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普洱茶抑制乳腺癌SHZ-88细胞及保护亚基胍诱导的胃癌前病变和放疗损伤的作用

作　者: 易香华
导　师: 李伊为
学　校: 广州中医药大学
专　业: 中西结合基础
关键词: 普洱茶胃肿瘤乳腺肿瘤放疗损伤
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

一研究目的实验一用血清药理学方法,将普洱茶含茶血清作用大鼠乳腺癌SHZ-88细胞,探讨普洱茶含茶血清是否具有抗SHZ-88细胞的作用。实验二用亚硝基胍诱导wistar大鼠胃粘膜损伤,探讨普洱茶是否具有减轻胃粘膜损伤的作用,减少胃癌前病变,从而起到预防肿瘤发生的作用。实验三用4Gy放射剂量全身照射雄性昆明种小鼠,引起放射损伤,探讨普洱茶是否具有减轻放疗损伤的作用。二研究方法和内容实验一制备普洱茶含茶血清,用5%,10%和15%的普洱茶含茶血清分别作用大鼠乳腺癌SHZ-88细胞24h和48h。从形态学分析肿瘤细胞形态学变化；MTT测细胞增殖；流式细胞术测肿瘤细胞凋亡率：克隆形成实验测肿瘤细胞克隆形成率。实验二用亚硝基胍给wistar大鼠灌胃,1%普洱茶水自由饮用22w,剖胃。肉眼观察胃粘膜组织损伤程度拍照；HE染色观察胃粘膜病理变化；病理分型统计每组病理损伤大鼠数量。实验三用1%和2%普洱茶水喂养雄性昆明种小鼠1个月后,4Gy放射剂量全身照射小鼠,放射后第1d,7d和14d取材检测。血常规观察白细胞、淋巴细胞、淋巴细胞百分数、红细胞、血红蛋白、红细胞比积和血小板数；血生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)：肝脾胸腺称重,测肝脾胸腺系数：睾丸HE染色,观察睾丸病理变化；放疗后1d,测定睾丸组织丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量。三实验结果实验一形态学结果表明普洱茶作用后,细胞增长变缓,悬浮细胞数增多。MTT结果显示普洱茶呈时间和剂量依赖性显著抑制SHZ-88细胞的增殖。流式细胞术结果表明普洱茶促进SHZ-88细胞的凋亡和坏死。克隆形成实验表明普洱茶组克隆形成率明显低于对照组。实验二MNNG灌胃22w后,胃粘膜颜色变淡变黄,胃壁增厚,失去弹性,伸展性差,脆性增加,粘膜皱壁紊乱,肉眼可见表面有结节状隆起、乳头状突起或串珠状结构：进一步HE染色显示,胃粘膜鳞腺交界处鳞状上皮乳头状增生和(或)不典型增生,核浆比例增大,染色质染色变深,有核分裂相；粘膜内间质水肿、水泡形成、充血；角化亢进：鳞腺交界处小灶淋巴细胞聚集：病理分型后,模型组可见乳头状瘤和息肉,模型组大鼠普遍鳞上皮增生、水肿、炎症以及角化。而1%普洱茶喂养VVistar大鼠22w后,上述症状显著减轻。实验三血常规结果表明,放疗后1d,7d,14d,白细胞、淋巴细胞数,淋巴细胞百分数、淋巴细胞总数均显著减少；普洱茶无明显改善作用；放疗后7d,红细胞数、血红蛋白含量、红细胞比积均一过性的增多,14d时则恢复正常,但是普洱茶组红细胞数、血红蛋白含量、红细胞比积在放疗后1d时增多,7d已经恢复正常；放疗后7d血小板数显著减少,14d恢复正常,普洱茶对其无显著影响。血生化结果显示,血清LDH在放疗后1d、7d和14d均显著上升,1%和2%普洱茶作用后均可以使其显著下降；ALT在放疗后14d时显著上升,2%普洱茶组血清ALT水平显著下降：放疗后血清AST无明显变化。肝脾胸腺系数结果：放疗后1d和7d,小鼠脾系数显著下降,胸腺系数有下降趋势,普洱茶对其无明显改善作用。4Gy剂量全身照射,在照射后1d-14d对小鼠肝系数均无显著影响。睾丸HE染色显示,4Gy剂量全身照射后14d,可见睾丸组织结构疏松,组织密度变小。低高剂量普洱茶组睾丸组织无明显病理变化。放疗后1d睾丸组织MDA、T-SOD含量：放疗后1d,睾丸组织中MDA含量与对照组相比,显著上升：而普洱茶组呈剂量依赖性的降低MDA含量。放疗后1d,睾丸组织T-SOD含量较对照着相比,显著下降；而普洱茶组剂量依赖性升高T_SOD水平。四结论普洱茶含茶血清显著抑制SHZ-88细胞的增殖和克隆形成能力,促进SHZ-88细胞的凋亡和坏死。普洱茶对MNNG诱导的大鼠胃粘膜损伤有一定的保护作用,可以减少乳头状瘤和息肉的生成,减轻鳞状上皮细胞增生、粘膜下水肿、淋巴细胞浸润和角化的程度。普洱茶对放疗损伤有一定的保护作用,降低血清LDH水平和ALT水平,降低睾丸组织MDA含量,上调T-SOD的表达,起到抗放疗引起的氧化损伤作用。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-9
引言  9-11
第一部分文献研究  11-25
  1. 茶叶抗肿瘤的研究进展  11-18
    1.1 茶叶防治肿瘤的实验研究  11-15
    1.2 茶叶防治肿瘤的流行病学研究  15-16
    1.3 茶叶抗肿瘤机制  16
    1.4 茶叶抗肿瘤成分分析  16-18
  2. 普洱茶生物活性的研究进展  18-21
    2.1 普洱茶的历史记载  18
    2.2 普洱茶生物活性的研究现状  18-19
    2.3 普洱茶成分分析  19
    2.4 普洱茶与绿茶、红茶的比较  19-21
  3. 放射性损伤的研究现状  21-24
    3.1 放疗对各器官的损伤研究  21-22
    3.2 放疗损伤机理  22
    3.3 放疗损伤保护研究现状  22-24
  4. 结语  24-25
第二部分实验研究  25-50
  实验一普洱茶含茶血清对大鼠乳腺癌SHZ-88细胞的抑制作用  25-34
    1. 材料和方法  25-28
    2. 结果  28-32
    3. 讨论  32-33
    4. 结论  33-34
  实验二普洱茶对亚硝基胍诱导的癌前病变的保护作用  34-40
    1. 材料和方法  34-35
    2. 结果  35-37
    3. 讨论  37-39
    4. 结论  39-40
  实验三普洱茶对放疗损伤的保护作用  40-50
    1. 材料和方法  40-43
    2. 结果  43-48
    3. 讨论  48-49
    4. 结论  49-50
结语  50-51
参考文献  51-60
附录  60-62
致谢  62

普洱茶抑制乳腺癌SHZ-88细胞及保护亚基胍诱导的胃癌前病变和放疗损伤的作用

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