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谷氨酰胺对脂多糖刺激16HBE细胞的保护作用研究

作　者: 唐丽霞
导　师: 刘亚玲
学　校: 华中科技大学
专　业: 儿科学
关键词: 谷氨酰胺脂多糖 16HBE HSP70 TLR4
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)在脂多糖(LPS)刺激的人支气管上皮细胞(16HBE)细胞中的保护作用及热休克蛋白70(HSP70)、Toll样受体4(TLR4)的表达影响。方法:体外培养16HBE细胞,分为五组,包括对照组、LPS组(1μg/ml)、0.5mmol/LGln +1μg/ml LPS组、10mmol/LGln +1μg/ml LPS组、1μg/ml LPS+10mmol/L Gln组。前四组Gln在LPS刺激前8小时加入,最后一组Gln与LPS同时加入。每组5孔,LPS刺激24小时。MTT比色法于波长490nm酶联免疫测定仪处测定OD值,观察细胞存活情况。Real-time PCR测定HSP70、TLR4的mRNA相对含量。结果: MTT对细胞活力的检测结果:①与对照组相比,LPS组细胞存活率明显降低(P<0.05);②与LPS组相比,10mmol/LGln +LPS组细胞存活率升高,差异有统计学意义(P<0.05);③与0.5mmol/LGln +LPS组比较,高浓度10mmol/LGln +LPS组细胞存活率明显升高(P<0.05);④与同时给予LPS+10mmol/LGln组比较,提前给予10mmol/LGln+LPS组细胞存活率明显改善(P<0.05)。Real-time PCR对HSP70、TLR4mRNA检测结果:①与LPS组比较, 10mmol/LGln +LPS组细胞HSP70 mRNA表达上调、TLR4 mRNA下调,表达量差异有统计学意义(P<0.05);②与0.5mmol/LGln +LPS组比较,高浓度10mmol/LGln +LPS组细胞HSP70、TLR4表达的差异有统计学意义(P<0.05);③与同时给予LPS+10mmol/LGln组比较,提前给予10mmol/L Gln +LPS组细胞HSP70、TLR4mRNA含量差异亦显著(P<0.05)结论:谷氨酰胺对LPS刺激的16HBE细胞具有一定程度的保护作用,且与给药时间和浓度有密切关系;HSP70mRNA上调和TLR4mRNA下调可能是谷氨酰胺对细胞保护作用机制之一。

全文目录

主要缩略词和中英文对照  5-6
摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-12
材料与方法  12-17
结果  17-22
讨论  22-26
全文总结  26-27
参考文献  27-30
综述  30-41
  参考文献  37-41
致谢  41-42

谷氨酰胺对脂多糖刺激16HBE细胞的保护作用研究

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