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小鼠磨牙中同时过表达sFrp2和sFrp3对磨牙发育的影响
作 者: 林运鸿
导 师: 张彦定
学 校: 福建师范大学
专 业: 发育生物学
关键词: sFrp2 sFrp3 Wnt信号通路 磨牙 成釉质细胞
分类号: Q954.48
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 4次
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内容摘要
牙齿的发育是由牙上皮和牙间充质之间的相互诱导产生的。各种信号通路,特别是Wnt信号通路在这一相互诱导过程中起着重要的作用,但是有关Wnt信号通路在牙齿发育过程中的具体作用及作用机制的研究还有待完善。本实验通过慢病毒感染技术,在牙间充质细胞中同时过表达Wnt信号通路的拮抗物sFrp2和sFrp3,研究其对小鼠磨牙发育的影响,从而探讨Wnt信号通路在小鼠磨牙发育中的具体作用及可能的作用机制。Real-time PCR的结果显示sFrp2和sFrp3的表达水平分别上调了270%和220%,Axin2的表达水平下调了60%左右,说明sFrp2和sFrp3的过表达效果良好,以及二者的同时过表达确实抑制了经典Wnt信号通路。分析移植不同天数的组织块发现,sFrp2和sFrp3的同时过表达加速了小鼠磨牙的发育进程,促进了成釉质细胞的分化和釉质基质的分泌,最终形成的牙齿牙釉质增厚和尺寸增大。实验发现, sFrp2和sFrp3的同时过表达导致Shh和Bmp4的表达量分别下调了62%和52%左右,这说明被抑制的经典Wnt信号通路可能通过影响其下游基因Shh和Bmp4的表达来影响小鼠磨牙的发育。本实验证明了Wnt信号通路在小鼠磨牙发育,特别是在成釉质细胞的发育过程中起着重要的作用。
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全文目录
中文摘要 2-3Abstract 3-4中文文摘 4-7目录 7-9绪论 9-21 1 小鼠牙齿的发育过程 9 2 小鼠牙齿发育的分子机制 9-10 3 成釉质细胞的分化机制及其研究进展 10-14 4 Wnt信号通路及其在小鼠牙齿发育过程中的作用 14-17 5 sFrp 17-18 6 慢病毒载体 18-19 7 本研究的目的和意义 19-21第一章 实验材料与方法 21-33 1.1 实验材料 21-23 1.2 实验方法 23-33第二章 实验结果与分析 33-47 2.1 慢病毒的生产 33-35 2.1.1 酶切鉴定质粒 33 2.1.2 三质粒系统共转染293T细胞生产慢病毒 33-34 2.1.3 慢病毒浓缩液的滴度测定 34-35 2.2 sFrp2和sFrp3同时过表达对小鼠磨牙发育的影响 35-43 2.2.1 Real-time PCR检测sFrp2和sFrp3的过表达情况 35-36 2.2.2 移植8天的组织块形态学分析 36-38 2.2.3 移植14天的组织块形态学分析 38-40 2.2.4 最终形成牙齿的形态学分析 40-43 2.3 sFrp2和sFrp3同时过表达对Wnt经典信号通路相关靶基因的影响 43-47第三章 讨论 47-53 3.1 慢病毒的生产 47-48 3.1.1 三质粒系统共转染293T细胞 47-48 3.1.2 慢病毒的滴度 48 3.2 慢病毒感染磨牙牙胚间充质细胞 48 3.3 Real-time PCR检测基因表达水平的变化 48-49 3.4 sFrp2和sFrp3同时过表达对小鼠磨牙发育的影响 49-50 3.5 sFrp2和sFrp3同时过表达对小鼠磨牙发育影响机制的初步探讨 50-53第四章 结论 53-55附录 55-57参考文献 57-65攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 65-67致谢 67-69个人简历 69-70
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中图分类: > 生物科学 > 动物学 > 动物形态学 > 动物胚胎学(动物发生学、动物胎生学) > 组织器官和系统发生(形体变化)
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