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FGF8在人和小鼠牙齿中亚型分析及其对牙齿发育的影响

作 者: 葛玉强
导 师: 张彦定
学 校: 福建师范大学
专 业: 发育生物学
关键词: FGF8 亚型 慢病毒 牙齿发育
分类号: Q954.48
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


哺乳动物的牙齿在发育的过程中,受到四大家族信号分子的调控。这四大家族包括:骨形成蛋白(BMP)、成纤维细胞生长因子(FGF)、刺猬蛋白家族(Hhs)和Wnt信号系统。FGF8是FGF信号通路中重要的一员。已有研究发现FGF8在人体中有四种亚型,分别是FGF8a、FGF8b、FGF8e和FGF8f;在小鼠中有八种亚型分别是FGF8a-h。人牙胚从牙板期到分化期FGF8都有强烈的表达,而小鼠磨牙牙胚在E12时FGF8表达很强烈,E13时表达开始下降,到了E14时不再表达。在人和小鼠的牙齿发育中,FGF8表达哪种亚型,其在人和小鼠牙齿发育中表达模式的不同对牙齿发育有什么影响,为了解决这些问题,进行了本实验。通过RT-PCR和测序比对分析,发现在人和小鼠牙齿的发育中都表达FGF8a亚型,两者表达的FGF8亚型一致。为了研究其对牙齿发育的影响,构建了pNL-IRES2-EGFP-FGF8a慢病毒载体。通过磷酸钙三质粒共转染293T细胞法生产慢病毒。通过FGF8a慢病毒感染小鼠E13.5磨牙间充质细胞来研究其作用。研究发现,感染了FGF8a慢病毒的牙胚,肾囊膜下移植8天后,牙齿发育到钟状期,与正常情况下发育到分泌期相比,牙齿发育被推迟。感染了FGF8a慢病毒的牙胚,肾囊膜下移植14天后,牙齿发育同样到了分泌期。但是牙齿结构上分析发现对照组的牙釉质相对较厚,实验组的牙釉质相对较薄;对照组的成釉细胞出现了退化现象,牙齿发育完全,而试验组的成釉细胞排列整齐,没有出现退化现象,牙齿发育被推迟。所以过表达FGF8a到了14天时候,FGF8a同样起到抑制牙齿发育的作用。

全文目录


中文摘要  2-3Abstract  3-4中文文摘  4-6目录  6-8绪论  8-20  1.1 哺乳动物牙齿的发育  8-11  1.2 FGF信号通路  11  1.3 FGF8与器官发育  11-17  1.4 慢病毒及其应用  17-20第一章 材料与方法  20-34  1.1 材料  20-23  1.2 方法  23-34第二章 实验结果  34-48  2.1 FGF8在人和小鼠牙齿中的亚型分析  34-37  2.2 FGF8a慢病毒载体构建  37-40  2.3 过表达FGF8a慢病毒的生产  40-42  2.4 过表达FGF8a对牙齿发育的影响  42-48第三章 分析与讨论  48-52  3.1 牙齿中FGF8亚型鉴定的探索  48  3.2 有关慢病毒载体的构建  48-49  3.3 有关慢病毒的生产与滴度  49-50  3.4 过表达FGF8a对牙齿发育影响  50-52第四章 结论  52-54附录  54-60  附录1 测序比对结果  54-59  附录2 pNL-IRES2-EGFP质粒图谱  59-60参考文献  60-70攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  70-72致谢  72-74个人简历  74-75

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中图分类: > 生物科学 > 动物学 > 动物形态学 > 动物胚胎学(动物发生学、动物胎生学) > 组织器官和系统发生(形体变化)
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