一。在过去几十年里,国内外的相关工作者对间斑寇蛛毒腺分泌的毒素进行了较为详细的研究。然而,与其毒素只存在与毒腺中的蛇等动物不同,间斑寇蛛除毒腺中存在毒素外,身体的其他部位如腿和腹部也存在毒素,但到目前为止,还没有对其进行系统研究的报道。本论文对间斑寇蛛幼蛛体内的活性成分进行较为系统的提取、分离纯化和活性检测研究。Bradford法测得粗提物可溶性蛋白质的含量为27.72%。电生理实验表明粗提物能阻断小鼠膈神经-膈肌离体标本内的神经肌肉接头传递,粗提物浓度为80μg/ml时,完全阻断的时间为16 min。利用凝胶过滤层析,将粗提物进行分离,得到6个只要分离峰。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,粗提物中的高分子量蛋白质和低分子量成分得到了较好的分离。利用小鼠膈神经-膈肌标本进行的活性测定结果表明,分子量大于10kDa的凝胶过滤层析收集峰1号和2号能阻断小鼠离体膈神经-膈肌的神经肌肉接头传递。当加入终浓度为2.03mg/ml的收集峰1号成分后,完全阻断时间为16.0±1.5 min,用台式液漂洗不能消除其阻断效应；当加入终浓度为2.99 mg/ml的收集峰2号成分后,完全阻断时间为15.0±2.0 min,用台式液漂洗不能消除其阻断效应；用分子量小于10 kDa的进行电生理实验,不能完全阻断神经传递,即使浓度为5mg/ml时,也只能部分阻断膈神经-膈肌的神经传导,说明哺乳动物神经毒活性成分主要存在于分子量大于10kDa的样品中。

全文目录

中文摘要  3-5
ABSTRACT  5-8
第一章文献综述  8-33
  1.1 蜘蛛毒素研究概况  8-10
  1.2 蜘蛛毒素的研究进展  10-22
  1.3. 间斑寇蛛毒素研究进展  22-29
  1.4. 间斑寇蛛幼蛛毒性研究的基础及目的意义  29-33
第二章间斑寇蛛幼蛛体内毒性成分的分离与活性分析  33-52
  2.1 实验材料与仪器  34-35
  2.2 实验方法  35-40
  2.3 结果与分析  40-50
  2.4 讨论  50-52
第三章进一步研究设想  52-53
  1、毒素生物学活性分析进一步鉴定及其作用机制研究  52
  2、活性成分的进一步分离纯化和功能分析  52-53
参考文献  53-68
附录  68-69
缩写表  69-71
致谢  71-72

间斑寇蛛幼蛛体内毒性成分的分离与活性分析

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