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蓝雪花(Plumbago auriculata)植物组织培养技术研究
作 者: 陈毅
导 师: 高素萍
学 校: 四川农业大学
专 业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 蓝雪花 植物组织培养 单芽 丛芽 愈伤组织 增殖 生根 激素
分类号: S682.19
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
蓝雪花(Plumbago auriculata)结实率低,种子价格较为昂贵,扩繁系数低、造成目前传统繁殖方式已无法满足蓝雪花的应用需求。组织培养技术可以克服传统繁殖方法的不足之处,在相对短的时间内可大量生产优良品种,并能促进利用遗传转化技术来提高原品种的质量和选育新品种。本文以蓝雪花为试验材料,探讨了外植体的选择、外植体的消毒、基本培养基的选择以及以茎段为外植体时不同生长调节物质在单芽诱导、丛芽增殖、诱导生根以及愈伤组织诱导、增殖等过程中的作用。实验结果如下:1.和叶片相比,茎段是较佳的外植体材料。在出愈率和出芽率上,茎段均远高于叶片。2.MS培养基比WPM培养基更适宜于蓝雪花的植物组织培养。3.外植体的消毒试验显示,70%的酒精处理45s后再用0.1mg/L升汞处理10分钟为茎段消毒的最佳处理方法。4.通过无菌短枝扦插途径诱导蓝雪花单芽发生试验发现,6-BA、NAA、IAA和2,4-D对幼嫩茎段诱导单芽的影响不同,其中对单芽诱导作用影响最显著的是6-BA,2,4-D的影响次之,NAA和IAA对单芽诱导的影响都较低。试验结果显示诱导单芽的最佳培养基为MS+0.4mg/L6-BA。5.6-BA, NAA、KT和IAA对丛芽诱导、增殖影响显著,其中对诱导作用影响最显著的是6-BA。MS+1.Omg/L6-BA+0.3mg/L NAA+0.5mg/L IAA是蓝雪花丛芽诱导和增殖的最佳培养基,该培养基中丛芽增殖率最高,为506.67%,且生长情况良好,粗壮矮密。6.生根试验发现,蓝雪花无根幼苗在不同IBA和NAA配比的生根培养基中均可诱导生根,但生根时间及根的生长状态明显不同。在整个生根正交试验中,1/2MS+0.3mg/L NAA诱导生根效果最好,生根时间最早,生根率最高,为90.00%。7.通过器官发生途径诱导蓝雪花愈伤组织发生试验发现,2,4-D对愈伤组织诱导作用最明显。MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA+0.06mg/L IAA+1.0mg/L2,4-D是诱导愈伤组织发生的最佳培养基,在此培养基中,外植体材料的出愈率最高,但蓝雪花愈伤组织不能进行继代增殖培养。
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-8 縮写词表 8-12 1 前言 12 2 文献综述 12-24 2.1 蓝雪花概述 12-14 2.1.1 形态学特征 12-13 2.1.2 繁殖方式 13 2.1.3 生态习性及分布 13 2.1.4 观赏价值、药用价值与市场前景 13-14 2.2 植物组织培养概述 14-15 2.3 影响植物组织培养的主要因素 15-19 2.3.1 培养基 15-16 2.3.2 外植体 16-17 2.3.3 外植体消毒 17 2.3.4 植物生长调节物质 17-18 2.3.5 碳源 18-19 2.3.6 光照 19 2.4 木本植物组织培养再生途径 19-20 2.4.1 无菌短枝扦插 19 2.4.2 器官发生 19 2.4.3 胚状体发生 19-20 2.5 植物组织培养中的常见问题及解决措施 20-21 2.5.1 褐化 20 2.5.2 玻璃化 20-21 2.6 蓝雪花相关科属植物组织培养技术研究现状 21-24 2.6.1 外植体选择 21-22 2.6.2 培养基选择 22 2.6.3 植物生长调节物质选择 22-24 2.6.4 蔗糖浓度选择 24 2.6.5 培养条件选择 24 2.6.6 小结 24 3 研究目的与意义 24-25 4 蓝雪花植物组织培养技术研究 25-34 4.1 材料与技术路线 25 4.1.1 材料 25 4.1.2 技术路线 25 4.2 实验内容与方法 25-34 4.2.1 母液与激素的选择和配制 26-27 4.2.2 外植体及基本培养基的选择 27-28 4.2.3 外植体消毒 28 4.2.4 蓝雪花无菌短枝扦插再生途径研究 28-31 4.2.5 蓝雪花器官发生途径研究 31-34 4.2.6 培养基及培养条件 34 4.3 数据统计与分析方法 34 5 结果与分析 34-48 5.1 不同外植体及基本培养基的选择 34-35 5.2 外植体消毒 35-37 5.3 不同激素配比对蓝雪花无菌短枝扦插再生途径影响 37-44 5.3.1 单芽诱导 37-40 5.3.2 丛芽诱导、增殖 40-43 5.3.3 生根培养 43-44 5.4 不同激素配比对蓝雪花器官发生途径影响 44-48 5.4.1 愈伤组织诱导 44-47 5.4.2 愈伤组织增殖与分化 47-48 6 结论与讨论 48-53 参考文献 53-58 图版 58-64 致谢 64-65 攻读学位期间发表的学术论文目录 65
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 观赏园艺(花卉和观赏树木) > 多年生花卉类 > 宿根花卉类 > 其他
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