学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

HSP_(70)与MDV肿瘤的发生发展相关性研究

作　者: 裴兰英
导　师: 朱瑞良
学　校: 山东农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 马立克氏病毒 鸡胚成纤维细胞模型 HSP70 mRNA 荧光定量RT-PCR
分类号: S852.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 44次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


HSP的表达量与肿瘤的发生、发展有着密切关系。本项目拟以鸡马立克氏病为模型,动态研究病毒引发肿瘤的发生、发展与HSP mRNA转录、血清内HSP抗体滴度相关性,揭示HSP在肿瘤发生、发展过程中的生物学作用,寻找抗肿瘤的新HSP靶点,提供肿瘤的提前诊断指标,探讨利用HSP调节剂治疗肿瘤的最佳时间,为进一步研究HSP干扰肿瘤细胞凋亡的信号转导机制、寻找新的抗肿瘤药物奠定理论基础。试验一、马立克病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立:试验通过雏鸡进行复壮,分离获得适应鸡胚成纤维细胞（Chicken Embryo Fibroblast,CEF）的MDV强毒。试验二、鸡马立克氏病鸡组织细胞内HSP70 mRNA转录水平的变化:通过人工攻毒建立鸡马立克氏病肿瘤模型。利用荧光定量RT-PCR方法,研究肿瘤发生、发展过程中,HSP70 mRNA转录水平的变化。结果显示:攻毒21天后,试验鸡肝脏和脾脏内HSP70 mRNA的转录水平极显著升高,而疫苗组和空白组鸡肝脏和脾脏内HSP70 mRNA的转录水平差异不显著。试验三、鸡马立克氏病鸡外周血HSP70抗体滴度的变化:通过人工攻毒建立鸡马立克氏病肿瘤模型。利用ELISA方法,研究肿瘤发生、发展过程中,外周血HSP70抗体水平的变化。结果显示:攻毒21和28天时,各组试验鸡外周血HSP70抗体水平差异不显著,攻毒35天后,攻毒组鸡外周血HSP70抗体水平显著低于疫苗组和空白组。

全文目录


中文摘要  6-7
Abstract  7-8
1 引言  8-24
  1.1 热休克蛋白  8-10
  1.2 HSPS 在肿瘤组织中的表达  10-11
  1.3 HSPS 与肿瘤细胞凋亡  11-12
  1.4 HSP 与肿瘤诊断  12
  1.5 HSP 与肿瘤细胞耐药  12-13
  1.6 HSPS 与肿瘤免疫  13-16
  1.7 马立克氏病毒研究进展  16-17
  1.8 MDV 生物学研究进展  17-21
  1.9 MDV 分子生物学研究进展  21-24
2 材料与方法  24-30
  2.1 材料  24-25
    2.1.1 毒株动物  24
    2.1.2 试剂仪器  24-25
      2.1.2.1 细胞培养试剂  24
      2.1.2.2 分子生物学试剂  24-25
      2.1.2.3 耗材仪器  25
  2.2 方法  25-30
    2.2.1 马立克病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立  25-27
      2.2.1.1 鸡胚成纤维细胞的制备、培养和保存  25-26
      2.2.1.2 MDV 在CEF 上的培养  26-27
      2.2.1.3 MDV 的鉴定  27
      2.2.1.4 MDV 细胞半数感染量（TCID50）测定  27
    2.2.2 MDV 病鸡组织细胞内HSP70 m RNA 转录水平的变化  27-29
      2.2.2.1 试验分组及取样  27-28
      2.2.2.2 一步法RT-PCR  28
      2.2.2.3 RT-PCR 扩增片段的亚克隆  28
      2.2.2.4 标准品和标准曲线的制备  28-29
      2.2.2.5 样品HSP70 mRNA 的定量分析  29
      2.2.2.6 分析及统计  29
    2.2.3 鸡马立克氏病鸡外周血HSP70 抗体滴度的变化  29-30
      2.2.3.1 试验分组及取样  29
      2.2.3.2 血清最佳稀释倍数  29-30
      2.2.3.3 试验样品检测  30
      2.2.3.4 分析及统计  30
3 结果与分析  30-38
  3.1 马立克病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立  30-34
    3.1.1 马立克氏病毒在雏鸡体内的增殖  30-31
    3.1.2 MDV 的分离  31
    3.1.3 电镜负染观察  31-33
    3.1.4 琼脂扩散试验结果  33
    3.1.5 MD 病毒TCID50 的测定结果  33-34
  3.2 MDV 病鸡组织细胞内HSP70MRNA 转录水平的变化  34-37
    3.2.1 阳性质粒的PCR 鉴定  34-35
    3.2.2 标准曲线  35-36
    3.2.3 样品HSP70 mRNA 的定量  36-37
  3.3 鸡马立克氏病鸡外周血HSP70 抗体滴度的变化  37-38
    3.3.1 血清最佳稀释倍数  37
    3.3.2 样品检测  37-38
4 讨论  38-41
  4.1 马立克病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立  38-39
  4.2 MDV 病鸡组织细胞内HSP70MRNA 转录水平的变化  39-40
  4.3 鸡马立克氏病鸡外周血HSP70 抗体滴度的变化  40-41
5 结论  41-42
6 参考文献  42-53
7 致谢  53

相似论文

  1. PRRSV的感染差异性和抗体依赖性增强作用研究,S858.28
  2. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,S828
  3. 家蚕HSP基因的表达调控研究,S881.2
  4. 慢性粒细胞白血病病人Mcl-1基因和bcr/abl基因的表达及临床意义,R733.72
  5. MUC4在口腔疣状癌中的初步研究,R739.8
  6. 子宫平滑肌PKCβ/CPI-17信号传导通路的表达与分娩发动的关系,R714.3
  7. 猪瘟兔化弱毒疫苗国家标准品的初步研究与建立,S852.5
  8. 小麦条锈菌PsMAPK1，PsCdc2，PsFuz7基因的克隆及PsMAPK1基因功能验证,S435.121
  9. 广州地区婴幼儿病毒性腹泻感染研究,R725.1
  10. 荧光定量PCR检测呼吸道标本中的人偏肺病毒,R725.6
  11. 猪主要RNA病毒病快速多联RT-PCR诊断技术研究,S858.28
  12. 大鼠死后脑、心肌和肾组织β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系,D919
  13. 胃癌组织中Stathmin的表达及其临床意义,R735.2
  14. 猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用,S858.28
  15. 鸭源呼肠孤病毒荧光定量RT-PCR方法的建立与应用,S855.3
  16. qRT-PCR检测胃癌中miRNAs的表达,R735.2
  17. 血管内皮生长因子C和肝细胞生长因子及其受体c-Met在宫颈癌中表达的临床研究,R737.33
  18. SATB1在肝细胞癌中的表达及其临床意义的研究,R735.7
  19. 禽白血病分子诊断及MHC单倍型鸡系对禽白血病的抗性研究,S858.31
  20. 同时检测和区分猪瘟野毒株和兔化弱毒疫苗株及牛病毒性腹泻病毒1型的三重荧光定量RT-PCR方法的建立,S854.43
  21. 大网膜在胃癌腹膜微转移检测中的价值研究,R735.2

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医基础科学 > 家畜病理学（兽医病理学）
© 2012 www.xueweilunwen.com