学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
我国四省区梨主要病害的病原鉴定、分子检测与药剂筛选研究
作 者: 付余波
导 师: 胡白石
学 校: 南京农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 梨病害 病原真菌 鉴定 检测 药剂筛选
分类号: S436.612
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 36次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
梨病害是限制我国梨产业健康发展的重要因子之一。当前,我国梨主要病害尚未得到根本性地控制,新的病害又不断出现,一些次要病害也有可能上升为主要病害。而在防治过程中,普遍存在轻防重治思想。生长季节前期对病害的病原认识不明,错过了防治的最佳时期。同时,大量常规化学药剂的使用,使许多病原菌产生了抗药性。因此明确我国梨主产区病害种类、建立梨病害快速诊断技术以及筛选新型、高效、低毒的杀菌剂对我国梨产业的健康发展具有重要的意义。为了明确我国梨产区梨病害的种类,2007年和2008年对我国江苏省、安徽省、陕西省、新疆维吾尔自治区4个省区10个县市的梨树主要病害种类进行了调查。调查结果绘制成梨病害分布图,已上传至本实验室主办的梨树病害防控网(网站域名:http://lsbh.njau.edu.cn/)。调查发现:江苏省梨轮纹病为害最为严重,安徽省梨炭疽病已上升为第一病害,陕西省和新疆维吾尔自治区梨腐烂病尤为突出。此外,4个省区梨黑斑病均有发生且危害也较为严重,陕西省蒲城县部分梨园突现梨白粉病,60%以上叶片感染此病。本研究分离了梨轮纹病、梨炭疽病、梨黑斑病、梨腐烂病、梨白粉病的病原菌,并采用形态学及分子生物学相结合的方法对其进行了鉴定。结果表明,梨轮纹病、梨炭疽病、梨腐烂病、梨黑斑病和梨白粉病的病原菌分别为:贝伦格氏葡萄座腔菌(Botryosphaeria berengeriana)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、梨黑腐皮壳菌(Valsa ambiens)、链格孢菌(Alternaria alternata)、梨球针壳菌(Phyllactinia pyri)。根据GenBank中葡萄座腔菌属不同种的内转录间隔区(ITS)序列差异,设计了特异性引物Bb1/Bb2检测梨轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana)。引用报道的两对引物E1/E2、AAF2/AAR3分别检测梨炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和梨黑斑病菌(Alternaria alternata)。进一步利用此3对引物分别建立了快速检测及诊断梨轮纹病、梨炭疽病、梨黑斑病技术,为生产上提供技术服务。试验结果表明,在供试的24种不同病原真菌中引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3分别只能从B.berengeriana、C. gloeosporioides、A. alternata基因组DNA中扩增到一条分子量326bp、329bp、340bp的特异性条带,这三对引物的检测灵敏度分别为1pg、lpg和10pg。以真菌通用引物ITS1/ITS4结合梨轮纹病菌特异性引物Bb1/Bb2进行巢式PCR扩增,可以使引物Bb1/Bb2检测灵敏度至少提高105倍,应用此方法直接对梨组织进行检测,亦可以检测到潜伏侵染的梨轮纹病菌。而用引物E1/E2和AAF2/AAR3对感染了梨炭疽病菌和梨黑斑病菌的梨组织进行常规PCR检测,可以快速稳定地检测到病原菌。在实验室内,采用生长速率法进行了21种杀菌剂对梨炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana),黑斑病菌(Alternaria alternata)有效药剂的筛选并测定其毒力。通过EC50值分析结果表明,50%咪鲜胺可湿性粉剂对梨炭疽病菌、梨轮纹病菌均表现为最高毒力,其EC5o值分别是0.1195mg/L、0.0426 mg/L;50%异菌脲悬浮剂对梨黑斑病菌毒力最高,其ECso值为0.6964 mg/L;对梨炭疽病菌、梨轮纹病菌、梨黑斑病菌都具有较高毒力的杀菌剂是:50%咪鲜胺可湿性粉剂、25%咪鲜胺乳油、40%氟硅唑乳油、25%嘧菌酯悬浮剂、10%苯醚甲环唑(商品名:胜世)水分散粒剂、10%苯醚甲环唑(商品名:世高)水分散粒剂、50%异菌脲悬浮剂。本实验为田间选择合适药剂防治梨炭疽病、轮纹病、黑斑病提供参考依据。
|
全文目录
摘要 7-9ABSTRACT 9-11上篇 文献综述 11-34 第一章 梨主要病害及综合防控研究现状概述 12-24 1 梨主要病害的研究现状 12-18 1.1 侵染性病害 12-18 1.2 非侵染性病害 18 2 梨病害防治研究现状 18-24 2.1 综合治理的原则和策略 18-19 2.2 梨主要病害的防治方法 19-24 第二章 植物病原真菌的分类鉴定研究方法 24-28 1 形态学分类鉴定 24 2 分子生物学分类鉴定 24-27 2.1 RAPD技术 25 2.2 微卫星技术 25-26 2.3 rDNA-ITS 26 2.4 RFLP 26 2.5 AFLP 26-27 3 总结 27-28 第三章 植物病原真菌的检测技术研究进展 28-34 1 形态学检测方法 28-29 1.1 症状观察 28-29 1.2 分离培养 29 1.3 镜检 29 2 基于PCR的分子生物学检测方法 29-33 2.1 常规PCR 30-31 2.2 巢式PCR 31 2.3 实时荧光PCR 31-32 2.4 多重PCR 32 2.5 PCR ELISA技术 32-33 3 前景与展望 33-34下篇 研究内容 34-71 第一章 我国4省区梨病害分布调查及主要病原菌的分离鉴定 35-49 1 试验材料与方法 37-40 1.1 供试材料 37 1.2 方法 37-40 2 结果与分析 40-48 2.1 江苏省、安徽省、陕西省、新疆维吾尔自治区梨树主要病害种类 40-41 2.2 梨轮纹病 41-42 2.3 炭疽病 42-44 2.4 黑斑病 44-45 2.5 梨腐烂病 45-46 2.6 梨白粉病 46-47 2.7 梨锈病 47-48 3 讨论 48-49 第二章 梨轮纹病、炭疽病、黑斑病病原菌的分子检测 49-63 1 材料与方法 51-54 1.1 材料 51-52 1.2 方法 52-54 2 结果与分析 54-60 2.1 引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3的特异性PCR扩增 54-56 2.2 引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3灵敏度验证 56-58 2.3 发病植株组织中病原物的快速检测 58-59 2.4 结论 59-60 3 讨论 60-63 第三章 21种杀菌剂对梨炭疽病菌、轮纹病菌、黑斑病菌的室内毒力测定 63-71 1 材料与方法 64-66 1.1 材料 64-66 1.2 供试方法 66 2 结果分析 66-69 2.1 供试杀菌剂对梨炭疽病菌的毒力测定结果 66-67 2.2 供试杀菌剂对梨轮纹病菌的毒力测定结果 67-68 2.3 供试杀菌剂对梨黑斑病的毒力测定结果 68 2.4 结论 68-69 3 讨论 69-71附录一 梨树病害防控网的建立 71-73附录二 上传GENBANK的几种病原真菌ITS序列 73-79附录三 发表或待发表的论文 79-81参考文献 81-93致谢 93
|
相似论文
- 基于DSP的离焦信号同步采集与处理技术研究,TH741
- 慢光光纤陀螺信号检测电路设计,V241.5
- 光纤陀螺信号处理线路FPGA实现,V241.5
- 基于ARM9机车信号系统检测装置的设计与优化,U284.91
- 路面平整度检测系统中的数据采集和定位技术研究,U416.2
- 基于SVM的高速公路路面浅层病害的自动检测算法研究,U418.6
- 航天继电器时间参数测试分析技术的研究,TM58
- HID灯整流效应的研究,TM923.32
- 基于均值匹配的Turbo码联合译码的Matlab实现,TN911.22
- 天波超视距雷达目标仿真与信号处理算法研究,TN958.93
- 图像拼接技术研究,TP391.41
- 基于人眼检测的驾驶员疲劳状态识别技术,TP391.41
- 双传感器图像联合目标检测及系统实现研究,TP391.41
- 舌图像中瘀斑瘀点检测技术研究,TP391.41
- 多币种纸币处理技术的研究与实现,TP391.41
- PCB视觉检测系统中相机标定算法与位姿测定技术,TP391.41
- 基于嵌入式图像处理单元的运动目标跟踪系统研究,TP391.41
- 基于主动方式的恶意代码检测技术研究,TP393.08
- 基于行为特征的IRC僵尸网络检测方法研究,TP393.08
- 面向嵌入式超声检测系统的图形接口设计与应用,TP274.53
- 移动机器人视觉检测和跟踪研究,TP242.62
中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 果树病虫害 > 仁果类病虫害 > 梨病虫害
© 2012 www.xueweilunwen.com
|