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兔膝关节腔注射CGRP对半月板白区损伤组织中Ⅱ型胶原及VEGF表达的影响

作　者: 张建武
导　师: 李晓声
学　校: 南华大学
专　业: 骨科
关键词: 降钙素基因相关肽纤维蛋白凝胶半月板白区损伤修复
分类号: R684
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 28次
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内容摘要

研究目的：构建兔半月板白区损伤模型，观察外源性降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-relatedpeptide, CGRP）对损伤组织中Ⅱ型胶原及血管内皮生长因子（Vascular endothelial growthfactor,VEGF）表达的影响，探讨CGRP在半月板白区损伤愈合过程中的作用，为半月板白区损伤的治疗提供实验依据。材料和方法：45只成年新西兰大白兔随机分为A、B、C三组，每组15只，用尖刀片于半月板体部与前角交界处的白-白区作一长约0.4cm，宽约0.1cm的纵行全层裂伤。A组动物每3天向膝关节腔内注射CGRP0.5ml，至分批处死；B组动物每3天向膝关节腔内注射纤维蛋白凝胶（Fibrin glue,FG）0.5ml，至分批处死；C组动物每3天向膝关节腔内注射生理盐水0.5ml，至分批处死。三组动物术后患肢均用自制小夹板固定1周，分别于造模后第4周，8周，12周3个周期分批处死实验动物获取标本，每组每次随机处死兔5只，将造模半月板取下，行大体形态观察、组织学观察、Ⅱ型胶原及VEGF免疫组化检测。结果：1、大体观察结果：A组半月板随观察周期的延长，半月板裂隙逐渐愈合，粘合紧密；B组半月板裂口见肉芽组织增生，愈合组织表面粗糙，向下凹陷，呈瘢痕样修复；C组半月板未见愈合，随时间延长裂隙增宽，半月板表面变粗糙，弹性降低，质地变软，出现明显退变。2、组织学观察结果：A组4周显示裂缝有胶原纤维形成，8周镜下可见少量软骨细胞，12周胶原纤维组织和纤维软骨细胞填满整个裂隙，基本愈合，但胶原排列不规则，与正常半月板仍有差别；B组术后4周显示半月板裂口缩小，可见肉芽组织形成，8周裂口胶原增多，无软骨细胞，12周胶原纤维与半月板正常组织交织结合，呈瘢痕样愈合；C组术后4、8、12周全部半月板裂口均未见愈合，裂口边缘的软骨细胞逐渐减少，基质紊乱。3、免疫组化结果：A、B组Ⅱ型胶原染色图像灰度值低，且随实验周期推移无明显变化，表明Ⅱ型胶原表达高；C组灰度值高，随时间推移呈上升趋势，表明Ⅱ型胶原表达不明显。同一时间不同组之间Ⅱ型胶原灰度值差异有统计学意义(P <0.05)， A组与B组、A组与C组之间有显著性差异（P <0.05)，B组与C组之间有显著性差异（(P <0.05)。A组VEGF图像的平均光密度值（OD值）高，随时间推移呈上升趋势，第8周达到峰值，第12周开始回落；B、C组VEGF图像OD值低，随时间推移呈下降趋势，A组OD值高于B、C组，差异有显著性（P <0.05)，B、C组之间OD值差异不明显，没有统计学意义(P>0.05)。结论：1. CGRP在兔半月板白区损伤修复过程中可增加Ⅱ型胶原含量，诱导VEGF形成，对兔半月板白区损伤的愈合有一定促进作用。2. CGRP对兔半月板白区损伤修复的效果优于FG。

全文目录

中英文缩写词表  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-10
前言  10-12
材料与方法  12-18
结果  18-26
讨论  26-33
结论  33-34
参考文献  34-38
附图  38-43
综述  43-51
  参考文献  48-51
攻读学位期间发表的论文及所获奖励  51-52
致谢  52

兔膝关节腔注射CGRP对半月板白区损伤组织中Ⅱ型胶原及VEGF表达的影响

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