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叉枝鸦葱水溶性多糖的提取工艺及生物活性研究

作　者: 王安银
导　师: 白红进
学　校: 塔里木大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 叉枝鸦葱 多糖 提取工艺 生物活性
分类号: R284.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


本文以新疆特色植物叉枝鸦葱(Scorzonera divaricata. L)为实验材料,研究了叉枝鸦葱水溶性多糖的提取工艺、脱蛋白脱色工艺、体外抗氧化活性、抑菌活性及抗疲劳活性。1采用正交实验优化传统水浴回流法提取叉枝鸦葱水溶性多糖的工艺条件,确定最佳参数。结果表明：各因素的影响次序为温度>时间>固液比>次数,最佳参数为提取时间90min,提取温度90℃,固液比1：35,提取次数3次。在最佳工艺条件下,叉枝鸦葱多糖的提取率可达6.43%。2采用均匀实验优化现代微波辅助法提取叉枝鸦葱水溶性多糖的工艺条件,确定最佳参数。结果表明：最佳参数为微波功率246W、固液比1：39、提取时间60min、提取次数2次。在最佳工艺条件下,叉枝鸦葱多糖的提取率可达3.37%。3分别采用Sevage法、三氯乙酸法和盐酸法除去叉枝鸦葱多糖的蛋白质,并用正交实验优化最佳脱蛋白方法的工艺条件。结果表明：Sevage法脱蛋白效果较好；优化后工艺条件为振荡时间为25min,氯仿：正丁醇为3：1,样品Sevage试剂(氯仿-正丁醇)为5：2,添加次数为六次。在最佳工艺条件下,蛋白脱出率可达71.26%。4分别采用活性炭法、次氯酸钠法和双氧水法除去叉枝鸦葱多糖的色素,并用均匀实验优化最佳脱色方法的工艺条件。结果表明：活性炭法脱色效果较好；优化后的工艺条件为固液比0.53：50,水浴时间47.36min,水浴温度37.49℃,pH值为3.96。在最佳工艺条件下,色素脱出率可达91.88%。5采用分光光度法测定叉枝鸦葱多糖对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,以及多糖的还原力和螯合力；采用Rancimat法测定多糖的抗脂质过氧化能力。结果表明：叉枝鸦葱多糖对自由基一定的清除能力,且在供试浓度范围内,呈明显的剂量效应关系；叉枝鸦葱多糖不适合做铁离子的螯合剂；叉枝鸦葱多糖经过进一步处理可以作为抗氧化剂添加到猪油、葵花籽油和棉籽油中,但不适合用做菜籽油的抗脂质过氧化添加剂。6采用打孔法研究叉枝鸦葱多糖对19种常见微生物菌种的抑菌活性。结果表明：叉枝鸦葱多糖粗提液的抑菌活性较差,不适合用做微生物生长的抑制剂。7采用小鼠负重游泳实验研究叉枝鸦葱多糖的抗疲劳活性。结果表明,与空白组相比,对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠负重游泳时间分别增加了2.5%、11.7%、20.4%、35.1%。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
目录  7-10
前言  10-21
  1 叉枝鸦葱简介  10-13
    1.1 叉枝鸦葱形态特征  10
    1.2 鸦葱分布情况  10
    1.3 国内外研究现状  10-13
  2 多糖研究概况  13-20
    2.1 多糖的的分类  13-14
    2.2 多糖的活性  14-16
    2.3 多糖的提取方法  16
    2.4 多糖纯化  16-17
    2.5 含量测定及纯度鉴定  17-18
    2.6 多糖的结构分析  18-20
  3 课题研究目的及意义  20-21
第一章 叉枝鸦葱水溶性多糖的提取工艺研究  21-30
  1 材料、仪器与试剂  21
    1.1 材料  21
    1.2 仪器  21
    1.3 试剂  21
  2 实验方法  21-24
    2.1 样液的制备  21
    2.2 多糖的定性分析  21
    2.3 多糖含量的测定  21-23
    2.4 正交实验优化传统水浴回流法提取多糖工艺  23
    2.5 均匀实验优化现代微波法提取多糖工艺  23-24
  3. 结果与分析  24-29
    3.1 多糖定性结果  24
    3.2 最大吸收波长的确定  24
    3.3 葡萄糖标准曲线的绘制  24-25
    3.4 换算因子测定结果  25
    3.5 单因素实验结果  25-27
    3.6 正交实验结果  27-28
    3.7 均匀实验优化工艺结果  28-29
  4 讨论  29-30
第二章 叉枝鸦葱多糖的脱蛋白和脱色方法研究  30-39
  1 材料、仪器与试剂  30
    1.1 材料  30
    1.2 仪器  30
    1.3 试剂  30
  2 实验方法  30-33
    2.1 蛋白质定性实验  30
    2.2 蛋白质标准曲线制备  30-31
    2.3 脱蛋白方法  31
    2.4 正交实验优化Sevag法脱蛋白  31-32
    2.5 脱色方法研究  32-33
  3 结果与分析  33-38
    3.1 蛋白质定性结果  33
    3.2 蛋白质标准曲线  33
    3.3 脱蛋白方法研究结果  33-35
    3.4 正交实验优化Sevag法脱蛋白结果  35
    3.5 脱色方法研究结果  35-38
  4 讨论  38-39
第三章 叉枝鸦葱水溶性多糖的体外抗氧化活性研究  39-48
  1 材料、仪器与试剂  39
    1.1 材料  39
    1.2 仪器  39
    1.3 试剂  39
  2 实验方法  39-41
    2.1 样液的制备  39
    2.2 对超氧阴离子自由基的清除活性  39-40
    2.3 对羟基自由基的清除活性  40
    2.4 对DPPH自由基的清除活性  40
    2.5 还原力的测定  40
    2.6 螯合力的测定  40-41
    2.7 抗脂质过氧化活性的测定  41
  3 结果与分析  41-46
    3.1 对超氧阴离子自由基的清除能力结果  41-42
    3.2 对羟基自由基的清除能力结果  42-43
    3.3 对DPPH自由基的清除能力结果  43-44
    3.4 还原力的测定结果  44
    3.5 螫合力的测定结果  44
    3.6 抗脂质过氧化能力测定结果  44-46
  4 讨论  46-48
第四章 叉枝鸦葱多糖的抑菌活性及抗小鼠疲劳活性研究  48-52
  1 材料、仪器与试剂  48
    1.1 材料  48
    1.2 仪器  48
    1.3 试剂  48
  2 实验方法  48-50
    2.1 多糖的抑菌活性研究  48-49
    2.2 多糖对小鼠的抗疲劳活性研究  49-50
  3 结果与分析  50-51
    3.1 多糖抑菌活性结果  50
    3.2 多糖对小鼠的抗疲劳活性结果  50-51
  4 讨论  51-52
结论  52-53
参考文献  53-57
附录(一)  57-63
附录(二)  63-65
致谢  65-66
作者简介  66

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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