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肾蕨中红杉醇提取工艺与质量标准的研究

作　者: 林红
导　师: 蒋孟良；王霆
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 肾蕨 红杉醇 提取工艺 大孔树脂 TLC
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 75次
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内容摘要


目的：肾蕨(Nephrolepis auriculata)属真蕨目骨碎补科多年生草本植物。研究证明：肾蕨含有多种生理活性成分,如黄酮、葡萄糖苷、谷甾醇、还原糖等物质。作为一种常见的观赏性植物,国内外对其研究报道甚少,尤其是对肾蕨中红杉醇这一成分的研究报道。为此,本实验对肾蕨中红杉醇的提取、纯化工艺及质量标准进行了较为系统的研究,为红杉醇的精制与工业化生产提供了实验依据。方法和结果：提取工艺的研究：首先采用醇提的方法从肾蕨中提取红杉醇。通过单因素及正交试验设计,采用L9(34)正交实验法,以乙醇浓度、提取时间、溶媒体积为考察因素,以红杉醇浓度为考察指标进行评价,优选提取的最佳工艺条件为A2B1C3,即每次加4倍量75%乙醇提取3次,时间分别为3.5h、2.5h、2h。在最佳条件下所得红杉醇为：0.299mmol/L。纯化工艺的研究：本实验选用了大孔树脂对红杉醇进行纯化,根据吸附解吸附性能,从9种不同型号的大孔树脂里面筛选出D202树脂作为精制红杉醇的树脂,确定其吸附和洗脱条件,精制后的物质用气相色谱仪检测溶剂残留。结果表明：提取液经D202树脂进行分离后,有效的去除了杂质,经过树脂吸附后重结晶的红杉醇纯度达到了98%以上,而气相色谱仪也未检测出树脂残留。质量标准研究：通过对不同极性、不同配比展开系统进行摸索,最后优选V(正丁醇)：V(丙酮)：V(水)=4：3：1这一系统为红杉醇的定性鉴别条件。同时按照企业标准,采用高效液相色谱法(HPLC)对红杉醇进行的含量测定。结论：该方法所得红杉醇提取率高、纯度高、品质好,方法可靠,质量可控,为肾蕨中提取纯化红杉醇提供了一种简单、可行、实用的方法。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-12
前言  12-14
第一部分 肾蕨中红杉醇的提取工艺研究  14-24
  1 单因素最优条件的考察  14-18
    1.1 浸泡时间的考察  14-15
    1.2 溶媒浓度的考察  15-16
    1.3 溶媒用量的考察  16-17
    1.4 提取时间的考察  17
    1.5 提取次数的考察  17-18
  2 正交试验优选肾蕨中红杉醇的提取工艺  18-21
    2.1 因素水平的确定  18
    2.2 正交试验  18-20
    2.3 验证试验  20-21
  3 原料来源的品质分析  21-23
    3.1 不同产地肾蕨的红杉醇含量的比较  21-22
    3.2 不同采收季节对有效成分的影响  22-23
  4 小结  23-24
第二部分 红杉醇纯化工艺研究  24-42
  1 实验材料  24-26
    1.1 原料  24-25
    1.2 仪器  25
    1.3 试剂  25-26
  2 含量测定  26-30
    2.1 对照品溶液的制备  26
    2.2 供试品溶液的制备  26
    2.3 测定波长选择  26
    2.4 色谱条件  26
    2.5 标准曲线的制备  26-27
    2.6 精密度试验  27-28
    2.7 稳定性试验  28
    2.8 重复性  28-29
    2.9 回收率试验  29-30
  3 吸附树脂的筛选  30-34
    3.1 吸附前的预处理  30
    3.2 静态吸附解吸性能考察  30-32
    3.3 不同树脂的动态吸附性能的考察  32-33
    3.4 不同吸附树脂对杂质吸附能力的研究  33-34
  4 D202树脂对红杉醇进一步纯化工艺研究  34-42
    4.1 树脂吸附洗脱条件的考察  34-35
    4.2 上样量PH值对红杉醇含量的影响  35-36
    4.3 结果分析  36
    4.4 洗脱液不同浓度对红杉醇洗脱的影响  36-37
    4.5 树脂重复使用次数的考察  37
    4.6 D202树脂验证试验  37-40
    4.7 讨论—树脂的选择  40-42
第三部分 红杉醇质量控制研究  42-54
  1 红杉醇HPLC法含量测定及方法学考察  42-47
    1.1 药品、试药与仪器  42
    1.2 含量测定  42-47
  2 薄层色谱法研究  47-52
    2.1 主要仪器和试剂  47-48
    2.2 薄层色谱条件  48
    2.3 结果与讨论  48-50
    2.4 实验结果分析  50-51
    2.5 结论  51-52
  3 气相色谱法测定树脂残留物  52-54
    3.1 仪器与试药  52
    3.2.方法与结果  52-54
第四部分 讨论、结论和展望  54-61
  1 讨论  54-60
    1.1 色谱条件的选择  54-56
    1.2 提取工艺的选择  56
    1.3 纯化工艺大孔树脂的选择  56-58
    1.4 实验的不足  58-60
  2 结论  60
  3 展望  60-61
致谢  61-62
参考文献  62-64
附录1  64-73
  综述一 肾蕨植物、红杉醇的研究状况  64-66
  综述二 蒸发光散射检测器(ELSD)在药物分析中的应用  66-73
附录2  73-74
附图  74

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 化学分析与鉴定
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