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三氧化二砷对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移能力的影响

作　者: 陈学娟
导　师: 张向宁
学　校: 山东大学
专　业: 妇产科学
关键词: 卵巢癌三氧化二砷侵袭转移尿激酶型纤溶酶原激活物尿激酶型纤溶酶原激活物受体
分类号: R737.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

研究背景、目的卵巢癌发病率居女性生殖系统恶性肿瘤的第三位,近年呈上升趋势,死亡率居首位。由于卵巢癌发病和进展隐匿,确诊时70%已属晚期,晚期卵巢癌5年生存率仅为30%。卵巢癌浸润、转移是造成卵巢癌治疗困难的主要原因。目前可供临床使用的治疗卵巢癌的药物种类较多,但卵巢癌对化疗的耐药性已经成为影响患者五年生存率的重要因素。三氧化二砷(As203)是一种历史悠久的中药,它是从砒霜中提取出来的有效药用成分。2000年美国FDA批准砷剂应用于临床治疗急性早幼粒细胞型白血病(APL),现有研究表明AS203不仅对APL具有显著疗效,而且能抑制多种实体肿瘤粘附、侵袭及转移能力。因其具有选择性强、骨髓抑制作用小且与多种化疗药物无交叉耐药等优点而被国内外研究所关注,并且随着质控技术的发展及对此药物研究的不断深入,其临床应用价值越来越受重视。本研究旨在探讨三氧化二砷能否对卵巢癌的侵袭转移能力产生影响并进一步探讨其作用机制,为临床用药提供理论指导。方法本研究选取人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验研究对象,采用体外细胞培养的方法,实验时选择处于对数生长期的细胞,设立空白对照组、三种不同浓度(0.5μmol/L.1μmol/L、2μmol/L)三氧化二砷处理组；采用Transwell侵袭实验方法检测空白组及不同药物浓度处理下人卵巢癌SKOV3细胞的侵袭转移能力的变化情况；实时定量PCR及免疫细胞化学方法检测各组细胞uPA、uPAR mRNA及蛋白表达的变化情况。实验所得数据应用SPSS17.0统计学软件分析,数据以x±s表示,与对照组比较采用t检验,各处理组之间采用单因素方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。结果对照组和经过不同浓度As203处理的实验组细胞穿过小室滤膜的细胞数分别为152.56±17.36、131.67±10.10、102.11±12.74、63.33±11.37。对照组与各实验组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)；实验组细胞穿过小室的数目随着As203浓度的增加而减少,各浓度组间差异显著(P<0.05)。实时定量PCR实验显示各实验组中uPA及uPAR基因相对表达水平均低于对照组细胞,两两比较均具有统计学差异(P<0.05),各实验组表达的下降趋势随As203的浓度增加而显著(P<0.05)；免疫细胞化学检测uPA阳性染色为细胞浆中出现棕黄色颗粒,uPAR阳性染色为细胞膜上出现棕色颗粒。对照组中可见uPA、uPAR的强阳性表达；其他实验组可见随着药物浓度增大染色逐渐变淡,且阳性细胞数减少,阴性对照组胞浆及胞膜均未见棕黄色染色。表明As203可以下调uPA及uPAR的表达,并随着As2O3浓度的增加其抑制作用越明显。结论三氧化二砷可抑制人卵巢癌细胞株SKOV3细胞的侵袭、转移能力,其作用机制可能与抑制uPA、uPAR的表达有关。

三氧化二砷对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移能力的影响

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