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选择性环氧合酶2及5-脂氧合酶抑制对食管鳞癌细胞增殖的影响

作　者: 魏晶晶
导　师: 庄则豪
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: 环氧合酶2 5脂氧合酶 食管鳞癌细胞 Licofelone NS-398 细胞增殖
分类号: R735.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:比较COX-2/5-LOX双酶活性化学抑制及选择性COX-2酶活性化学抑制对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖的影响及可能机制,寻找食管癌化学预防的有效途径。方法:采用COX-2/5-LOX双途径酶抑制剂licofelone和选择性COX-2抑制剂NS-398,设立药物干预组、空白对照及溶媒DMSO组。分别以25μM、50μM、75μM和100μM浓度作用ESCC TE-1细胞24h及48h,CCK-8 (四唑单钠盐)法检测细胞增殖;RT-PCR和Western blot检测干预前后COX-2/5-LOX mRNA及蛋白表达; ELISA法检测下游代谢产物PGE2和LTB4含量;流式细胞检测细胞周期。结果:1、NS-398对细胞增殖的抑制呈非浓度依赖性,其中50μM处理24h及25μM、50μM及100μM处理48h后细胞出现生长抑制(P<0.05),其他各组细胞生长与对照组无明显差异(P>0.05);licofelone的抑制细胞生长作用则呈浓度及时间依赖性,除25μM处理24h组细胞生长与对照组无明显差异(P>0.05)外,更高浓度各组均出现细胞生长抑制(P<0.05)。2、licofelone及NS-398对TE-1细胞COX-2 mRNA及蛋白表达均有时间、浓度依赖性抑制作用,而对5-LOXmRNA及蛋白的时间、浓度依赖性表达抑制仅见于licofelone处理组。3、NS-398及licofelone对PGE2浓度均有浓度及时间依赖性抑制作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。LTB4水平在licofelone组被显著抑制,而在NS-398组则高于对照,且除100μM组外各组与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。4、100μM licofelone及50μM NS-398作用24h后TE-1细胞分别有67.1%、63.8%处于G0/G1期,16.8%、17.3%处于S期,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),100μM NS-398对细胞周期无影响(P>0.05)。结论:同时抑制COX/LOX途径可获得对ESCC细胞增殖的稳定抑制,而单一选择性COX-2抑制在某些浓度下却可能促细胞增殖;选择性COX-2抑制剂NS-398在较高浓度时可异常激活LOX途径,从而抵消其对细胞增殖的抑制作用。

全文目录


一 中文摘要  4-5
二 英文摘要  5-7
三 英文缩略词表  7-8
四 引言  8-13
  1. 食管鳞癌的研究现状  8-9
  2. 花生四烯酸的体内代谢过程  9-10
  3. COX/LOX 双途径抑制与食管癌  10-11
  4. 新型的双途径酶抑制剂  11-13
五 材料与方法  13-22
  1. 材料  13-16
    1.1. 主要试剂  13-15
    1.2. 主要仪器和设备  15-16
    1.3. 实验器皿准备  16
  2. 实验方法  16-21
    2.1. TE-1 细胞培养  16
    2.2. CCK8 法检测细胞增殖  16-17
    2.3. RT-PCR 检测COX-2/5-LOX mRNA 表达  17-19
    2.4. Western Blot 检测COX-2/5-LOX 蛋白的表达  19-20
    2.5. ELISA 检测 PGE2 及 LTB4 含量  20
    2.6. 流式细胞仪检测细胞周期  20-21
  3. 数据处理  21-22
六 结果  22-38
  1. CCK8 法检测TE-1 细胞增殖  22-23
  2. COX-2/5-LOX mRNA 及蛋白表达水平的变化  23-29
  3. ELISA 法检测 PGE2 和 LTB4 含量变化  29-34
  4. 流式细胞仪检测细胞周期变化  34-38
七 讨论  38-44
  1. TE-1 细胞的增殖抑制  38-39
  2. AA 代谢途径分流  39-41
  3. TE-1 细胞周期的变化  41-42
  4. 展望  42-44
八 全文结论  44-45
九 参考文献  45-52
十 致谢  52-53
十一 综述  53-62

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 食管肿瘤
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