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上海地区生猪屠宰产品中猪链球菌2型和戊型肝炎病毒两种人兽共患病病原的调查

作　者: 唐晓萍
导　师: 崔立
学　校: 上海交通大学
专　业: 兽医
关键词: 猪链球菌2型分离鉴定毒力基因猪戊型肝炎病毒基因型同源性
分类号: S855.99
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

猪链球菌2型(SS2)和猪的戊型肝炎病毒(hepatitis E ,HEV)是生猪和猪肉产品携带的主要人畜共患病病原。本研究主要是对上海地区屠宰场的生猪产品中这两种病原的携带情况进行了调查,旨在对食品安全及相关工作的健康保护等提供有价值参考数据。1.上海地区屠宰场猪扁桃体致病性链球菌2型携带情况的调查2006年3月-11月,在上海的四家生猪屠宰场采集猪扁桃样本共475例,采用细菌培养、API20 Strep生化鉴定系统鉴定及猪链球菌2型定型PCP,确定共分离到27株猪链球菌2型。分离纯化得到的猪链球菌2型进行部分毒力因子基因检测,仅有两株表现为cps2/gdh+/epf-/mrp+,其余全部为cps2/gdh+/epf-/mrp-。结果显示,在上海的屠宰生猪中有猪链球菌2型感染,携带率为5.7%(27/475),但是未分离到强致病性猪链球菌2型(MRP+EF+)。2.上海地区生猪屠宰产品中共存基因Ⅲ型和Ⅳ戊型肝炎病毒2007年7-11月,在上海郊区4家屠宰场采集461份样本,其中包括60头屠宰生猪的胆汁、肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结,160份猪粪便、61份猪血液。采用HEV简并引物巢式RT-PCR,对采集样本进行检测,并对阳性样本的PCR产物序列进行测序和同源性分析。结果,在上海生猪屠宰产品中存在猪戊型肝炎病毒RNA,平均检出率为1.4%(5/461),胆汁检出率为3.3%(2/60)、猪粪0.6%(1/160)、血清3.2%(2/61)、肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结未检测到HEV RNA病毒。对5个阳性样本的测序及序列系统进化分析发现,其中2个为基因4型,3个为基因3型。3株基因3型HEV和一株日本野猪分离的基因3型HEV(AB222184)聚为一枝,同源性分析显示他们之间同源性为91.2%-98.6%,提示他们可能来源于同一祖先株。2基因4型毒株之间同源性为94.9%,与其他基因4型毒株同源性为82.5%-87.6%,他们单独聚为一枝在基因4型群内构成一个亚群,本研究中发现的两株基因4型HEV可能为新的亚型。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
符号说明  9-11
前言  11-12
第一篇文献综述  12-27
  1 猪链球菌2型  13-18
    1.1 猪链球菌 2 型概况  13
    1.2 猪链球菌 2 型的流行概况  13-17
    1.3 致病机理  17-18
  2 猪源戊型肝炎病毒  18-27
    2.1 猪源戊型肝炎病毒概况  18-21
    2.2 猪HEv的流行病学特征  21-22
    2.3 猪HEV的检测  22-26
    2.4 研究猪HEV的意义及面临的问题  26-27
第二篇研究内容  27-39
  第一章上海地区屠宰场猪扁桃体致病性链球菌 2 型携带情况的调查  27-33
    1.材料和方法  27-30
      1.1 样品的采集  27-28
      1.2 所用试剂,仪器和设备  28
      1.3 样品的均质、增菌和分离  28
      1.4 初步鉴定方法  28
      1.5 生化鉴定  28-29
      1.6 猪链球菌 2 型 PCR 定型检测  29
      1.7 猪链球菌 2 型毒力因子多重 PCR 检测  29-30
      1.8 废弃物处理  30
    2.实验结果  30-31
    3.讨论与结论  31-33
  第二章上海地区生猪屠宰产品中戊型肝炎病毒携带情况调查  33-39
    1. 材料与方法  34-35
      1.1. 样品的采集  34
      1.2. 病毒RNA提取与RT-nPCR  34
      1.3 引物的设计  34-35
      1.4 系统进化分析  35
    2. 结果  35-37
      2.1 戊肝病毒的检出率  35-36
      2.2 系统进化分析结果  36-37
    3. 讨论  37-39
全文总结  39-40
参考文献  40-46
致谢  46-47
攻读学位期间发表的学术论文目录  47-48
附录  48

上海地区生猪屠宰产品中猪链球菌2型和戊型肝炎病毒两种人兽共患病病原的调查

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