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不同生精周期大鼠支持细胞核孔数量的变化

作　者: 杨海英
导　师: 朱宝长
学　校: 首都师范大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 核孔数量 生精周期 生精周期同期化
分类号: Q954.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


使用冰冻蚀刻技术研究发现支持细胞核孔数量可能与生精周期相关，然而该技术不仅操作技术繁琐，而且只能针对细胞核的部分区域进行研究，为了阐明支持细胞核孔数量与生精周期的关系，本实验使用维生素A缺乏饲料建立了大鼠睾丸同期化模型，对生精周期早期Ⅱ-Ⅵ期，中期Ⅶ-Ⅷ期，后期Ⅺ-ⅩⅣ期的睾丸组织采用免疫荧光技术标记，使用激光扫描共聚焦显微镜三维扫描，获得单个支持细胞核的系列扫描数据，对所得数据进行合成处理和统计学分析，检测大鼠不同生精周期的细胞核孔数量及变化状态。结果表明，Ⅺ-ⅹⅣ期的支持细胞核孔数量显著地高于其它两组(P＜0.05)为3654±827个(最多)。Ⅶ-Ⅷ期支持细胞核孔数量比Ⅱ-Ⅵ期多，但无显著差异。由此可见在不同的生精周期，除FSH受体，抑制素分泌等呈现周期性变化外，支持细胞核孔数量在不同的生精周期也呈现周期性变化，说明在不同生精周期睾丸可以通过某种方式对支持细胞的核孔复合物的数量产生影响，从而影响到支持细胞在睾丸中的生理功能，对调节睾丸精子发生、激素代谢水平等研究具有重要的理论价值。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-8
第一部分 文献综述及本题意义  8-26
  一、皋丸中主要细胞的功能及关系  8-12
    1. 支持细胞的功能  8-10
    2. 间质细胞的功能  10-11
    3. 生精细胞的种类及功能  11
    4. 支持细胞、间质细胞及精细胞的关系  11-12
  二、核孔复合体的动态变化  12-17
    1. 核孔复合体的结构和蛋白组成  12-13
    2. 核孔复合体的动态组装假说  13-15
    3. 不同生理状态下核孔复合体的动态变化  15-17
  三、维生素A在雄性生殖系统中的作用  17-23
    1. 维生素A受体分类及其在辜丸中的分布  17-19
    2. 维生素A在辜丸中的代谢途径  19-21
    3. 维生素A在皋丸的发育中的作用  21
    4. 维生素A对成体辜丸的影响  21-22
    5. 维生素A缺乏模型的研究  22-23
  四、本课题的理论依据及意义  23-26
    1. 本题的理论依据  23-24
    2. 本题的主要内容和意义  24-26
第二部分 材料与方法  26-32
  一、实验材料  26
    1. 动物来源  26
    2. 主要试剂  26
    3. 主要仪器  26
  二、实验方法  26-32
    1. 动物模型建立及取材  26-27
    2. 组织石蜡切片  27
    3. HE染色  27
    4. 免疫荧光标记支持细胞核的核孔和细胞骨架蛋白-Vimentin  27-28
    5. 激光扫描共聚焦显微镜下支持细胞的核孔的采集  28-30
    6. 图像处理及核孔数量的计算方法  30-32
第三部分 结果与分析  32-41
  一、动物模型的检测  32-34
    1. 动物模型的检测结果  32-33
    2. 模型中曲细精管生精周期的形态学观察  33-34
    3. 模型中曲细精管生精周期的分布  34
  二、支持细胞的核孔图像采集及分析  34-41
    1. 支持细胞的双标记效果  34-35
    2. 支持细胞细胞核的系列扫描图  35-37
    3. 核孔数量的计算和分析  37-39
    4. 支持细胞核孔在核膜表面的分布  39
    5. 支持细胞核形态变化  39-41
第四部分 讨论  41-49
  一、动物模型的建立与检测  41-43
    1. 维生素A缺乏模型的选用  41
    2. 大鼠维生素A缺乏模型的建立  41-42
    3. 大鼠维生素A缺乏模型的检测  42-43
  二、支持细胞的核孔采集  43-44
    1. 支持细胞核孔的采集  43
    2. 支持细胞的核孔标记  43-44
  三、核孔数量的分析  44-48
    1. 核孔数量的计算  44-45
    2. 支持细胞核孔在核膜表面的分布  45-46
    3. 支持细胞核形态的变化  46
    4. 核孔数量与生精周期的关系  46-48
  四、不同生精周期中支持细胞核孔数量差异的生物学意义  48-49
第五部分 结论与展望  49-50
  一、结论  49
  二、展望  49-50
参考文献  50-57
附录  57-59
致谢  59

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中图分类: > 生物科学 > 动物学 > 动物形态学 > 动物胚胎学（动物发生学、动物胎生学）
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