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皖西白鹅毛囊发育规律及羽绒再生调节关键基因分析
作 者: 白海臣
导 师: 耿照玉; 姜润深; 陈兴勇
学 校: 安徽农业大学
专 业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 皖西白鹅 毛囊发育 羽绒再生 基因芯片
分类号: S835
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 33次
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内容摘要
羽绒的发生发育依赖于毛囊的生长发育,羽绒再生是影响其产量和质量的关键因素。皖西白鹅作为我国优良地方鹅种,素来享有“世界羽绒之最”的美誉。本论文探讨了皖西白鹅胚胎期毛囊的生长发育规律,以及运用基因表达谱芯片方法分析换羽期羽绒再生重要调控基因的表达变化。研究结果对于阐明皖西白鹅羽绒发育规律,以及再生关键调控基因用于高产羽绒品系选育均具有重要的理论和实践意义。皖西白鹅胚胎期背部(0.76μm)和腰部(0.83μm)初级毛囊直径显著大于胸部(0.65μm)和腹部(0.66μm),但出雏3周后,胸部(1.49μm)和腹部(1.36μm)初级毛囊直径增长速度明显加快,并显著大于背部和腰部。胚胎期胸部(1.54个/mm2)和腹部(1.81个/mm2)初级毛囊密度明显大于背部和腰部,但出雏3周后,由于次级毛囊的生长和表皮增长,胸部(0.82个/mm2)、腹部(0.98个/mm2)和背部(1.17个/mm2)均显著低于腰部初级毛囊密度。皖西白鹅次级毛囊直径在胚胎期各部位差异均不明显,出雏3周后,胸部(0.57μm)显著低于其它各部位;次级毛囊在胚胎期27-30天为发生的高峰期,此时,胸部(4.73个/mm2)和腹部(4.84个/mm2)次级毛囊密度显著高于背部(3.67个/mm2)。伴随鹅表皮增长,次级毛囊密度不断下降,至出雏3周后,胸部密度仅为1.12个/mm2,但明显高于其它各部位。表达谱芯片研究表明,羽绒再生过程主要涉及到3类基因,一类是与纤维蛋白合成与聚集相关的基因,如ACTIN、 α-Actinin、 ATF-2、Filamin等;另一类是与氨基酸合成代谢相关的基因,如PAH、LAO、GOT1等;第三类为调控β-catenin通路的蛋白,如DEP1等。羽绒脱落后首先启动并激活β-catenin的基因,另外α-actinin也处于高表达状态,为纤维原的聚合做好准备;其后才涉及到氨基酸合成相关基因的高表达;羽绒脱落15天左右,纤维蛋白原的表达进入另一轮高峰,鹅体表覆盖一层绒毛。随后采用荧光定量PCR法分别对检测到的其中15个差异基因进行了表达量验证,14个符合表达谱芯片的结果。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-7 缩略词语表(Abbreviation) 7-8 目录 8-10 文献综述 10-15 1.1 毛囊发育研究进展 10-13 1.1.1 毛囊的基本结构 10 1.1.2 毛囊形态发生及其分子调控机制 10-12 1.1.3 次级毛囊发生发育研究现状 12 1.1.4 毛囊周期性生发育长及羽绒再生调控研究进展 12-13 1.2 基因芯片及其应用 13-15 1.2.1 基因芯片概述 13-14 1.2.2 基因芯片的原理 14-15 引言 15 2 材料与方法 15-26 2.1 试验材料 15-17 2.1.1 试验胚胎和鹅群 15-16 2.1.2 仪器和设备 16 2.1.3 主要药品和试剂 16-17 2.1.4 软件工具 17 2.1.5 常规溶液及试剂配制 17 2.2 试验方法 17-25 2.2.1 皮肤切片的制备和染色 17-19 2.2.2 毛囊形态观察和性状测定 19 2.2.3 基因表达谱芯片制作 19-24 2.2.4 定量 PCR 验证差异基因 24-25 2.3 数据分析 25-26 3 试验结果 26-33 3.1 毛囊显微观测结果 26 3.2 毛囊显微测量结果 26-29 3.3 毛囊发育趋势分析 29-30 3.4 皖西白鹅换羽前后差异表达基因 30-33 3.4.1 皖西白鹅换羽后 1 天差异表达基因分析 30-31 3.4.2 皖西白鹅换羽后 7 天差异表达基因分析 31-32 3.4.3 皖西白鹅换羽后 15 天差异表达基因分析 32 3.4.4 皖西白鹅换羽前后差异表达基因分析(参与全过程基因) 32-33 3.5 荧光定量 PCR 检验结果 33 4 讨论 33-36 4.1 鹅毛囊发育趋势形成的原因探讨 33 4.2 胚胎期不同阶段毛囊发育特点 33-34 4.3 羽绒再生调节关键基因表达 34-36 5 结论 36-37 参考文献 37-42 致谢 42-43 作者简介 43-44 附图 44-45
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家禽 > 鹅
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