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水解酶新显色底物的设计合成及初步表征

作　者: 党济政
导　师: 杨晓兰
学　校: 重庆医科大学
专　业: 药物化学
关键词: 酶联免疫吸附测定碱性磷酸酶对硝基苯酚等吸收波长显色团底物
分类号: R914.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

针对酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assay,ELISA)分析效率低，可测范围窄等缺点。提出了利用等吸收波长同步测定多组分的新方法：单通道多组分酶联免疫吸附测定(Single-ChannelMultiple-Component Simultaneous ELISA, SCMCS-ELISA)。根据常用的免疫分析酶筛选出了牛小肠碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)、猪血清芳香酯酶、α-D-半乳糖苷酶和β-D-半乳糖苷酶做为候选水解酶。相应的选取常用的水解酶底物对硝基苯基乙酸酯、对硝基苯基磷酸酯二钠盐、对硝基苯基α-D-半乳糖苷做为候选组合底物。根据候选水解酶和相应底物及产物对硝基苯酚(4-nitronaphthol,4-NNP)的吸收波长设计出了有望与之组合的水解酶新底物模型。合成之后测定新底物吸收峰的变化，对不符合吸收峰要求的底物在将母核上加以修饰官能团，最终得到了符合等吸收波长要求的底物4-硝基-1-萘磷酸酯和4-硝基-1-萘-β-D-半乳糖苷(4-nitro-1-naphthyl-β-D-galactopyranoside,4-NNPG)和其余有望进一步修饰并应用的新底物。经测定两个新底物的米氏常数(Michaelis-Mentenconstant, Km)、缓冲液效应、PH效应和动力学性质后，推断出其可以作为SCMCS-ELISA水解酶的新底物。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
中文摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-11
第一部分水解酶新显色底物模型的建立和筛选  11-15
  1 显色团 B 的选择  11
  2 显色团 A 模型的建立  11-13
  3 其余酶新显色底物的模型建立  13-14
  本部分小结  14-15
第二部分水解酶新显色底物的合成  15-34
  1 实验材料  15-17
  2 实验方法  17-30
  3 结果  30-33
  本部分小结  33-34
第三部分水解酶新显色底物活性的测定与初步表征  34-50
  1 实验材料  34-35
  2 实验方法  35-43
  3 结果  43-49
  本部分小结  49-50
总结与展望  50-51
参考文献  51-54
致谢  54-55
硕士期间发表论文情况  55-56

水解酶新显色底物的设计合成及初步表征

内容摘要

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