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NO和H2O2对马铃薯花青素合成调控及信号转导

作 者: 马廷蕊
导 师: 张金文
学 校: 甘肃农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 马铃薯 花青素 合成代谢 NO H2O2 信号传导 ROS反应
分类号: S532
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 18次
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内容摘要


花青素是一类广泛存在于植物体的水溶性天然色素,常与各种单糖形成花色苷,因吸光性差异而表现不同颜色,具有抗氧化、抗突变、抗增生、保护肝脏、抑制肿瘤细胞发生等多种生理功能。而彩色马铃薯具有很高的花青素含量,近年来引起人们的关注。目前,关于信号分子对于彩色马铃薯花青素的合成及其调控研究较少。本研究以不同颜色的马铃薯:陇薯8号、陇薯7号、LC310-2和山东彩肉4个品种(系)为材料,研究了一氧化氮(NO)和H2O2对花青素合成的调控及信号传导,结果发现:(1)分别用清水、0.1mmol/L SNP、0.25mmol/L H2O2、0.1mmol/L SNP+0.25mmol/LH2O2处理,发现4个基因型马铃薯薯皮和薯肉花青素含量较对照都有不同程度的提高,其中NO+H2O2>H2O2>NO>清水。同时,马铃薯薯皮和薯肉的PAL和CHI酶活性升高。说明NO和H2O2可能通过调节花青素合成的相关酶活性促进马铃薯花青素积累。(2)盆栽试验研究了NO和H2O2对马铃薯细胞Ca2+信号分子的变化的影响极其与花青素合成的关系,发现外源NO和H2O2处理后,Ca2+-ATPase活性升高,CaM含量增加,并且,花青素的积累量与Ca2+-ATPase活性和CaM含量的呈正相关,其平均决定系数(R2)达0.9194和0.8859。(3) NO、H2O2和NO+H2O2处理后,4个马铃薯基因型中的氧自由基O2-.产率、H2O2含量增加,相应的与自由基清除有关的SOD、CAT和POD酶活性也升高,花青素含量增加,且花青素含量的变化与活性氧产率、酶活性均表现正相关。(4)前人研究发现Ca2+除了本身能诱导植物花青素合成与积累,也作为一种重要的信号分子,转导环境因子、外源化学物质和金属离子等对植物花青素合成的诱导,在NO和H2O2作用的信号转导中,NO和H2O2可以直接诱导Ca2+/CaM途径发生,也通过ROS途径调控细胞Ca2+/CaM系统功能启动。根据试验结果我们推测,外源NO和H2O2处理后,促进活性氧代谢加剧,细胞膜离子渗漏增强,胞外Ca2+内流,膜上Ca2+-ATP酶活性提高,增强了Ca2+跨膜运输与Ca2+/CaM结合几率,从而活化了花青素合成通路调节蛋白活性,致使花青素合成量增加,即膜上ROS反应与细胞Ca2+/CaM参与NO和H2O2诱导的马铃薯花青素代谢的信号过程。

全文目录


摘要  2-3
SUMMARY  3-4
缩略词表  4-6
目录  6-8
第一章 文献综述  8-19
  1 花青素的化学及其功能  8-9
  2 花青素合成相关酶的分子生物学研究  9-11
    2.1 查尔酮合成酶  9
    2.2 查尔酮异构酶  9
    2.3 黄烷酮 3-羟化酶  9-10
    2.4 二羟基黄酮醇还原酶  10
    2.5 类黄酮 3-O-糖基转移酶  10
    2.6 花色素苷合成酶  10
    2.7 苯丙氨酸解氨酶  10-11
  3 花青素生物合成途径  11-12
  4 花青素合成的基因调控  12-14
  5 外源因子对植物花青素代谢的调节  14-17
    5.1 外源激素对植物花青素合成的调控  14
      5.1.1 乙烯对花青素合成调控  14
      5.1.2 脱落酸对花青素合成调控  14
      5.1.3 赤霉素对花青素合成调控  14
      5.1.4 油菜酸内酯对花青素合成调控  14
    5.2 植物信号分子与花青素合成的关系  14-15
      5.2.1 Ca~(2+)/CaM 信号体系对花青素合成调控  14-15
      5.2.2 G 蛋白对花青素合成调控  15
    5.3 环境因素与植物花青素代谢的关系  15-17
    5.4 NOS/ROS 系统与花青素合成关系  17
      5.4.1 NO 诱导植物次生代谢物质的合成  17
      5.4.2 H_2O_2诱导植物次生代谢物质的合成  17
  6 研究的目的和意义  17-18
  7 研究的技术路线  18-19
第二章 NO 和 H_2O_2对马铃薯花青素合成调控  19-24
  1 材料与方法  19-20
    1.1 供试品种  19
    1.2 材料的处理  19-20
    1.3 指标测定与数据处理  20
      1.3.1 花青素含量的测定  20
      1.3.2 苯丙氨酸裂解酶活性测定  20
      1.3.3 多酚氧化酶活性的测定  20
      1.3.4 查尔酮异构酶活性测定  20
  2 结果与分析  20-23
    2.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯块茎花色素含量的影响  20-21
    2.2 NO 和 H_2O_2处理对马铃薯花青素合成相关酶活性的影响  21-23
  3 讨论  23-24
第三章 NO 和 H_2O_2在马铃薯花青素积累中的信号传导  24-29
  1 材料与方法  24-25
    1.1 盆栽与处理  24
    1.2 指标测定数据处理  24-25
      1.2.1 CaM 含量测定  24
      1.2.2 Ca~(2+)-ATPase 活性测定  24-25
  2 结果分析  25-27
    2.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯块茎花色素含量的影响  25
    2.2 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎细胞 Ca~(2+)/CaM 信号物质的影响  25-27
      2.2.1 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎 CaM 含量的影响  25-26
      2.2.2 NO、H_2O_2和 NO+H_2O_2处理对不同颜色马铃薯块茎 Ca~(2+)-ATPase 活性的影响  26-27
  3 讨论  27-29
    3.1 NO 和 H_2O_2对马铃薯花青素代谢作用  27-28
    3.2 外源信号诱导马铃薯花青素合成的 Ca~(2+)依赖途径  28-29
第四章 膜上信号 ROS 反应与马铃薯花青素代谢调节  29-37
  1 材料与方法  29-30
    1.1 试验材料  29
    1.2 盆栽试验与处理  29
    1.3 指标测定  29-30
      1.3.1 O-.2产率测定  29
      1.3.2 H_2O_2含量测定  29
      1.3.3 SOD、CAT 和 POD 活性测定  29-30
  2 结果分析  30-35
    2.1 NO 和 H_2O_2处理对马铃薯 ROS 迸发参数影响  30-33
      2.1.1 NO 和 H_2O_2处理后不同马铃薯基因型块茎活性氧变化  30
      2.1.2 NO 和 H_2O_2处理对不同马铃薯基因型块茎 H_2O_2含量影响  30-31
      2.1.3 NO 和 H_2O_2处理后不同马铃薯基因型的块茎抗氧化酶活性变化  31-33
    2.2 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量与 ROS 迸发参数的相关性分析  33-35
      2.2.1 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量变化与氧自由基发生的相关性  34
      2.2.2 NO 和 H_2O_2处理后马铃薯块茎花青素含量变化与氧自由基清除酶活性的相关性  34-35
  3 讨论与结论  35-37
    3.1 细胞膜上信号 ROS 系统与 NO 信号关系  35
    3.2 细胞 Ca~(2+)/CaM 信号和 ROS 系统在次生代谢中的关系  35-37
参考文献  37-44
致谢  44-45
导师简介  45-47
在研期间发表论文  47

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 薯类作物 > 马铃薯(土豆)
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