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小鼠单侧睾丸动脉结扎构建自身免疫性睾丸炎模型的探讨

作　者: 张冰
导　师: 玛衣拉·阿不拉克
学　校: 新疆医科大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 动脉结扎自身免疫性睾丸炎迟发型过敏反应 BALB/c小鼠
分类号: R697.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:本实验通过结扎小鼠一侧睾丸动脉并于不同时间后再通以诱导自身免疫性睾丸炎,观察睾丸生精上皮、血液中抗精子抗体(AsAb)IgG、IgM以及迟发型超敏反应的变化。实验探讨了一侧睾丸动脉结扎再通后,小鼠发生自身免疫性睾丸炎的机制,并试图将此作为一种新型的构建小鼠自身免疫性睾丸炎模型的方法。方法:选用健康成年雄性BALB/c小鼠,随机分为4组:对照组(A)(麻醉后仅进行阴囊切开后缝合),实验1组(S1)(单侧睾丸动脉结扎,2小时后再开通血管),实验2组(S2)(单侧睾丸动脉结扎,4小时后开通血管),实验3组(S3)(单侧睾丸动脉结扎,6小时后再开通血管)。分别于术后12h,2周,4周应用光镜观察石蜡包埋HE染色后的小鼠睾丸组织结构,应用透射电镜技术观察术后12小时小鼠睾丸组织的超微结构。采用ELISA法检测2周、4周时各组小鼠血液中的抗精子抗体(AsAb)IgG、IgM浓度水平;采用游标卡尺测量单侧动脉结扎再通后对睾丸自身抗原的足垫反应。结果:1.HE染色观察:①术后12h的,A组小鼠睾丸生精小管内无生精细胞脱落,各级生精细胞排列整齐、层次清楚,结构正常,显示活跃的精子发生。间质中可见间质细胞正常,核大而圆,偏位。S1组小鼠术侧睾丸生精小管较为完整,小管内可见轻微的生精细胞脱落,偶见生精小管内空泡变。S3组小鼠术侧睾丸生精小管之间间隙增宽,生精小管内生精细胞层数减少。间质中血管充血明显,管腔中充满了红细胞,血管壁增厚呈玻璃样变,同时血管内近壁侧可以看见较多的炎性细胞(主要是白细胞)的浸润。S4组小鼠术侧睾丸间质中可以看到较多的炎性细胞浸润。睾丸生精小管内生精细胞层数减少,看不到精子,细胞肿胀明显,胞质透亮。可以看到多核巨细胞散落分布在睾丸生精小管管腔中。各组非术侧睾丸生精上皮规则,生精细胞排列有序,可见大量精子。间质中可见间质细胞,核大而圆,偏位。②术后2周的光镜结果:A组小鼠睾丸组织结构正常,与术后12h无显著差异。S1组睾丸生精小管内生精细胞层数减少,可见空泡状结构。S2、S3组均可见不同程度的生精细胞脱落、排列紊乱,生精上皮变薄、空泡样变。间质中血管增多、血管壁变厚,在血管周围和生精小管界膜附近,可见炎性细胞浸润。③术后4周时各组光镜结果与2周时相比较,无明显结构上的差异。2.透射电镜观察:A组小鼠睾丸生精上皮结构完整,细胞无肿胀变性;其余各手术组均可见不同程度的睾丸生精细胞肿胀变性坏死。3.血清抗精子抗体IgG与IgM检测结果:各实验组与正常对照组比较,血清中抗精子抗体IgG及IgM的浓度明显升高,具有统计学意义(P<0.05);4.足趾肿胀实验:各手术组均出现迟发型过敏反应。结论:单侧睾丸动脉结扎/再通后:1.术侧睾丸组织首先表现为一种缺血性的炎症表现,有大量的炎性细胞的浸润(主要是白细胞);2.术后虽然恢复了血液供应,但仍可见小鼠睾丸生精上皮脱落明显,生精细胞层数减少,可见炎细胞浸润(主要为单个核细胞)。3.血清中有抗精子抗体IgG、IgM出现。4.可以刺激机体形成迟发型超敏反应。5.此种手术方法可以成功建立自身免疫性睾丸炎模型。

全文目录

摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-12
材料与方法  12-17
  1. 主要试剂和仪器  12-13
  2. 实验方法  13-14
  3. 实验观察指标  14-16
  4. 实验质量控制  16-17
  5. 统计学处理  17
结果  17-26
讨论  26-33
小结  33-34
致谢  34-35
参考文献  35-39
综述  39-52
攻读硕士学位期间发表的学位论文  52-53
勘误表  53-54
导师评阅表  54

小鼠单侧睾丸动脉结扎构建自身免疫性睾丸炎模型的探讨

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