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山奈酚对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

作　者: 赵妍
导　师: 林洪金
学　校: 东北农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 山奈酚脂多糖小鼠急性肺损伤炎症因子
分类号: S853.74
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

山奈酚是一种黄酮醇类化合物，存在于小檗科植物窝儿的根茎、豆科植物槐树的成熟果实、檀香科植物白瑞草的全草、姜科植物山奈的根茎、大戟科植物猫眼草的地上部分和一些水果蔬菜中。具有抗菌、止咳、抑酶、诱变剂活性。主要用于抗癌、抑制生育、抗癫痫、抗炎、抗氧化剂、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、止咳。但山奈酚在肺组织组织炎症损伤中的作用的机制尚未明确。本实验通过脂多糖诱导小鼠建立动物急性肺损伤模型，用山奈酚灌胃治疗，通过电镜以及实时定量PCR对其进行研究，为山奈酚对呼吸系统的临床应用和深入研究提供依据。本试验以180只昆明系小鼠为研究对象，并将其分为正常组、模型组、山奈酚低剂量组、山奈酚中剂量组、山奈酚高剂量组和地塞米松(Dex)组6个分组。通过临床症状、剖检变化及肺组织电镜下的病理学变化的观察，肺脏水肿程度、抗氧化功能、炎症反应、以及内源性保护基因HO-1的表达等检测，研究了山奈酚对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤保护作用。得到以下研究结果：1.通过透射电镜进行病理观察和对肺脏湿/干比值的检测，从形态学角度证实了山奈酚对急性肺损伤小鼠具有一定的保护作用。2.通过对肺组织中SOD和GSH-Px的活性以及MDA含量和DNA-蛋白交联率的检测，结果显示了山奈酚具有一定的抗氧化作用，能够对急性肺损伤引起的氧化-抗氧化平衡失调起到明显的抑制作用；肺组织细胞中DPC趋于正常。由此证明山奈酚通过抗氧化系统功能的影响是其发挥对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护效应的途径之一。3.通过对肺组织MPO活性的检测，结果显示山奈酚能够通过抑制肺组织MPO的活性，而发挥对LPS致小鼠急性肺损伤的保护效应。4.运用荧光定量PCR方法对肺组织NF-κB、IL-1β、HO-1、PTGEs、iNOS、TNF-α和COX-2mRNA表达的检测，结果显示山奈酚能够通过抑制肺组织促炎因子NF-κB、IL-1β、HO-1、PTGEs、iNOS、TNF-α和COX-2mRNA的表达和促进抗炎因子HO-1mRNA的表达而发挥对LPS致小鼠急性肺损伤的保护效应。本试验通过对急性肺损伤小鼠抗氧化功能、炎症反应基因表达量等指标的测定，揭示山奈酚可以减轻LPS导致的小鼠急性肺损伤，表明山奈酚对LPS具有一定的拮抗作用。为山奈酚的临床应用和深入研究提供依据。

全文目录

目录  4-6
CONTENTS  6-8
摘要  8-9
Abstract  9-11
1 引言  11-19
  1.1 急性肺损伤及其研究进展  11-15
    1.1.1 急性肺损伤的病因  11
    1.1.2 急性肺损伤的发病机理  11-13
    1.1.3 急性肺损伤的药物治疗  13-15
  1.2 山奈酚的研究进展  15-18
    1.2.1 山奈酚的主要来源  15
    1.2.2 山奈酚的药理作用  15-18
  1.3 试验的目的和意义  18-19
2 材料与方法  19-24
  2.1 试验动物与处理  19
  2.2 样品的采集与处理  19
  2.3 主要仪器及试剂  19-20
    2.3.1 主要仪器  19-20
    2.3.2 主要试剂  20
  2.4 检测的项目与方法  20-23
    2.4.1 临床症状检查  20
    2.4.2 病理组织的超微结构观察  20
    2.4.3 肺组织湿/干比值的检测  20
    2.4.4 抗氧化功能指标的检测  20-21
    2.4.5 蛋白质-DNA 交联(DPC)的检测  21
    2.4.6 实时定量 PCR 染料法检测肺组织中炎症因子 mRNA 的表达  21-23
  2.5 试验数据的分析及统计  23-24
3 结果与分析  24-35
  3.1 临床症状观察  24
  3.2 病理学检查结果  24
    3.2.1 病理剖解变化  24
    3.2.2 肺组织超微结构观察  24
  3.3 肺脏组织 W/D 比值的测定  24-25
  3.4 抗氧化功能指标的检测结果  25-28
    3.4.1 SOD 活性的检测结果  25-26
    3.4.2 MDA 含量的检测结果  26-27
    3.4.3 GSH-Px 活性的检测结果  27-28
  3.5 MPO 活性的检测结果  28-29
  3.6 DPC 系数的检测结果  29-30
  3.7 实时定量 PCR 染料法检测肺组织炎症因子 mRNA 的表达量  30-35
    3.7.1 荧光定量 PCR 检测方法的建立  30-31
    3.7.2 症相关基因实时 PCR 扩增结果  31
    3.7.3 山奈酚对小鼠肺组织炎症因子 mRNA 表达影响的检测结果  31-35
4 讨论  35-41
  4.1 山奈酚对急性肺损伤小鼠肺组织病理学变化的影响  35
  4.2 山奈酚对急性肺损伤小鼠肺脏组织湿/干重比值的影响  35-36
  4.3 山奈酚对急性肺损伤小鼠抗氧化功能的影响  36-37
  4.4 山奈酚对急性肺损伤小鼠肺组织细胞 DNA 蛋白交联的影响  37
  4.5 山奈酚对急性肺损伤小鼠肺组织中 MPO 活性的影响  37-38
  4.6 山奈酚对急性肺损伤小鼠肺脏中炎症因子 mRNA 表达的影响  38-41
    4.6.1 山奈酚对肺组织中 HO-1 mRNA 表达的影响  38-39
    4.6.2 山奈酚对肺组织中 NF-κB、IL-1β、PTGEs、iNOS、TNF-α 和COX-2 mRNA 表达的影响  39-41
5 结论  41-42
致谢  42-43
参考文献  43-53
附录A  53-61
附录B：英文缩写词表  61-62
攻读硕士学位期间发表的学术论文  62

山奈酚对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

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