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花烛离体快繁关键技术及再分化有关机理探讨
作 者: 赵云鹏
导 师: 郭维明
学 校: 南京农业大学
专 业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 花烛 离体快繁 再分化 生理生化机理 解剖学特点 RAPD
分类号: S682
类 型: 硕士论文
年 份: 2003年
下 载: 189次
引 用: 4次
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内容摘要
本研究以花烛(Anthurium andraeanum)品种‘Jolanba’、A1、B1为材料,研究了无菌培养体系的建立、无菌苗的复壮与培养体系的更新、试管苗的炼苗移栽,建立了‘Jolanba’离体培养体系。以‘Jolanba’再分化差异显著的三种愈伤组织为材料,从内源激素的协同调节等方面探讨了花烛再分化的有关生理生化机理。以‘Jolanba’8种不同培养时期或不同激素处理的愈伤组织为材料,探讨了花烛离体形态发生途径和8种愈伤组织离体形态差异的解剖学特点。应用RAPD技术探讨了花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力的相关性。 结果表明: 不同花烛品种间离体形态发生能力差异极显著,依次为:‘Jolanba’>A3>A1、A9>B1、B2。‘Jolanba’愈伤组织诱导的最佳外植体为红棕色的初展叶或刚转绿的成熟叶,部位以叶片基部为宜;愈伤组织诱导的培养基成分组合为1/2macro+BA 1.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L+3%蔗糖;接种方式以叶片正面朝上为宜。适宜的芽诱导培养基为MS+0.5mg/L BA+NAA 0.1mg/L。 外源激素浓度应随花烛继代次数的增加而逐步降低至0;活性炭对再生芽的复壮有较显著效果。无菌苗的茎尖最适宜作为‘Jolanba’培养体系更新中愈伤组织诱导的外植体;诱导愈伤组织的培养基为1/2macro+BA 1.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L;芽诱导培养基为Ms+TDZ 0.01mg/L。 移栽苗采用高约3cm、带2~3条长0.5~1cm的根、最大叶宽0.8cm以上的健壮试管苗;移栽基质为珍珠岩或泥炭土+珍珠岩(2:1)。 再生芽的分化需要较高水平的可溶性蛋白质,而再生芽的生长则需要较高水平的可溶性糖。POD和SOD活性与分化的芽数呈正相关。GA(1+3)/ABA、ZRs/ABA的高比例与再生芽的高度呈显著的正相关;IAA/ABA与花烛离体根发生成较好的正相关。 花烛‘Jolanba’的离体形态发生途径以不定芽途径为主,同时也有低频率的体细胞胚发生。8种愈伤组织在结节的类型、分生细胞的数量及分布等方面存在差异。 花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力有较好的相关性。 本文中花烛离体培养体系的更新及TDZ对该过程中芽分化的作用,从生理生化和解剖学水平探讨花烛再分化机理和特点,以及应用RAPD技术探讨花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力的相关性等创新性研究,国内外尚未见相关文献报道。
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全文目录
中文摘要 7-8 英文摘要 8-10 引言 10-11 文献综述 11-19 研究一 花烛离体快繁关键技术的探讨 19-34 试验一 无菌培养体系的建立 19-26 1 材料与方法 19-21 1.1 材料 19 1.2 方法 19-21 2 结果与分析 21-25 2.1 培养基成分对愈伤组织诱导的影响 21-23 2.2 外植体对愈伤组织诱导的影响 23-24 2.3 接种方式对愈伤组织诱导的影响 24 2.4 再生芽诱导的研究 24-25 2.5 不同品种离体再生能力的比较 25 3 讨论 25-26 4 结论 26 试验二 无菌苗的复壮与培养体系的更新 26-30 1 材料与方法 27 1.1 材料 27 1.2 方法 27 2 结果与分析 27-29 2.1 无菌苗的复壮 27-28 2.2 培养体系的更新 28-29 3 讨论 29-30 4 结论 30 试验三 无菌苗的炼苗移栽 30-34 1 材料与方法 31 1.1 材料 31 1.2 方法 31 2 结果与分析 31-33 2.1 试管苗大小对试管苗移栽的影响 32 2.2 不同栽培基质对试管苗移栽的影响 32-33 2.3 不同喷雾频率对试管苗移栽成活的影响 33 3 讨论 33 4 结论 33-34 研究二 花烛愈伤组织再分化有关机理与特点的探讨 34-49 试验一 花烛三种愈伤组织再分化差异的有关生理生化机理 34-40 1 材料与方法 34-36 1.1 材料 34 1.2 方法 34-36 2 结果与分析 36-38 2.1 三种愈伤组织可溶性糖及可溶性蛋白质含量的比较 36 2.2 三种愈伤组织POD和SOD活性及其同工酶的比较 36-37 2.3 三种愈伤组织内源植物激素含量的差异 37-38 3 讨论 38-40 4 结论 40 试验二 花烛不同愈伤组织解剖结构的观察 40-44 1 材料与方法 40-41 1.1 材料 40-41 1.2 方法 41 2 结果与分析 41-42 2.1 花烛离体形态发生途径 41 2.2 三种再分化差异显著的愈伤组织解剖结构的观察 41-42 2.3 离体培养不同阶段愈伤组织解剖结构的观察 42 2.4 不同激素调节下愈伤组织解剖结构的观察 42 3 讨论 42-43 4 结论 43-44 研究三 RAPD法分析花烛品种遗传多样性及与分化的相关 44-49 1 材料与方法 44-45 1.1 材料 44-45 1.2 方法 45 1.3 数据分析 45 2 结果与分析 45-48 2.1 基因组DNA质量的检测 45-46 2.2 引物的筛选及DNA扩增结果 46-47 2.3 品种间亲缘关系及其与品种离体再生能力的相关性 47-48 2.4 品种识别 48 3 讨论 48 4 结论 48-49 参考文献 49-54 图版 54-60 致谢 60
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 观赏园艺(花卉和观赏树木) > 多年生花卉类
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