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春石斛（Dendrobium nobile）组织培养快繁体系的构建

作　者: 孟金玲
导　师: 崔永一
学　校: 浙江农林大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 春石斛组织培养类原球茎丛生芽移栽驯化
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

春石斛(Dendrobium nobile)是兰科重要的观赏花卉之一。春石斛盆花新奇,符合人们求新求异的消费特点,在产业化盆花品种中具有显著优势,是技术含量高,利润空间大的产业。本研究通过对春石斛组织培养研究,构建其组培快繁体系,为春石斛优良种苗规模化生产提供理论依据。研究结果如下:(1)基于茎尖培养的类原球茎诱导、增殖及分化:解剖镜下剥取茎尖,进行春石斛类原球茎的诱导和增殖。类原球茎的诱导最适宜的基本培养基为MS,生长调节物质以浓度为0.2mg/L的2,4-D诱导类原球茎最适宜。在不同浓度生长调节物质NAA处理中,以1.0mg/L的增殖效果最好,类原球茎生长较好,增殖系数分别为3.55倍。而类原球茎的分化培养以0.5mg/L NAA分化效果最好。因此春石斛类原球茎诱导、增殖和分化培养条件分别为: MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L+2 , 4-D0.2mg/L ,1/2MS+KT0.05mg/L+NAA1.0mg/L,1/2MS+BA0.5mg/L+ NAA0.5mg/L。(2)不同培养基组分对春石斛茎段培养的影响:茎段培养以MS基本培养基为好;在碳源的选择上,以3%蔗糖效果最好,而以葡萄糖和果糖作碳源,无论是生物量增加还是出芽率都较低。有机添加物椰乳相比于香蕉汁和苹果汁的效果最好;植物生长调节物质以0.05mg/L的TDZ增殖最好。(3)茎段的基部组织(茎基)诱导丛生芽增殖:利用茎基诱导丛生芽,结果表明1/2MS+Cw150ml/L+KT0.5mg/L+ NAA2.0mg/L的诱导效果最好,诱导率为81.4%;MS+KT0.5mg/L+NAA0.5mg/L丛生芽增殖效果最好。(4)壮苗生根: MS +0.5mg/L IBA培养基中以添加5%椰乳、1 g/L活性碳为宜。植物生长调节物质NAA浓度为1.0 mg/L时植株健壮整齐,根的数目、长度、粗细均匀生长良好。(5)移栽驯化:试管苗在移栽前拧松瓶盖,在组织培养室外炼苗5d,然后去掉瓶盖1 d后取出试管苗进行移植,其平均成活率最好达84%;组培驯化苗培养在光照强度为1500Lx的光照培养箱内,春石斛无菌苗生长最佳,其成活率为85.9%;培养温度在25℃的条件下,春石斛的组培苗的成活率为86%,其苗的新根更加容易长出,生长态势也更健壮;空气相对湿度为85%时,其成活率达83.6%。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
第一章绪论  9-17
  1.1 石斛兰简介  9-10
    1.1.1 资源分布及生物学特性  9
    1.1.2 石斛兰的观赏特性和药用价值  9-10
  1.2 春石斛离体快繁的研究进展  10-15
    1.2.1 原球茎（类原球茎）的培养  11-12
    1.2.2 丛生芽的培养  12-13
    1.2.3 石斛属植物组织培养基本培养基的研究  13
    1.2.4 石斛属植物组织培养植物生长调节剂的研究  13-14
    1.2.5 石斛属植物组织培养培养环境的研究  14
    1.2.6 春石斛在其它方面的研究  14-15
  1.3 立题依据和研究目的  15-16
    1.3.1 立题依据  15-16
    1.3.2 研究目的和意义  16
  1.4 研究内容  16-17
第二章材料与方法  17-24
  2.1 供试材料  17
  2.2 技术路线  17
  2.3 茎尖诱导类原球茎增殖培养方案设计  17-19
    2.3.1 类原球茎诱导培养  17-19
    2.3.2 类原球茎增殖培养  19
    2.3.3 类原球茎分化培养  19
  2.4 春石斛茎段培养的培养基组分筛选  19-20
    2.4.1 不同基本培养基对春石斛茎段培养的影响  19
    2.4.2 不同生长调节剂及其浓度对春石斛茎段培养的影响  19-20
    2.4.3 不同添加物对春石斛茎段培养的影响  20
    2.4.4 不同碳源对春石斛茎段培养的影响  20
  2.5 春石斛丛生芽诱导增殖培养方案设计  20-21
    2.5.1 春石斛丛生芽诱导培养方案  20
    2.5.2 春石斛丛生芽增殖培养方案  20-21
  2.6 春石斛生根培养方案设计  21-22
    2.6.1 不同有机添加物对试管苗生根壮苗的培养  21-22
    2.6.2 不同浓度活性炭对试管苗生根壮苗的培养  22
    2.6.3 不同浓度的NAA 对试管苗生根壮苗的培养  22
  2.7 春石斛的移栽驯化  22-23
    2.7.1 不同炼苗时间对春石斛组培苗驯化生长的影响  22
    2.7.2 不同光照强度对春石斛组培苗驯化生长的影响  22
    2.7.3 不同温度对春石斛组培苗驯化生长的影响  22
    2.7.4 不同湿度对春石斛组培苗驯化生长的影响  22-23
  2.8 数据计算方法与分析工具  23-24
第三章结果与分析  24-41
  3.1 春石斛类原球茎的诱导和增殖  24-27
    3.1.1 基本培养基对类原球茎诱导的影响  25
    3.1.2 2,4-D 对类原球茎诱导的影响  25-26
    3.1.3 NAA 对类原球茎增殖分化的影响  26-27
  3.2 春石斛茎段培养  27-30
    3.2.1 基本培养基对春石斛茎段培养的影响  27-28
    3.2.2 生长调节剂及其浓度对春石斛茎段培养的影响  28
    3.2.3 添加物对春石斛茎段培养的影响  28-29
    3.2.4 碳源对春石斛茎段培养的影响  29-30
  3.3 春石斛丛生芽诱导和增殖  30-37
    3.3.1 春石斛丛生芽诱导  31-33
    3.3.2 春石斛丛生芽增殖  33-37
  3.4 春石斛生根壮苗培养  37-38
    3.4.1 不同有机添加物对春石斛试管苗生根壮苗的影响  37
    3.4.2 不同浓度活性炭对春石斛试管苗生根壮苗的影响  37
    3.4.3 不同浓度的NAA 对试管苗生根壮苗的影响  37-38
  3.5 春石斛的移栽驯化  38-41
    3.5.1 炼苗时间对春石斛组培苗驯化生长的影响  38
    3.5.2 不同光照强度对春石斛组培苗驯化生长的影响  38-39
    3.5.3 不同温度对春石斛组培苗生长驯化的影响  39
    3.5.4 不同空气相对湿度对春石斛组培苗生长驯化的影响  39-41
第四章结论与讨论  41-45
  4.1 结论  41
  4.2 讨论  41-45
    4.2.1 春石斛类原球茎诱导、增殖和分化培养条件  41-42
    4.2.2 春石斛茎段培养条件  42-43
    4.2.3 春石斛丛生芽的诱导和增殖培养条件  43
    4.2.4 春石斛生根壮苗最佳培养条件  43
    4.2.5 春石斛移栽驯化环境条件  43-45
参考文献  45-49
附录1  49-50
  试验相关仪器  49
  缩略词表  49-50
附录2（附图）  50-54
  图一：茎尖诱导类原球茎增殖  50-52
  图二：茎段诱导培养增殖  52
  图三：丛生芽的诱导和增殖  52-53
  图四：生根壮苗  53-54
个人简介  54
在校期间发表论文情况  54
致谢  54

春石斛（Dendrobium nobile）组织培养快繁体系的构建

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