学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
MTX对映体诱导白血病细胞BALL-1、CCRF-CEM耐药及其耐药机制的研究
作 者: 索美芳
导 师: 沈佐君
学 校: 蚌埠医学院
专 业: 临床检验诊断学
关键词: 白血病 氨甲喋呤 对映体 聚合酶链反应 表皮生长因子受体
分类号: R733.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
下 载: 2次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
目的建立耐氨甲蝶呤(MTX)对映体的人白血病BALL-1和CCRF-CEM细胞株,观察其生物学特性。分析MTX不同对映体耐药细胞株表皮生长因子受体(EGFR)信号通路相关基因的表达。方法浓度递增结合低剂量持续诱导的方法建立MTX不同对映体耐药细胞株,显微镜观察不同MTX对映体作用BALL-1和CCRF-CEM细胞株后细胞形态变化及活性差异,MTT法检测耐药细胞株和亲本细胞株耐药指数,细胞计数法绘制细胞生长曲线,Transwell实验检测D-(-)-MTX耐药细胞株与L-(+)-MTX耐药细胞株迁移能力差异,流式细胞仪检测细胞周期。RT-PCR法检测各细胞株EGFR、KRas、TGF、PI3K基因mRNA的表达情况。结果1.采用浓度递增结合低剂量持续诱导的方法,成功建立MTX不同对映体对BALL-1、CCRF-CEM细胞的耐药细胞株;MTT检测结果表明:L-(+)-MTX/BALL-1,CCRF-CEM对L-(+)-MTX的耐药指数分别为2.89,3.73。D-(-)-MTX/BALL-1,CCRF-CEM对D-(-)-MTX的耐药指数分别为9.65,10.72。2.荧光显微镜观察发现L-(+)-MTX作用后的BALL-1和CCRF-CEM凋亡数和非凋亡死亡数明显高于D-(-)-MTX,而活细胞数低于D-(-)-MTX。3. Transwell迁移实验结果提示D-(-)-MTX耐药细胞株迁移能力强于L-(+)-MTX耐药细胞株。4.细胞生长曲线和流式细胞仪检测显示:与亲本细胞BALL-1,CCRF-CEM相比L型和D型耐MTX细胞株的增殖速度减慢(P<0.05),S期细胞数量减少(P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05)。5. BALL-1细胞组(BALL-1,L型,D型耐MTX细胞株)有EGFR mRNA基因表达,目的基因与内参基因的光密度比值差异有统计学意义(F=641.41,P=0.000),L型与D型耐MTX细胞株光密度值差异有统计学意义(P=0.000);BALL-1细胞组有KRas mRNA基因表达(F=673.086,P=0.000),L型与D型耐MTX细胞株光密度值差异有统计学意义(P=0.004)。CCRF-CEM细胞组(CCRF-CEM,L型,D型耐MTX细胞株)亦有EGFR和K-Ras mRNA基因表达(F=151.323,P=0.000),(F=330.894,P=0.000),其中L型与D型耐MTX细胞株光密度值差异有统计学意义(EGFRmRNA P=0.000,K-RasmRNA P=0.003)。两组细胞有TGFmRNA表达,差异无统计学意义(P>0.05)。两组细胞无PI3KmRNA基因表达。结论D型耐MTX细胞株增殖能力大于L型耐MTX细胞株;D型耐MTX细胞株迁移能力大于L型耐MTX细胞株;EGFR及K-Ras mRNA基因表达在L型和D型耐MTX细胞株之间存在差异。
|
全文目录
中文摘要 5-7 Abstract 7-9 前言 9-11 材料与方法 11-23 结果 23-33 讨论 33-36 结论 36-37 参考文献 37-41 致谢 41-42 附录 A 主要英文缩略词表 42-43 附录 B 个人简介及发表论文 43-44 附录 C 综述 44-53 参考文献 50-53
|
相似论文
- 慢性粒细胞白血病患者慢性期和急变期(急髓变)骨髓中己糖激酶Ⅰ水平变化的研究,R733.7
- 延胡索乙素的立体选择性代谢及其对肝脏药物代谢酶的影响,R96
- 多聚糖PC类衍生物CSPs的合成及手性分离能力的研究,TQ460.1
- J亚型禽白血病病毒抗体检测方法的建立及LTR体外启动活性分析,S858.31
- 三种方法对儿童肺炎支原体感染诊断的动态评价,R725.6
- 右旋柠烯通过线粒体途径诱导人白血病细胞凋亡,R733.7
- 过敏性紫癜免疫发病机制的探讨,R554.6
- 建立稳定过表达HMGB1蛋白的K562细胞株,R733.7
- 急性髓系白血病中MT1FmRNA与VEGFmRNA的表达研究,R733.71
- MT1A和MT1X在急性白血病中的表达及相关性研究,R733.71
- 经子宫动脉介入治疗宫颈妊娠临床价值的探讨(附12例病例分析),R714.22
- 罗汉果的遗传毒性与胚胎发育毒性实验研究,R285.5
- 应用抑制性差减杂交技术分离白血病多药耐药相关基因,R733.7
- 急性白血病儿童还原型叶酸载体基因多态性研究,R733.71
- 手性多氯联苯和拟除虫菊酯类农药在超临界流体色谱中的对映体分离研究,O657.7
- 四种手性农药对甾体类激素代谢影响的对映体选择性,X503.1
- EGFR和STAT3mRNA在卵巢上皮癌中的表达及意义,R737.31
- 重组厌氧芽胞梭菌eglA p-Her2/neu-IL12融合基因穿梭表达载体的构建,R378
- EGFR及下游信号分子在卵巢癌中的表达及临床意义,R737.31
- EGFR及其信号通路分子在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床意义,R737.31
- 具有光、磁和铁电性质的手性分子基稀土功能材料的构筑与研究,O641.4
中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
© 2012 www.xueweilunwen.com
|