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烟草青枯病生防菌的筛选、定殖与应用研究

作　者: 吕建林
导　师: 刘二明
学　校: 湖南农业大学
专　业: 微生物学
关键词: 烟草青枯病 生物防治 筛选 定殖 联合处理 混合接种
分类号: S476
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 278次
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内容摘要


烟草青枯病是由茄科罗尔氏菌(Ralstonia solanacearum E. F Smith)引起的细菌性土传病害,其分布广、危害严重。它不仅危害烟草,而且还危害许多茄科作物,迄今还没有一种有效的药剂防治它。因此发掘有效的生防菌来防治该病,具有重要的现实意义。本研究采用抑菌圈-定殖力双重测定法,筛选出FT12、F08、Y05三个对青枯菌抑菌作用较强的菌株。抑菌谱测定表明,三个菌株有较宽的抑菌谱。依据三个菌株的形态学、生物学和生理生化特性对它们进行分类鉴定,初步确定FT12为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),F08、Y05为侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)。此外,三个菌株有很强的定殖能力。在温室防病试验中,其平均防病效果分别达70.21%(FT12)、70.70%(F08)和60.69%(Y05)。用双抗标记法测定了3株生防菌,内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B001、内生短短芽孢杆菌(Bacillus brevis) B011和根围侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus) 2-Q-9,在烟株根茎叶及根表土壤中的定殖和消长动态。结果表明,3株生防菌具有很强的定殖能力,其中以B011的定殖能力最强。平板拮抗试验表明,3株生防菌相互间无拮抗作用,且混合菌群的抑菌活性有所增强。生防菌B001、B011和2-Q-9以不同组合混合接种烟株后,生防菌两两混接总体上可提升其定殖力,但3株混接对B011和2-Q-9有抑制作用；在烟株接种移栽后的第60d,各混接组合的定殖总量均达到最大,其中B001+B011和B011+2-Q-9组合的定殖总量分别达7.28、7.231g-cfu/g,远高于其它处理。将生防菌B001、B011和2-Q-9浸根,灌根,注射,拌饼肥的生物防治法与喷雾农用链霉素的化学防治法相结合,筛选出了对青枯病防效较好的防治组合。其中,联合处理的防治效果均优于72%农用链霉素单独处理。拌饼肥联合处理要好于对应的不拌饼肥处理,注射法联合处理好于对应的非注射法处理；根围生防菌2-Q-9与农用链霉素联合处理优于对应的单用2-Q-9处理,但链霉素与两株内生菌B001、B011的联合处理却对2株生防菌产生抑制作用。同时,筛选出的内生生防菌拌饼肥-灌根-注射联合处理的施用组合,其防效分别达51.37%(B001),71.20%(B011)；2-Q-9的菌饼肥-菌灌根-喷雾Agr-SM组合,其防效可达62.32%。将3株生防菌B001、B011和2-Q-9混合接种,表明多功能菌群协同防治烟草青枯病具有有效性和可行性。生防菌B001、B011和2-Q-9的不同组合混接烟株后,其防治效果均优于72%的农用链霉素单独处理；两菌混接要优于对应的单菌处理,其中以B011+2-Q-9组合防效最好,达83.39%,其次是B001+B011组合,防效为78.34%；但三株混接的防效仅为45.49%,低于所有生防处理。

全文目录


中文摘要  7-9
Abstract  9-11
第一章 绪论  11-24
  1 植物病虫害生防治的研究进展  11-16
    1.1 生物农药概述  11
    1.2 微生物源杀菌剂  11-13
    1.3 微生物源杀虫剂  13-14
    1.4 生物农药应用展望  14-16
  2 植物细菌性青枯病  16-18
    2.1 植物细菌性青枯病的危害  16-17
    2.2 青枯菌致病机理研究  17-18
  3 烟草青枯病防治研究动态  18-22
    3.1 病害症状  18
    3.2 发病条件及流行规律  18-19
    3.3 烟草青枯病的综合防治  19-22
  4 研究目的和意义  22-24
第二章 用抑菌圈-定殖力双重测定法筛选青枯病生防菌  24-37
  1 材料与方法  24-29
    1.1 实验材料  24-25
    1.2 试验方法  25-28
    1.3 菌株抑菌谱测定  28
    1.4 温室生防试验  28-29
    1.5 拮抗菌类群的鉴定  29
  2 结果  29-35
    2.1 分离结果  29
    2.2 拮抗细菌平板筛选  29-31
    2.3 各菌株在烟草茎部及根围土壤的定殖能力  31-32
    2.4 菌株抑菌谱  32
    2.5 温室生防试验  32-33
    2.6 三株生防菌株种类鉴定  33-35
  3 讨论  35-37
第三章 生防菌混合接种对其定殖量的影响  37-46
  1 材料与方法  37-41
    1.1 烟草品种  37
    1.2 供试菌株及抗生素  37-38
    1.3 烟草青枯病菌强致病力株的筛选  38
    1.4 菌株的抗药性标记  38-39
    1.5 突变株的遗传稳定性及与原始菌株的同一性测定  39
    1.6 盆栽土壤及培养盆  39
    1.7 烟草播种及幼苗浸根接种处理  39-40
    1.8 目标菌回收  40-41
  2 结果与分析  41-44
    2.1 突变株的遗传稳定性及与原始菌株的同一性测定  41-42
    2.2 生防菌的定殖动态  42-44
  3 讨论  44-46
第四章 生防菌不同接种方法对其防治烟草青枯病的影响  46-51
  1 材料与方法  46-48
    1.1 试验材料  46-47
    1.2 方法  47-48
  2 结果与分析  48-50
    2.1 B001不同处理防治烟草青枯病效果  49
    2.2 B011不同处理防治烟草青枯病效果  49
    2.3 2-Q-9不同处理防治烟草青枯病效果  49-50
  3 讨论  50-51
第五章 生防菌混合接种对其防治烟草青枯病的影响  51-54
  1 材料与方法  51-52
    1.1 试验材料  51
    1.2 方法  51-52
  2 结果与分析  52-53
  3 讨论  53-54
第六章 结论与创新点  54-57
  1 结论  54-55
  2 主要创新点  55-56
  3 今后的研究方向与目标  56-57
参考文献  57-65
附录  65-70
致谢  70-71
作者简介  71

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 各种防治方法 > 生物防治
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