学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

低双乙酰啤酒酵母的诱变育种研究

作　者: 陈茉
导　师: 平文祥
学　校: 黑龙江大学
专　业: 微生物学
关键词: 啤酒酵母发酵双乙酰诱变育种
分类号: TS262.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 21次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

双乙酰是影响啤酒的主要风味物质之一,它在啤酒中的阈值很低(0.1～0.15mg/L),超过这一阈值就会产生一种馊饭味,因此其含量的高低是啤酒质量优劣的重要标志。双乙酰超量已成为制约啤酒质量的重要因素,特别是在提高温度、缩短周期、增加辅料的低成本快速发酵中,这一问题更加突出。本文采用诱变育种和SM抗性筛选的方法获得产低双乙酰的啤酒酵母。分别采用紫外、NTG和微波对啤酒酵母进行诱变育种研究,以获得SM抗性突变株。紫外线的最适剂量为15W、30cm照射距离下的照射时间为40秒,获得突变株ZW-HDY-005,其双乙酰含量为0.23mg/L,乙醇含量为2.03%。NTG的最佳处理剂量为2mg/mL作用15分钟。获得突变株N-T-HDY-006,其双乙酰含量为0.25mg/L,乙醇含量为1.93%。将ZW-HDY-005进行NTG诱变,筛选得到SM抗性株FH-HDY-03,其双乙酰含量为0.19mg/L,乙醇含量为2.02%,微波诱变的最适诱变时间为120s,获得突变株WB-HDY-006,其双乙酰含量为0.17mg/L,乙醇含量为2.05%。连续转接10代后其遗传性状稳定。通过低温发酵试验,比较了WB-HDY-006和HDY-01发酵液中的悬浮酵母数、残糖、乙醇、双乙酰的含量。发现WB-HDY-006与HDY-01相比,在整个发酵过程中悬浮酵母能维持较多的数量。WB-HDY-006的残糖含量为5.50%,原始菌株HDY-01的含量为5.87%,相比下降6.3%。WB-HDY-006的乙醇含量为3.85%,原始菌株HDY-01的含量为2.76%,相比升高41.92%。WB-HDY-006的双乙酰含量为0.06mg/L,原始菌株HDY-01的含量为0.23mg/L,相比下降73.91%,并且WB-HDY-006的发酵周期与原始菌株HDY-01相比缩短了6d。

全文目录

中文摘要  3-4
ABSTRACT  4-9
第1章绪论  9-24
  1.1 啤酒生产中双乙酰的调控  9-13
    1.1.1 啤酒中双乙酰的产生机制以及降解途径  9-10
    1.1.2 啤酒生产中控制双乙酰的途径  10-13
  1.2 微生物诱变育种的研究进展  13-21
    1.2.1 紫外诱变育种  13-15
    1.2.2 激光诱变育种  15-16
    1.2.3 微波辐射诱变育种  16-17
    1.2.4 离子注入诱变育种  17-18
    1.2.5 空间诱变育种  18-19
    1.2.6 化学诱变育种  19-20
    1.2.7 复合诱变育种  20-21
  1.3 低双乙酰啤酒酵母的选育  21-22
    1.3.1 苯磺隆（SM）  21
    1.3.2 SM 抗性菌株选育低双乙酰啤酒酵母机理  21-22
  1.4 论文选题的意义  22
  1.5 论文研究的主要内容  22-23
  1.6 本研究的技术路线  23-24
第2章材料与方法  24-32
  2.1 试验材料  24-26
    2.1.1 供试菌株  24
    2.1.2 试验试剂  24
    2.1.3 培养基  24
    2.1.4 溶液配制  24-25
    2.1.5 仪器设备  25-26
  2.2 试验方法  26-32
    2.2.1 菌种活化与保藏  26
    2.2.2 SM 抗性株的分离  26-27
    2.2.3 生长曲线的绘制  27
    2.2.4 诱变处理  27-29
    2.2.4 SM 抗性株的筛选  29
    2.2.5 遗传稳定性试验  29
    2.2.6 发酵参数测定  29-32
第3章结果与分析  32-50
  3.1 种子液稀释倍数的确定  32
  3.2 SM 抗性株的分离结果  32-35
    3.2.1 SM 最小抑菌试验  32-33
    3.2.2 啤酒酵母SM 抗性与产低双乙酰相关性试验  33-35
  3.3 生长曲线的绘制  35-36
  3.4 紫外线诱变  36-38
    3.4.1 紫外线诱变的致死率  36-37
    3.4.2 SM 初筛法计算正变率  37-38
    3.4.3 初筛菌株双乙酰及乙醇产量测定  38
  3.5 化学诱变高产突变株  38-43
    3.5.1 亚硝基胍不同浓度对啤酒酵母的诱变效应  38-39
    3.5.2 SM 初筛法计算正变率  39-40
    3.5.3 初筛菌株双乙酰及乙醇产量测定  40-41
    3.5.4 亚硝基胍诱变不同的时间对啤酒酵母的诱变效应  41
    3.5.5 SM 初筛法计算正变率  41-42
    3.5.6 初筛菌株双乙酰及乙醇产量  42-43
  3.6 紫外线与亚硝基胍复合诱变  43-44
  3.7 微波诱变  44-46
    3.7.1 微波诱变的致死率  44
    3.7.2 SM 初筛法计算正变率  44-45
    3.7.3 初筛菌株双乙酰及乙醇产量测定  45-46
  3.8 遗传稳定性试验  46
  3.9 各种诱变方法的比较以及优势突变菌株的筛选  46-47
  3.10 发酵参数测定  47-50
    3.10.1 悬浮酵母数的测定  47-48
    3.10.2 糖度的测定  48-49
    3.10.3 酒精含量的测定  49
    3.10.4 双乙酰含量的测定  49-50
第4章讨论  50-53
  4.1 筛选方法的建立  50
  4.2 诱变方法的讨论  50-51
  4.3 发酵参数的测定  51
  4.4 优势菌株的特性  51-53
第5章结论  53-54
参考文献  54-61
致谢  61-62
攻读博士学位期间发表论文情况  62

低双乙酰啤酒酵母的诱变育种研究

内容摘要

全文目录

相似论文