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绞股蓝多糖制备工艺、理化性质及抗氧化活性研究

作　者: 郭晓波
导　师: 方成武
学　校:
专　业: 生药学
关键词: 绞股蓝 绞股蓝多糖 提取分离纯化 理化性质 生物学活性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：从中药绞股蓝中提取、分离纯化获得绞股蓝均一多糖，并对其理化性质及体外抗氧化活性进行研究，为绞股蓝重要活性组分之一——多糖类物质的研究提供重要的参考价值，为充分开发利用绞股蓝这一珍贵的中药资源提供实验基础。方法：1单因素结合响应面分析法优化绞股蓝多糖的提取工艺；采用D301G大孔树脂吸附以及DEAE-52离子交换柱氯化钠梯度洗脱对绞股蓝多糖进行分离纯化。2采用HPLC、红外光谱扫描等手段对绞股蓝多糖的纯度及分子量分布、光谱特性、单糖组成等理化性质进行了研究。3选用羟自由基、ABTS、超氧阴离子、DPPH、过氧化氢清除能力以及铁离子螯合能力测定实验对绞股蓝多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果：1单因素结合响应面分析法优化绞股蓝多糖的提取工艺，获得了绞股蓝多糖粗品。采用D301G大孔树脂吸附以及DEAE-52离子交换柱氯化钠梯度洗脱得到均一的绞股蓝多糖（命名为GPP），硫酸苯酚法和间羟联苯法分别测得其中性糖含量为73.1%和糖醛酸含量为23.9%。2对绞股蓝多糖GPP的理化性质进行了研究。紫外光谱扫描在260nm和280nm处未见明显吸收峰，元素分析结果提示GPP元素组成中不含氮元素。HPLC结合GPC法测得GPP的分子量为2.52×103kDa，且GPP呈单一的对称峰，纯度达到98.8%，说明绞股蓝多糖GPP的分子量分布比较均一。PMP衍生化HPLC法测得GPP由甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖以及少量木糖和鼠李糖组成。红外光谱分析显示，GPP的端基碳构型为α构型。3对绞股蓝多糖GPP的体外抗氧化活性进行了测定。体外抗氧化研究显示，GPP能有效地清除羟自由基和ABTS，且具有较强的铁离子螯合能力。结论：以上结果提示，多糖类组分可能是绞股蓝发挥其药效的物质基础之一，GPP表现出多种自由基清除能力以及铁离子螯合能力，可用作为一种潜在的抗氧化剂。

全文目录


摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
主要缩略词  10-11
前言  11-20
第一章 绞股蓝多糖 GPP 的制备  20-38
  1 材料、试剂与仪器  20-21
  2 实验方法  21-25
    2.1 绞股蓝多糖粗品提取  21-22
    2.2 绞股蓝粗多糖的分离纯化  22-25
  3 实验结果  25-36
    3.1 提取单因素考察  25-27
    3.2 响应面法优化绞股蓝多糖的提取条件  27-31
    3.3 绞股蓝粗多糖的分离纯化  31-36
  本章小结  36-38
第二章 绞股蓝多糖 GPP 的理化性质研究  38-47
  1 实验材料、试剂、设备  38-39
  2 实验方法  39-42
    2.1 含量测定  39-40
    2.2 溶解性测定  40
    2.3 溶液 pH 值测定  40
    2.4 元素分析  40-41
    2.5 紫外光谱分析  41
    2.6 HPLC 法测定 GPP 的纯度及分子量  41
    2.7 旋光度的测定  41
    2.8 红外光谱分析  41
    2.9 单糖组成分析  41-42
  3 结果  42-46
    3.1 含量测定  42-43
    3.2 溶解性测定  43
    3.3 溶液 pH 值测定  43
    3.4 元素分析  43
    3.5 紫外光谱分析  43-44
    3.6 HPLC 法测定 GPP 的纯度及分子量  44
    3.7 旋光度的测定  44-45
    3.8 红外光谱分析  45
    3.9 单糖组成分析  45-46
  本章小结  46-47
第三章 绞股蓝多糖的生物学活性研究  47-55
  1 材料、试剂及仪器  47-48
  2 绞股蓝多糖体外抗氧化活性研究  48-49
    2.1 羟自由基清除力  48
    2.2 ABTS 清除作用  48
    2.3 铁离子螯合能力  48
    2.4 超氧阴离子清除作用  48-49
    2.5 DPPH 清除力  49
    2.6 过氧化氢清除能力测定  49
  3 实验结果  49-54
    3.1 羟自由基清除力  49-50
    3.2 ABTS 清除作用  50-51
    3.3 铁离子螯合能力  51-52
    3.4 清除超氧阴离子自由基能力  52
    3.5 DPPH 清除作用  52-53
    3.6 过氧化氢清除能力  53-54
  本章小结  54-55
全文总结与讨论  55-57
参考文献  57-70
综述  70-78
  参考文献  76-78
致谢  78-79
个人简介  79-80
攻读学位期间发表的学术论文  80

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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