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山核桃合子胚发育、体胚再生及其生物学特性研究
作 者: 胡恒康
导 师: 江香梅;黄坚钦
学 校: 江西农业大学
专 业: 植物学
关键词: 山核桃 组织培养 生物学特性 体细胞胚发生 组织细胞学 植株再生
分类号: S664.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
山核桃(Carya calhayensis Sarg.)为胡桃科山核桃属。山核桃不仅是重要的干果和木本油料树种,而且是重要的用材树种和生态经济树种。目有,林业生产上主要采用实生苗繁殖、嫁接繁殖和扦插繁殖。本文以山核桃合子胚为材料,对合子胚发育特性、合子胚萌发、体胚发生以及体胚发生期的组织细胞学内容进行研究。主要研究结果如下.1.对山核桃合子胚的发育特征进行研究,山核桃合子胚发育经历了球形胚、心形胚、鱼雷胚以及子叶胚阶段。8-16周合子胚内源激素测定结果显示:GA3和IAA呈上升后下降的趋势,于14周时达到峰值,分别为11.3 ng·g-1FW、128.9 ng·g-1FW,随后逐渐下降。ZR在合子胚自然授粉后10周达到峰值,为19.2ng·g-1FW,随后呈下降趋势。ABA浓度一直呈上升趋势。自然授粉后8-10周合子胚胚性感受态较好,在合适条件下较易形成愈伤组织,从愈伤组织上间接发生体细胞胚;自然授粉后11-12周的合子胚,体细胞胚较易在子叶等合子胚组分中直接发生;当合子胚发育时间为自然授粉后13-14周时,合子胚较易萌发成幼苗。2.以山核桃的合子胚为外植体,以细胞全能性为理论依据,进行胚性愈伤组织、体细胞胚胎发生和合子胚无菌萌发试验的研究。比较了基本培养基、生长调节物质、碳源和培养条件等对合子胚萌发及体胚发生的影响。结果表明,以山核桃自然授粉后8-10周的合子胚为外植体,进行体胚间接发生诱导。山核桃间接发生的胚性愈伤诱导的基本培养基为1/2MS,附加1.0mg·L-1BA、0.01 mg·L-1 Picloram、0.5 g·L-1CH、20 g·L-1葡萄糖、8.0 g·L-1 agar type。pH值为5.7,继代周期以4周为宜。山核桃直接发生选取11-12的合子胚,接种到改良的WPM附加1mg·L-1BA, 1.0mg.L-12,4-D,30 g·L-1蔗糖、6.0 g·L-1 phytgel, PH值为5.7。在30℃黑暗条件进行培养,每2周转接一次,6周统计结果显示,该处理效果最好,体胚直接发生率为36.5%。合子胚无菌萌发材料为自然授粉后14周的合子胚,无菌萌发以MS为基本培养基,生长调节物质为2mg.L-1BA、0.01mg.L-1piclaram,附加30 g.L-1葡萄糖、8.0 g·L-1 agar type A, pH值为5.7。接种后第1周暗培养,1周后转至光下进行光照培养,实验结果表明该培养基结果最佳,合子胚无菌萌发率达90.3%。3.通过组织细胞学方法研究了山核桃体细胞胚的起源与发生部位,发现山核桃体胚多直接发生于合子胚胚轴和子叶表面,体细胞胚经过球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚而发育成熟。
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全文目录
摘要 3-5 ABSTRACT 5-9 第一章 引言 9-10 第二章 文献综述 10-18 2.1 植物组织培养研究进展 10-14 2.1.1 植物组织培养的起源与发展 10-11 2.1.2 植物组织培养再生体系的类型 11-12 2.1.3 植物组织培养再生体系影响因子 12-14 2.2 山核桃研究进展 14-17 2.2.1 山核桃形态特征及生物学特性 14-15 2.2.2 山核桃的营养价值 15-16 2.2.3 山核桃繁育研究 16-17 2.3 本研究的立题依据 17-18 第三章 材料与方法 18-24 3.1 试验材料 18 3.2 试验方法 18-24 3.2.1 山核桃合子胚发育特性研究 18-19 3.2.2 山核桃合子胚无菌萌发研究 19-20 3.2.3 山核桃体胚发生研究 20-24 第四章 试验结果与分析 24-41 4.1 合子胚发育特性研究 24-26 4.1.1 不同胚龄的合子胚发育特征 24 4.1.2 胚龄对合子胚内源激素的影响 24-25 4.1.3 合子胚胚龄对山核桃合子胚胚性感受态的影响 25-26 4.2 合子胚萌发试验 26-30 4.2.1 基本培养基对合子胚萌发的影响 26-27 4.2.2 生长调节物质对合子胚萌发的影响 27-30 4.3 山核桃体胚直接发生研究 30-33 4.3.1 基本培养基对体胚直接发生的影响 30 4.3.2 生长调节物质对体胚直接发生的影响 30-32 4.3.3 温度对体胚直接发生的影响 32-33 4.3.4 诱导时间对体胚直接发生的影响 33 4.4 山核桃体胚间接发生的影响 33-38 4.4.1 基本培养基对山核桃愈伤组织诱导的影响 33-34 4.4.2 生长调节物质对山核桃体胚发生的影响 34-36 4.4.3 碳源对山核桃间接发生的影响 36-38 4.5 预处理和萌发培养基对山核桃体胚萌发的影响 38-39 4.6 山核桃体胚发生的组织细胞学研究 39-41 4.6.1 体胚发生的形态学观察 39-40 4.6.2 体胚发生的组织细胞学观察 40-41 第五章 结论与讨论 41-44 5.1 山核桃合子胚的发育特征 41-42 5.2 山核桃合子胚萌发 42 5.3 山核桃体胚发生 42-43 5.4 体胚发生显微结构研究 43-44 第六章 研究展望 44-45 图版 45-57 参考文献 57-67 致谢 67-68 硕士期间科研成果 68-69 缩略词中英文对照表 69-70 基本培养基组分 70
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 坚果类(壳果类) > 核桃(胡桃)
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