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血复康组方对HEL细胞增殖抑制和诱导分化的研究

作　者: 陈敏
导　师: 孙雪梅
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 血复康青黛莪术葛根 HEL细胞细胞分化增殖抑制
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

[目的]通过体外研究血复康主要组分青黛、葛根、莪术的有效抗肿瘤成分,观察其对具有JAK2突变的人红白血病HEL细胞株增殖抑制、诱导分化的影响。[方法]分别提取青黛、莪术、葛根中的有效抗肿瘤成分,使其有效成分中靛玉红、莪术油及葛根总黄酮纯度>80%,配制所需浓度的溶液。选择不同浓度的青黛提取物、莪术提取物、葛根提取物作用于HEL细胞,MTT法检测药物作用24h、48h对细胞增殖抑制的影响；应用流式细胞术检测诱导细胞分化过程中细胞表面抗原CDllb、CD14的表达情况；RT-PCR在]mRNA水平检测细胞分化标志GPA、GATA1基因表达变化。[结果]1.选择青黛提取物浓度25-100ug/ml、莪术提取物浓度10-80ug/ml及葛根提取物浓度50-400ug/ml作用于HEL细胞。青黛、莪术提取物均能抑制HEL细胞增殖,且呈浓度-时间依赖性效应关系；葛根提取物低浓度(≤200ug/ml)促进细胞增殖,高浓度(>200ug/ml)抑制细胞增殖。2.青黛提取物、莪术提取物能在一定浓度范围内能增加细胞表面CDllb、CD14等表达,青黛50ug/ml、莪术20ug/ml作用显著；葛根提取物无明显作用。3.RT-PCR显示：青黛提取物50ug/ml、莪术提取物20ug/ml均能上调HEL细胞分化分子标志。GPA、GATA1的mRNA表达。[结论]血复康组方青黛提取物、莪术提取物及高浓度葛根提取物对人红白血病HEL细胞有增殖抑制作用；青黛、莪术提取物能有效诱导HEL细胞分化。

全文目录

摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
前言  9-11
第一部分理论研究  11-18
  1. 血复康组方简介及相关研究  11
    1.1 血复康组方分析  11
    1.2 血复康相关临床及实验研究  11
  2. 血复康组方药物成分分析及相关研究  11-13
    2.1 青黛  11-12
    2.2 莪术  12
    2.3 葛根  12-13
  3. 骨髓增殖性肿瘤的中医认识  13-15
    3.1 骨髓增殖性肿瘤的中医病名描述  13-14
    3.2 骨髓增殖性肿瘤的中医病因病机  14
    3.3 中医对骨髓增殖性肿瘤治疗概述  14-15
  4. 骨髓增殖性肿瘤的西医认识  15-18
    4.1 基因突变与MPNs  16
    4.2 JAK2V617F时代的MPNs的治疗  16-18
第二部分血复康组方体外诱导HEL细胞增殖抑制、分化  18-35
  1. 实验目的  18
  2. 实验材料和设备  18-19
    2.1 主要仪器设备  18
    2.2 主要材料和试剂  18-19
    2.3 主要溶液配制  19
  3. 实验方法  19-24
    3.1 细胞模型的建立  19-20
    3.2 MTT法测定细胞增殖抑制率  20-21
    3.3 流式细胞仪检测细胞分化抗原的表达率  21
    3.4 半定量RT-PCR检测HEL细胞内GATA1及细胞表面GPA等基因表达  21-24
    3.5 统计分析  24
  4. 实验结果  24-35
    4.1 MTT法检测青黛、莪术、葛根提取物分别对HEL细胞的增殖抑制率  24-25
    4.2 流式细胞学检测细胞表面抗原表达变化  25-32
    4.3 不同药物对HEL细胞GATA1、GPA的mRNA表达  32-35
第三部分讨论与结论  35-39
  1. 讨论  35-38
    1.1 血复康组方对HEL细胞增殖抑制影响  35-36
    1.2 血复康组方对HEL细胞诱导分化影响  36-38
    1.3 问题与展望  38
  2. 结论  38-39
参考文献  39-42
附录  42-43
综述  43-50
  参考文献  47-50
致谢  50

血复康组方对HEL细胞增殖抑制和诱导分化的研究

内容摘要

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