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产甘油益生菌的分离鉴定及其发酵条件的优化

作　者: 朱永兴
导　师: 黄克和
学　校: 南京农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 产甘油酿酒酵母分离鉴定发酵条件优化
分类号: S823.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 7次
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内容摘要

围产期奶牛能量代谢障碍性疾病是影响奶牛养殖业发展的一类重要疾病,其发病基础是围产期能量负平衡。甘油是一种好的生糖前体,奶牛可经糖异生途径利用甘油生成葡萄糖,为机体提供能量。本研究分离到一株可高产甘油的益生菌,经鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)；利用该酵母进行发酵产甘油,其发酵培养物富含甘油和大量酿酒酵母活菌,可应用于围产期奶牛饲料添加剂,发挥甘油缓解奶牛能量代谢负平衡和益生菌的双重作用,为研发一种防控围产期奶牛能量代谢障碍性疾病的微生态制剂提供条件。试验1本试验分离鉴定了一株产甘油酿酒酵母。从蜂蜜中分离筛选得到一株产甘油酵母,命名为NAU-ZH-GY1。通过形态特征和生理生化试验,并结合26S rDNA D1/D2区序列分析,鉴定该菌株为酿酒酵母,属于农业部法例允许作为饲用的益生菌。对其进行发酵产甘油试验,培养物中甘油产量为12.2g/L,活菌数量为107 CFU·mL-1。试验2本试验优化了产甘油酿酒酵母NAU-ZH-GY1的培养条件。采用单因素及正交试验在摇瓶中对产甘油酿酒酵母NAU-ZH-GY1的培养基进行优化,优化后的培养基组成为：葡萄糖20%、尿素0.4%、玉米浆干粉0.5%、NaCl2%。通过正交试验确定培养的优化工艺条件为：温度32℃、初始pH 5.0、接种量10%、时间2天、摇床振动频率180 rpm,甘油产量为24.3 g/L,细胞干重为25.7 g/L。试验3本试验研究了发酵罐中pH和溶氧对产甘油酿酒酵母NAU-ZH-GY1产甘油的影响。首先监测了初始pH 5.0条件下发酵过程pH的变化情况,然后对比了不同恒定pH对发酵的影响,并在此基础上研究了不同溶氧状况下发酵的效果。试验结果表明,发酵过程维持恒定的pH 5.0较适合甘油的生产,调节溶氧为70%时,甘油产量为32.7 g/L,细胞干重31.6 g/L

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摘要 6-7ABSTRACT 7-9前言 9-11第一章文献综述 11-29 一、围产期奶牛能量代谢障碍性疾病 11-15 二、微生态制剂在奶牛生产上的应用 15-18 三、甘油 18-19 四、酵母发酵生产甘油 19-21 五、酵母的鉴定方法 21-24 参考文献 24-29第二章一株产甘油益生菌的分离和鉴定 29-39 1 材料与方法 30-32 1.1 材料 30 1.2 方法 30-32 1.3 统计 32 2 结果 32-36 2.1 酵母菌的分离 32-34 2.2 筛选结果 34 2.3 鉴定结果 34-36 3 讨论 36-37 4 结论 37-38 参考文献 38-39第三章产甘油酿酒酵母培养条件的优化 39-49 1 材料与方法 39-40 1.1 材料 39 1.2 方法 39-40 1.3 统计 40 2 结果与分析 40-46 2.1 发酵培养基成分优化 40-44 2.2 发酵工艺条件的优化 44-46 3 讨论 46-47 4 结论 47-48 参考文献 48-49第四章发酵罐试验中pH和溶氧对产甘油酿酒酵母发酵的影响 49-55 1 材料与方法 49-50 1.1 材料 49-50 1.2 方法 50 1.3 统计 50 2 结果与分析 50-52 2.1 pH对发酵产甘油的影响 50-51 2.2 DO对发酵产甘油的影响 51-52 3 讨论 52-53 4 结论 53-54 参考文献 54-55全文结论 55-57本文创新点 57-59攻读硕士期间发表的论文 59-61致谢 61

产甘油益生菌的分离鉴定及其发酵条件的优化

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