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左甲状腺素和维生素E对甲减大鼠海马氧化应激水平和细胞凋亡的影响

作　者: 万思源
导　师: 潘天荣
学　校: 安徽医科大学
专　业: 内科学
关键词: 甲状腺功能减退症海马左甲状腺素氧化应激细胞凋亡指数
分类号: R581.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的通过研究甲状腺素（T4）、维生素E（VitE）以及二者联合治疗对甲状腺功能减退大鼠海马组织氧化应激水平和细胞凋亡的影响，进一步探讨甲减海马损伤的发生机制及甲减的治疗方法。方法将SD雄性大鼠随机分为正常对照组（control组）、甲减组（PTU组）、甲状腺激素治疗组（PTU+T₄组）、VitE治疗组（PTU+VitE组）、甲状腺激素+VitE联合治疗组（PTU+VitE+T₄组）。对照组饮用自来水，其它各组饮用含0.05%丙硫氧嘧啶（propylthiouracil，PTU）的自来水，28d后每天早8点PTU+T₄组和PTU+T4+VitE组按2μg/100g左甲状腺素（L-T₄）灌胃，其余各组按等量生理盐水灌胃；晚6点PTU+VitE组和PTU+T₄+VitE组按20mg/100g维生素E（VitE）胶丸灌胃，其余各组按等量植物油灌胃，连续4周。期间除正常对照组仍饮用自来水外，其它各组仍饮用含0.05%PTU的自来水。8周后测定血清中T3、T4、TSH，采用westernblot（WB，免疫印迹）方法获得显影条带，对条带进行光密度分析，检测大鼠海马组织NADPH氧化酶（NADPH Oxidase，）及超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）与内参GAPDH （glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,甘油醛-3-磷酸脱氢酶）的条带光密度值的比值间接反映NADPH氧化酶及SOD的表达水平，应用末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）检测海马细胞凋亡。采用SPSS—17.0软件进行统计学处理，所有数据均以X±S表示，两组间比较采用单因素方差分析（one-factor analysis of variance，ANOVA），海马组织氧化应激指标与凋亡指数（apoptosis index，AI）之间采用线性相关性分析。结果①与Control（正常对照）组比较， PTU组、VitE组T3、T4水平明显降低，TSH显著升高（p <0.05）；与PTU组比较，PTU+T4组、PTU+T4+VitE组T3、T4水平明显升高，TSH显著降低（p <0.05）；PTU组与PTU+VitE组T3、T4、TSH水平无统计学差异（p>0.05）。②与Control组比较，PTU组及PTU+T4组海马组织SOD表达水平显著降低（p <0.05），PTU组海马组织NADPH氧化酶表达水平显著升高（p <0.05），其余各组之间统计学无显著差异（P>0.05）；与PTU组比较，PTU+VitE组及PTU+T4+VitE组海马组织SOD表达水平显著升高，（p <0.05），PTU+T4组、PTU+VitE组及PTU+T4+VitE组海马组织NADPH氧化酶表达水平显著降低（p <0.05）。③与Control组比较，PTU组、PTU+VitE组海马细胞AI显著升高（p<0.05）；与PTU组比较，PTU+T4组、PTU+T4+VitE组AI显著降低（p<0.05）。④海马细胞凋亡指数与海马组织NADPH氧化酶表达呈正相关（r=0.644，P=0.000），与海马组织SOD表达无明显相关性（r=-0.316，p=0.064）。结论甲减时海马组织氧化应激水平升高，细胞凋亡数增加，且氧化应激活动与海马AI密切相关；左甲状腺素及维生素E补充治疗后可能通过改善氧化应激降低海马细胞凋亡，故推测甲减时氧化应激能致细胞凋亡可能是甲减海马细胞损伤的机制之一。

左甲状腺素和维生素E对甲减大鼠海马氧化应激水平和细胞凋亡的影响

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