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NO和H2O2对马铃薯花青素合成调控及信号转导
作 者: 马廷蕊
导 师: 张金文
学 校: 甘肃农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 马铃薯 花青素 合成代谢 NO H2O2 信号传导 ROS反应
分类号: S532
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
花青素是一类广泛存在于植物体的水溶性天然色素,常与各种单糖形成花色苷,因吸光性差异而表现不同颜色,具有抗氧化、抗突变、抗增生、保护肝脏、抑制肿瘤细胞发生等多种生理功能。而彩色马铃薯具有很高的花青素含量,近年来引起人们的关注。目前,关于信号分子对于彩色马铃薯花青素的合成及其调控研究较少。本研究以不同颜色的马铃薯:陇薯8号、陇薯7号、LC310-2和山东彩肉4个品种(系)为材料,研究了一氧化氮(NO)和H2O2对花青素合成的调控及信号传导,结果发现:(1)分别用清水、0.1mmol/L SNP、0.25mmol/L H2O2、0.1mmol/L SNP+0.25mmol/LH2O2处理,发现4个基因型马铃薯薯皮和薯肉花青素含量较对照都有不同程度的提高,其中NO+H2O2>H2O2>NO>清水。同时,马铃薯薯皮和薯肉的PAL和CHI酶活性升高。说明NO和H2O2可能通过调节花青素合成的相关酶活性促进马铃薯花青素积累。(2)盆栽试验研究了NO和H2O2对马铃薯细胞Ca2+信号分子的变化的影响极其与花青素合成的关系,发现外源NO和H2O2处理后,Ca2+-ATPase活性升高,CaM含量增加,并且,花青素的积累量与Ca2+-ATPase活性和CaM含量的呈正相关,其平均决定系数(R2)达0.9194和0.8859。(3) NO、H2O2和NO+H2O2处理后,4个马铃薯基因型中的氧自由基O2-.产率、H2O2含量增加,相应的与自由基清除有关的SOD、CAT和POD酶活性也升高,花青素含量增加,且花青素含量的变化与活性氧产率、酶活性均表现正相关。(4)前人研究发现Ca2+除了本身能诱导植物花青素合成与积累,也作为一种重要的信号分子,转导环境因子、外源化学物质和金属离子等对植物花青素合成的诱导,在NO和H2O2作用的信号转导中,NO和H2O2可以直接诱导Ca2+/CaM途径发生,也通过ROS途径调控细胞Ca2+/CaM系统功能启动。根据试验结果我们推测,外源NO和H2O2处理后,促进活性氧代谢加剧,细胞膜离子渗漏增强,胞外Ca2+内流,膜上Ca2+-ATP酶活性提高,增强了Ca2+跨膜运输与Ca2+/CaM结合几率,从而活化了花青素合成通路调节蛋白活性,致使花青素合成量增加,即膜上ROS反应与细胞Ca2+/CaM参与NO和H2O2诱导的马铃薯花青素代谢的信号过程。
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全文目录
摘要 2-3 SUMMARY 3-4 缩略词表 4-6 目录 6-8 第一章 文献综述 8-19 1 花青素的化学及其功能 8-9 2 花青素合成相关酶的分子生物学研究 9-11 2.1 查尔酮合成酶 9 2.2 查尔酮异构酶 9 2.3 黄烷酮 3-羟化酶 9-10 2.4 二羟基黄酮醇还原酶 10 2.5 类黄酮 3-O-糖基转移酶 10 2.6 花色素苷合成酶 10 2.7 苯丙氨酸解氨酶 10-11 3 花青素生物合成途径 11-12 4 花青素合成的基因调控 12-14 5 外源因子对植物花青素代谢的调节 14-17 5.1 外源激素对植物花青素合成的调控 14 5.1.1 乙烯对花青素合成调控 14 5.1.2 脱落酸对花青素合成调控 14 5.1.3 赤霉素对花青素合成调控 14 5.1.4 油菜酸内酯对花青素合成调控 14 5.2 植物信号分子与花青素合成的关系 14-15 5.2.1 Ca~(2+)/CaM 信号体系对花青素合成调控 14-15 5.2.2 G 蛋白对花青素合成调控 15 5.3 环境因素与植物花青素代谢的关系 15-17 5.4 NOS/ROS 系统与花青素合成关系 17 5.4.1 NO 诱导植物次生代谢物质的合成 17 5.4.2 H_2O_2诱导植物次生代谢物质的合成 17 6 研究的目的和意义 17-18 7 研究的技术路线 18-19 第二章 NO 和 H_2O_2对马铃薯花青素合成调控 19-24 1 材料与方法 19-20 1.1 供试品种 19 1.2 材料的处理 19-20 1.3 指标测定与数据处理 20 1.3.1 花青素含量的测定 20 1.3.2 苯丙氨酸裂解酶活性测定 20 1.3.3 多酚氧化酶活性的测定 20 1.3.4 查尔酮异构酶活性测定 20 2 结果与分析 20-23 2.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯块茎花色素含量的影响 20-21 2.2 NO 和 H_2O_2处理对马铃薯花青素合成相关酶活性的影响 21-23 3 讨论 23-24 第三章 NO 和 H_2O_2在马铃薯花青素积累中的信号传导 24-29 1 材料与方法 24-25 1.1 盆栽与处理 24 1.2 指标测定数据处理 24-25 1.2.1 CaM 含量测定 24 1.2.2 Ca~(2+)-ATPase 活性测定 24-25 2 结果分析 25-27 2.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯块茎花色素含量的影响 25 2.2 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎细胞 Ca~(2+)/CaM 信号物质的影响 25-27 2.2.1 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎 CaM 含量的影响 25-26 2.2.2 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎 Ca~(2+)-ATPase 活性的影响 26-27 3 讨论 27-29 3.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯花青素代谢作用 27-28 3.2 外源信号诱导马铃薯花青素合成的 Ca~(2+)依赖途径 28-29 第四章 膜上信号 ROS 反应与马铃薯花青素代谢调节 29-37 1 材料与方法 29-30 1.1 试验材料 29 1.2 盆栽试验与处理 29 1.3 指标测定 29-30 1.3.1 O-.2产率测定 29 1.3.2 H_2O_2含量测定 29 1.3.3 SOD、CAT 和 POD 活性测定 29-30 2 结果分析 30-35 2.1 NO 和 H_2O_2处理对马铃薯 ROS 迸发参数影响 30-33 2.1.1 NO 和 H_2O_2处理后不同马铃薯基因型块茎活性氧变化 30 2.1.2 NO 和 H_2O_2处理对不同马铃薯基因型块茎 H_2O_2含量影响 30-31 2.1.3 NO 和 H_2O_2处理后不同马铃薯基因型的块茎抗氧化酶活性变化 31-33 2.2 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量与 ROS 迸发参数的相关性分析 33-35 2.2.1 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量变化与氧自由基发生的相关性 34 2.2.2 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量变化与氧自由基清除酶活性的相关性 34-35 3 讨论与结论 35-37 3.1 细胞膜上信号 ROS 系统与 NO 信号关系 35 3.2 细胞 Ca~(2+)/CaM 信号和 ROS 系统在次生代谢中的关系 35-37 参考文献 37-44 致谢 44-45 导师简介 45-47 在研期间发表论文 47
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 薯类作物 > 马铃薯(土豆)
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