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人肝细胞癌发生机制的研究

作　者: 徐立斌
导　师: 邵永孚；孙宗棠
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 全基因组医科大学基因序列基因整合博士学位论文肝细胞癌宿主细胞生长调控整合位点协和
分类号: R735.7
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

目的：探讨乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)整合到宿主细胞基因组的可能致癌机制。并尝试构建HBV与肝细胞相互作用的体外模型，以研究HBV致癌的分子机理及其干预。材料与方法：随机选取7例HBsAg阳性的中国启东高发区肝细胞癌组织进行HBV整合位点分析。用Alu-PCR技术或“Genome Walking”技术对所提取的组织DNA进行HBV X基因和侧方未知序列的PCR扩增。并对所获得的PCR产物进行序列测定。通过Entrez BLAST系统分析肝癌组织中的HBV X基因整合状态，重点分析HBV DNA是否整合插入细胞生长调控有关的重要基因。为研究HBV表达体系，首先将全基因组HBV克隆至高效逆转录病毒表达载体pCLXSN，构建pCLXSN-2HBV重组质粒。用PCR、序列测定等方法对新建质粒进行鉴定后，将其导入HepG2细胞和经hTERT处理的体外培养的成人肝细胞，用ELISA及免疫组织化学等方法检测HBV基因组的表达情况。

全文目录

中文摘要  4-7
英文摘要  7-10
第一部分: HBV整合到宿主细胞基因组的致癌机制研究  10-48
  前言  10-13
  材料与方法  13-22
  结果  22-38
  讨论  38-48
第二部分: 成人肝细胞体外表达HBV基因组的探索  48-66
  前言  48-49
  材料与方法  49-57
  结果  57-64
  讨论  64-66
结论  66-67
文献综述  67-83
参考文献  83-94
致谢  94

人肝细胞癌发生机制的研究

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