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Th17细胞/调节性T细胞偏倚在肝包虫病所致免疫逃避中的意义

作　者: 吐尔洪江·吐逊
导　师: 温浩
学　校: 新疆医科大学
专　业: 外科学
关键词: 肝囊型包虫病 辅助性T细胞-17 调节性T细胞 转录因子 免疫逃避
分类号: R532.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:探讨辅助性T细胞17(T helper cells-17,Th17)和调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)在肝囊型包虫病患者中外周血中的变化及其与包虫感染所致免疫逃避之间可能的关系。与此同时,探讨Th17细胞/Treg细胞免疫应答偏倚在肝囊型包虫病中的变化及其可能的临床意义。方法:将自2008年8月至2009年9月就诊于新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫外科和体检中心的56例受试者分为3组:健康对照(Healthy control, HC)组20例,肝囊型包虫病(Liver cystic echinococcosis, CE)组21例,肝复发囊型包虫病(Recurrent cystic echinococcosis, Recurrent CE)组15例。应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定三组受试者血清中Th17细胞相关因子白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)和IL-23的表达。同时测定Treg细胞相关细胞因子IL-10和转化生长因子-β(Transforming growth factor-β, TGF-β)。同时应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测各组受试者外周血单个核细胞中维甲酸孤独受体(Retinoid Orphan Receptor-γτ, ROR-γτ)和刀叉样蛋白-3(Forkhead Box Protein-3, FoxP3)的mRNA表达,并用t检验和Pearson相关分析对结果进行统计分析。结果:血清IL-17水平在肝囊型包虫病组(12.95+4.50)ng/L和肝复发囊型包虫病组(13.35+3.46)ng/L明显低于健康对照组(16.27+5.03)ng/L,且三组之间差异有统计学意义(P<0.05);同样,血清IL-23水平在肝囊型包虫病组(105.44+53.89)ng/L和肝复发囊型包虫病组( 100.64+48.32 ) ng/L也明显低于健康对照组(139.30+50.42)ng/L,且差异有统计学意义(P<0.05);同上述结果相反,血清IL-10水平在肝囊型包虫病组(4.31+2.00)ng/L和肝复发囊型包虫病组(4.23+1.38)ng/L明显高于健康对照组(3.08+0.82)ng/L,且差异有统计学意义(P<0.05);同样,血清TGF-β水平在肝囊型包虫病组(36.51+7.02)ng/mL和肝复发囊型包虫病组(33.16+8.86)ng/mL明显高于健康对照组(26.17+6.60)ng/mL,且差异有统计学意义(P<0.01)。三组中IL-17/IL-10比例在肝囊型包虫病组(3.58+1.52)和肝复发囊型包虫病组(3.41+1.68)明显低于健康对照组(5.74+2.63),三组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。此外,研究发现三组中血清IL-23水平和IL-17水平呈正相关(r=0.664,P<0.01),血清TGF-β水平和IL-10水平呈正相关(r=0.344,P<0.01);实时荧光定量PCR结果发现,外周血单个核细胞中ROR-γτ的表达在肝囊型包虫病组(0.067+0.047)(ROR-γτ拷贝数/GAPDH拷贝数),肝复发囊型包虫病组(0.059+0.056)明显低于健康对照组(0.111+0.603),且差异有统计学意义(P<0.05);然而,FoxP3的表达在肝囊型包虫病组(0.007+0.005)(FoxP3拷贝数/GAPDH拷贝数)和肝复发囊型包虫病组(0.008+0.010)均高于健康对照组(0.006+0.005),但差异无统计学意义(P>0.05)。此外,ROR-γτ/FoxP3比值在肝囊型包虫病组(12.64+7.59)和肝复发囊型包虫病组(9.69+6.10)均明显低于健康对照组(24.74+19.24),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Th17细胞相关细胞因子(IL-17和IL-23)及其特异性转录因子ROR-γτ在肝囊型包虫病患者外周血单个核细胞中表达降低,与此相反Treg细胞相关细胞因子(IL-10和TGF-β)和特异性转录因子FoxP3的表达在肝囊型包虫病组明显升高。Th17/Treg细胞免疫应答平衡在肝囊型包虫病中向具有免疫抑制特性的Treg细胞偏移。Th17和Treg细胞转录因子和相关细胞因子平衡向Treg应答偏倚可能是包虫发病和发展过程中主动负性调节宿主免疫应答,逃避宿主免疫攻击得以在宿主体内长期寄生的可能的机制之一。

全文目录


摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
前言  12-14
资料与方法  14-22
  1. 研究对象  14-15
    1.1 纳入和排除标准  14
    1.2 标本收集  14-15
  2. 实验材料  15-16
    2.1 主要试剂  15-16
    2.2 主要仪器与耗材  16
  3. 实验方法  16-21
    3.1 主要溶液及配制方法  16
    3.2 血清的分离  16
    3.3 相关细胞因子的检测  16-18
    3.4 外周血淋巴细胞的分离  18
    3.5 RNA 抽提及逆转录 PCR(RT-PCR)  18-20
    3.6 实时荧光定量 PCR 反应(Real Time PCR)  20-21
  4. 统计学分析  21-22
结果  22-32
讨论  32-41
小结  41-42
致谢  42-43
参考文献  43-46
综述  46-55
在校期间发表的文章及其学术会议  55-56
导师评阅表  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 寄生虫病 > 蠕虫病 > 绦虫病与囊虫病 > 棘球蚴病（包虫病）
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