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家兔心衰心肌细胞钙渗漏机制初步研究

作　者: 朱君
导　师: 杨向军
学　校: 苏州大学
专　业: 心血管病学
关键词: 心力衰竭钙渗漏钙调蛋白激酶Ⅱ 蛋白激酶A
分类号: R541.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:探讨心衰家兔心肌细胞钙渗漏与钙调蛋白依赖性激酶II（CaMKⅡ）及蛋白激酶A（PKA）表达和活性的关系,以阐明心衰心肌细胞钙渗漏发生的可能机制。方法:（1）实验分组:30只家兔被随机分为2组:假手术组（n=15）和心衰组（n=15）;联合应用主动脉瓣破瓣术及腹主动脉缩窄术建立家兔心衰模型,共观察7周。（2）家兔心功能测定:利用心导管术及心脏多普勒观察家兔血流动力学变化及心脏功能。（3）家兔心肌细胞肌浆网（SR）钙渗漏测定:应用钙成像系统测定心肌细胞SR钙渗漏程度。（4）蛋白激酶表达和活性的测定:分别采用蛋白免疫印迹法（Western blot）和γ-32P掺入法测定心肌组织钙调蛋白依赖性激酶I（ICaMKⅡ）和蛋白激酶A（PKA）的蛋白表达水平和活性。结果:（1）两组家兔心功能的比较:与假手术组相比,心衰组家兔左室舒张末压（LVEDP）（mmHg:-6.00±3.70 vs 25.10±4.33）明显升高（P<0.05）;左室射血分数（EF）（%:72.35±3.27 vs 43.67±7.12）明显降低（P<0.05）。（2）两组家兔心肌细胞SR钙渗漏程度的比较:经钌红干预后,与假手术组相比,心衰组家兔SR钙回摄量（nmol/l:98.64±20.15 vs 221.67±19.32）显著增加（P<0.01）。（3）两组家兔心肌组织蛋白激酶表达和活性比较:与假手术组相比,心衰组家兔心肌组织CaMKII蛋白表达（RCaMKII/actin:0.78±0.20 vs 1.24±0.34）和活性(pmol·min^-1·μg^-1:2.20±0.14 vs 4.12±0.19)均明显增加（P<0.05）;PKA蛋白表达（RPKA/actin:0.89±0.12 vs 0.59±0.21）和活性(pmol·min^-1·μg^-1:1.83±0.07 vs 1.01±0.03)均明显降低（P<0.05）。结论:（1）用超容量负荷联合压力负荷,可成功建立家兔慢性心力衰竭模型。（2）心衰家兔心肌细胞肌浆网钙渗漏程度明显增加。（3）在本实验家兔心衰模型中,心衰心肌细胞钙渗漏增加可能主要与钙调蛋白激酶Ⅱ途径激活兰尼丁受体2（RyR2）过度开放相关。

家兔心衰心肌细胞钙渗漏机制初步研究

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