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基于生物可降解纳米载体的VEGF siRNA干扰在肝癌中的实验研究

作　者: 王刚敏
导　师: 杨建荣
学　校: 广西医科大学
专　业: 肝胆外科
关键词: RNA干扰血管内皮生长因子纳米载体肿瘤治疗
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：研究基于可生物降解纳米载体PEG-SS-PLL构建PEG-SS-PLL/siVEGF在体内外的抑瘤效果并初步探讨其可能机制。方法：1.利用可生物降解纳米载体PEG-SS-PLL，装载VEGF siVEGF合成PEG-SS-PLL/siVEGF。2.肝癌HepG2细胞株的培养及HepG2荷瘤裸鼠模型的建立。3.细胞水平用荧光显微镜检测其转染率，MMT检测其细胞毒性，流式细胞仪检测细胞凋亡率；动物模型给药后绘制肿瘤生长曲线，计算其抑瘤率；4.PCR和western-blot检测HepG2细胞内VEGF的mRNA及蛋白含量，PCR和western-blot及免疫组化检测肿瘤组织内VEGF的mRNA及蛋白含量，初步探讨PEG-SS-PLL/siVEGF在体内外的抑瘤机制。结果：1. PEG-SS-PLL/siVEGF细胞转染率较对照组高，细胞毒性较对照组低，体外诱导明显细胞凋亡率显著增高。给药后细胞内的VEGF mRNA及蛋白水显著降低。2.体内实验中，PEG-SS-PLL/siVEGF组的平均抑瘤率为50.12%，PCR、免疫组化及Western-blot检测肿瘤组织内的VEGF mRNA及蛋白水平显著降低。结论：1.PEG-SS-PLL/siVEGF的细胞转染率高，毒性较小，在体内外均能明显的抑瘤效应。2.PEG-SS-PLL/siVEGF体内外抑瘤机制可能为VEGF siVEGF进入细胞增多，通过诱导VEGF基因沉默，降低mRNA及蛋白含量，抑制肿瘤的血管生成。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
符号说明  8-10
前言  10-14
PEG‐SS‐PLL/SIVEGF 的制备与表征  14-17
  1.1. 材料  14-15
  1.2. 方法  15-17
体外实验  17-34
  1.3. 材料  17-18
  1.4. 方法实验方法和步骤  18-34
体内实验  34-38
  1.5. 材料  34
  1.6. 方法  34-38
实验结果  38-55
  1.7. 细胞实验结果  38-48
  1.8. 动物实验结果  48-55
讨论  55-60
  1.9. 肝癌治疗的趋势及 RNA 干扰疗法的前景  55
  1.10. SIRNA 治疗的机理  55-56
  1.11. 基于双硫键构建的 PEG‐SS‐PLL 的优势  56-58
  1.12. VEGF SIRNA 治疗肝癌的可能机理  58-60
结论  60-61
参考文献  61-66
综述  66-74
  参考文献  70-74
致谢  74

基于生物可降解纳米载体的VEGF siRNA干扰在肝癌中的实验研究

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