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乳铁蛋白基因多态性、乳腺自由基变化与奶牛隐性乳房炎相关性研究

作　者: 赵长红
导　师: 何高明
学　校: 石河子大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 乳铁蛋白基因隐性乳房炎 PCR-RFLP 自由基代谢
分类号: S858.23
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本研究对牛乳铁蛋白(bLF)基因启动子区进行PCR-RFLP分析,发现牛乳铁蛋白基因启动子区存在多态性,并分析其作为隐性乳房炎抗性分子标记的可行性,同时探讨健康奶牛与隐性乳房炎奶牛乳腺自由基的代谢特点,为阐明隐性乳房炎发病机理奠定理论基础。1.乳铁蛋白基因启动子区的多态性与隐性乳房炎相关分析本试验采用PCR-RFLP技术对牛乳铁蛋白启动子区进行了多态性检测。结果表明,牛乳铁蛋白启动子区在HinfⅠ酶切位点存在多态性,其酶切位点由2种共显性等位基因控制。在健康组中, AA基因型为优势基因型,差异极显著(P<0.01)。在隐性乳房炎组中,BB基因型为优势基因型,差异极显著(P<0.01)。AB基因型频率在2组中不存在差异(P>0.05)。健康组中A等位基因频率高于隐性乳房炎组(P<0.01),隐性乳房炎组中B等位基因频率高于健康组(P<0.01),平均体细胞分(SCS)在2组中不存在差异(P>0.05)。隐性乳房炎组未达到了Hardy-Weinberg平衡状态,健康组达到了Hardy-Weinberg平衡状态,表明乳铁蛋白多态性与隐性乳房炎有关。2.乳腺自由基代谢与奶牛隐性乳房炎的相关分析动物乳腺内自由基的变化和乳腺上皮细胞变态性与细胞代谢功能密切相关。本试验采用试剂盒对奶牛血清中过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)含量的测定,结果表明,隐性乳房炎患牛丙二醛(MDA)产量增多(P<0.05),抗氧化酶SOD活性下降(P<0.05)、GSH-Px活性下降(P<0.01)、总抗氧化能力降低(P>0.05)。隐性乳房炎牛乳房内发生过氧化反应,总抗氧化能力下降,抗氧化系统不能清除活性氧及产物,引起乳腺细胞的炎症。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
目录  9-11
本文缩写的中英文对照  11-12
前言  12-13
第一篇文献综述  13-19
  1. 奶牛乳房炎的研究进展  13-14
  2. 体细胞数与乳房炎的关系  14-15
  3. 乳铁蛋白与隐性乳房炎的关系  15-17
  4. 自由基的研究进展  17-18
    4.1 机体内的活性氧自由基及其性质  17
    4.2 活性氧自由基对组织的损伤  17-18
    4.3 活性氧自由基清除剂  18
  5. 本研究的目的意义  18-19
第二篇试验研究  19-30
  试验一乳铁蛋白基因启动子区多态性与隐性乳房炎相关分析  19-25
    1. 试验材料与方法  19-22
      1.1 试验材料  19
      1.2 试验方法  19-22
      1.3 数据处理及统计分析  22
    2. 结果与分析  22-24
      2.1 PCR 反应条件的优化  22-23
      2.2 PCR 扩增结果  23
      2.3 PCR-RFLP 结果  23
      2.4 bLf 基因启动子 RFLP 的基因频率和基因型频率  23-24
      2.5 bLf 基因启动子 Hardy-Weinberg 平衡分析  24
    3. 讨论  24-25
      3.1 奶牛隐性乳房炎与 SCC 的相关性分析  24-25
      3.2 Lf 的抗菌活性  25
      3.3 隐性乳房炎的遗传学研究  25
      3.4 Lf 基因启动子区的 RFLP 多态性与隐性乳房炎相关性分析  25
  试验二乳腺自由基代谢与隐性乳房炎的相关分析  25-30
    1. 试验材料与方法  26-28
      1.1 试验材料  26
      1.2 试验方法  26-28
    2. 结果  28-29
    3. 分析与讨论  29-30
结论  30-31
参考文献  31-34
附录石河子 150 团某牛场部分奶牛隐性乳房炎调查  34-37
致谢  37-39
作者简介  39
研究生期间发表的文章  39

乳铁蛋白基因多态性、乳腺自由基变化与奶牛隐性乳房炎相关性研究

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