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EGCG-β-LG纳米粒对不同肿瘤细胞活性抑制的差异

作　者: 张昀
导　师: 杜琪珍
学　校: 浙江工商大学
专　业: 食品科学与工程
关键词: EGCG EGCG-β-LG纳米粒肿瘤细胞抑制差异
分类号: R73-36
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是茶叶茶多酚中含量最多,活性最强的一种儿茶素,有着较为理想的抗肿瘤活性作用。然而EGCG易受温度、光照、pH等影响,性质不够稳定,导致EGCG在人体内的生物利用度的不高,这些缺点与不足大大削弱了其在医药领域的应用。运用纳米技术可以将EGCG包封在纳米材料里,不仅可以提高EGCG的稳定性,使其免受体液和酶的破坏；而且可以利用纳米粒本身独特的靶向性原理以及超小的粒径,使其顺利抵达肿瘤部位并进入细胞,充分发挥EGCG的药效作用,提高EGCG的生物利用度。β-乳球蛋白(β-LG)是一种天然食物来源的蛋白分子,是动物乳清蛋白之一,对人体无害,有较好的生物相容性,可以作为EGCG的纳米载体。本文在本实验室以前研究成果的基础上,以p-LG作为EGCG的纳米载体,采用热诱导法制备了四种EGCG-β-LG纳米粒(ELNP): ELNP1、ELNP2、ELNP3、ELNP4。在运用zeta电位仪和透射电镜对四种纳米粒表征的基础上,以EGCG为对照组,采用MTT法研究了四种纳米粒在不同浓度(0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL)和不同时间(24h、48h、72h、96h)下对A375人体黑色素瘤细胞、SPC-A-1人肺腺癌细胞、BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞、TE-1人食管癌细胞、MSTO-211H人肺癌细胞、NCI-N87人胃癌细胞、4T1小鼠乳腺癌细胞、SK-OV-3人卵巢癌细胞、769-P人肾细胞腺癌细胞、Hela人宫颈癌细胞、22RV1人前列腺癌细胞、B16小鼠黑色素瘤细胞、C-33A人子宫颈癌细胞、CACO-2人结直肠癌细胞14种肿瘤细胞活性抑制的差异。结果显示：1.制备的四种纳米粒的粒径介于20-30nm之间,Zeta电位值都小于-30(mV),都较为稳定。2.MTT实验结果显示：同种纳米粒对不同肿瘤细胞的抑制作用有差异,不同纳米粒对同种肿瘤细胞的抑制作用也有差异,而且这些纳米粒有着比EGCG更为理想的抗肿瘤活性。相对于等浓度的EGCG、ELNP2和ELNP3对多数肿瘤细胞的抑制效果较好；SPC-A-1人体肺腺癌细胞、TE-1人体食管癌细胞、MSTO-211H人体肺癌细胞、SK-OV-3人体卵巢癌细胞、Hela人宫颈癌细胞、B16小鼠黑色素瘤细胞6种肿瘤细胞对四种纳米粒的敏感度比其他肿瘤细胞要强。本研究为EGCG-β-LG纳米粒的制备以及其在抑制肿瘤活性领域的研究应用提供了一定的理论和实验依据。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
第1章引言  10-23
  1.1 EGCG的简介  10-14
    1.1.1 EGCG清除自由基  10
    1.1.2 EGCG防辐射作用  10-11
    1.1.3 EGCG抗癌作用  11
    1.1.4 EGCG的抗癌机制  11-14
    1.1.5 EGCG在实际应用中的问题  14
  1.2 β-乳球蛋白  14-16
    1.2.1 β-乳球蛋白简介  14-15
    1.2.2 β-LG结构变化特征  15-16
    1.2.3 β-LG的生物活性  16
  1.3 纳米技术  16-21
    1.3.1 纳米技术简介  16
    1.3.2 载药纳米粒的概念  16-17
    1.3.3 载药纳米粒的性质  17-18
    1.3.4 纳米技术在食品领域的应用  18
    1.3.5 纳米技术在抗肿瘤药物中的应用  18-21
  1.4 本课题研究的目的、意义和内容  21-23
    1.4.1 本课题研究的主要目的及意义  21
    1.4.2 本课题研究的主要内容  21-23
第2章 EGCG-β-LG纳米粒的制备及其相关测定  23-29
  2.1 材料与方法  23-24
    2.1.1 实验材料及试剂  23
    2.1.2 实验仪器  23-24
    2.1.3 实验方法  24
  2.2 实验结果与讨论  24-28
    2.2.1 EGCG-β-LG纳米粒的制备  24-25
    2.2.2 EGCG-β-LG纳米粒电位与粒径  25
    2.2.3 EGCG-β-LG纳米粒形态  25-28
  2.3 本章小结  28-29
第3章 EGCG-β-LG纳米粒对不同肿瘤细胞活性抑制差异的研究  29-54
  3.1 材料与方法  29-34
    3.1.1 实验细胞株  29-30
    3.1.2 实验材料及试剂  30
    3.1.3 仪器  30-31
    3.1.4 实验方法  31-34
  3.2 实验结果与讨论  34-52
    3.2.1 A375人体黑色素瘤细胞模型实验  34-35
    3.2.2 NCI-N87人体胃癌细胞模型实验  35-37
    3.2.3 4T1小鼠乳腺癌细胞模型实验  37-38
    3.2.4 MSTO-211H人体肺癌细胞模型实验  38-39
    3.2.5 SPC-A-1人体肺腺癌细胞模型实验  39-41
    3.2.6 769-P人体肾细胞腺癌细胞模型实验  41-42
    3.2.7 C-33 A人体子宫颈癌细胞模型实验  42-43
    3.2.8 BxPC-3人体原位胰腺腺癌细胞模型实验  43-44
    3.2.9 CACO-2人体结直肠癌细胞模型实验  44-45
    3.2.10 B16小鼠黑色素瘤细胞模型实验  45-46
    3.2.11 SK-OV-3人体卵巢癌细胞模型实验  46-48
    3.2.12 TE-1人食管癌细胞模型实验  48-49
    3.2.13 22RV1人前列腺癌细胞模型实验  49-50
    3.2.14 Hela人宫颈癌细胞模型实验  50-52
  3.3 本章小结  52-54
第4章全文总结  54-55
参考文献  55-64
致谢  64-65

EGCG-β-LG纳米粒对不同肿瘤细胞活性抑制的差异

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