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同源框基因HOXA11启动子重组质粒的构建与表达
作 者: 宗华凤
导 师: 王莉芬
学 校: 大连医科大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: HOXA11基因 启动子 T载体 pEGFP-1 Ishikawa细胞
分类号: R346
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
下 载: 66次
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内容摘要
同源框基因(homeobox gene)是一类调控胚胎发育和细胞分化的转录调节基因,这类基因中都存在一个由183个碱基对(bp)组成的、高度保守的同源框(homeobox)序列。HOX基因是同源框基因中的一大类,其表达的蛋白质是一类转录调节因子,都有一个由相应同源框序列编码的约61个氨基酸组成的同源域(homeodomain)结构,这一结构通过与顺式调控元件相结合,实现HOX基因对靶基因的调控。HOXA11属HOX基因家族中的一员,在胚胎尾部体节中表达,主要参与子宫形态的发生和发育;HOXA11基因的产物作为转录因子参与调节子宫内膜形态发育和分化成熟。卵巢激素与HOX基因表达的关系成为近年来生殖领域的研究热点。目前认为HOX基因是性激素对子宫调节链中的重要介导基因,雌、孕激素对内膜的多种调节作用主要通过HOX基因介导完成的。本课题组以往的研究发现,HOXA11在子宫内膜的表达受雌、孕激素调节,在分泌中期HOXA11表达变化最明显;并且首次发现,分泌中期内膜腺上皮HOXA11的表达明显减弱甚至消失、孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因的表达具有负调控作用。这种负调控作用与分泌中期内膜的分化、成熟以及子宫接受态(receptive state)的形成密切相关。但是,有关孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因的负调控作用机制,目前尚不清楚;HOXA11基因的启动子区是否存在着孕激素反应元件尚未见报道。因此,本研究的目的是:通过构建HOXA11 pEGFP-启动子重组质粒,确定HOXA11基因启动子的位置;证明HOXA11启动子区是否存在孕激素反应元件,为进一步研究孕激素对内膜腺上皮负调控机制奠定实验基础。主要方法:从基因库中查找人HOXA11基因序列,分别在正义链和反义链上预测两段启动子区域(分别命名为启动子1,启动子2),设计PCR引物;从人蜕膜组织中提取基因组DNA,用PCR方法得到克隆目的基因片段;
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全文目录
一、正文 5-44 (一) 中文摘要 5-7 (二) 英文摘要 7-10 (三) 前言 10-12 (四) 材料与方法 12-30 (五) 结果 30-35 (六) 讨论 35-38 (七) 结论 38-39 (八) 参考文献 39-42 (九) 附图 42-44 二、文献综述 44-56 (一) 综述 44-52 (二) 参考文献 52-56 三、致谢 56-57
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体生物化学、分子生物学
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