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人参根际土壤真菌与内生真菌的多样性及人参皂苷生物催化活性菌株的筛选

作　者: 张薇
导　师: 吕国忠
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 土壤真菌 内生真菌 人参皂苷 生物转化
分类号: Q93
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 288次
引　用: 2次
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内容摘要


人参（Panax ginseng C.A.Meyer）是五加科人参属多年生的草本植物,是我国传统名贵中药材,具有大补元气、益肺、生津、安神等功效,在《神农本草经》中被列为上品,是常用的滋补强壮药,近年来,越来越被人们广泛应用。本文对人参的根际土壤真菌及内生真菌进行了分离和纯化,针对人参根际土壤及内生真菌的物种多样性开展系统研究,明确主要真菌种类资源和区系分布规律,分离获得有经济价值的真菌种类资源,并利用筛选获得的活性菌株对人参主要活性物质人参皂苷类成分进行转化,为人参根际土壤真菌和内生真菌的资源利用以及人参稀有人参皂苷的规模化生产奠定基础。于2009年的7-10月间在辽宁省的桓仁,吉林省的集安、靖宇、抚松等药材产区采集人参及人参根际土壤样品。通过真菌的分离和培养,共获得真菌菌株105株,分别编号为IBE023001-105,经形态学鉴定分属于16属42种。分离到的部分真菌种类是重要的人参病原菌,如Cylindrocarpon didymum,C. destructans、Fusarium oxysporum和F. solani等。同时研究得到两株重要的人参内生菌,莫勒接霉Zygorhynchus moelleri和灰绿犁头霉Absidia glauca。对分离获得的105株真菌进行了人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd和Rg1的微生物转化试验。经TLC检测分析,初步证明有24株真菌对人参皂苷具有转化作用。进一步采用HPLC检测,筛选出5株能高效转化人参皂苷Rb1为Rd的真菌,其中4株真菌能将人参皂苷Rb1转化为Rg3,5株真菌能将人参皂苷Rb1转化为Rh2,4株真菌能将人参皂苷Rd转化为Rg3和Rh2。研究发现,莫勒接霉Zygorhynchus moelleri（菌株IBE023087）和灰绿犁头霉Absidia glauca（菌株IBE023105）对人参皂苷Rb1具有专一转化活性,能够高效转化为人参皂苷Rd,有望应用于医药业Rd的规模化生产。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-7
引言  7-8
1 文献综述  8-23
  1.1 人参的生长环境及化学成分  8-9
    1.1.1 人参的药理作用及生长环境  8
    1.1.2 人参的化学成分  8-9
  1.2 土壤真菌多样性研究进展  9-12
    1.2.1 土壤真菌物种多样性  9-10
    1.2.2 土壤真菌生境多样性  10
    1.2.3 土壤真菌功能多样性  10-11
    1.2.4 土壤真菌遗传多样性  11-12
    1.2.5 研究人参根际土壤真菌及内生菌多样性的价值  12
  1.3 人参主要活性物质-人参皂苷的理化性质  12-15
    1.3.1 人参皂苷的结构及药理性质  12-13
    1.3.2 人参皂苷的生理活性  13-15
  1.4 人参皂苷微生物转化研究进展  15-21
    1.4.1 微生物转化人参皂苷的一般方法  15-16
    1.4.2 真菌对人参皂苷转化的作用  16-17
    1.4.3 微生物转化人参皂苷的机理  17-21
  1.5 论文的目的及意义  21-22
  1.6 论文的技术路线  22-23
2 人参根际土壤及人参根内生菌多样性的研究  23-59
  2.1 实验材料与方法  23-25
    2.1.1 实验材料  23
    2.1.2 实验方法  23-25
  2.2 真菌鉴定  25
  2.3 结果  25-55
    2.3.1 接合菌门Zygomycota  25-29
    2.3.2 子囊菌门 Ascomycota  29-30
    2.3.3 无性型真菌 Anamorphic fungi  30-55
  2.4 讨论  55-59
    2.4.1 不同生长地区人参根际土壤真菌的分布特点  55-56
    2.4.2 根腐病人参和健康人参植株的根际土壤真菌分布特点  56-57
    2.4.3 人参内生菌多样性的分析  57-59
3 真菌转化人参皂苷类成分的初步研究  59-74
  3.1 材料  59-60
    3.1.1 试剂  59
    3.1.2 仪器  59-60
    3.1.3 供试菌种  60
    3.1.4 培养基的制备  60
  3.2 实验方法  60-61
    3.2.1 初步筛选  60
    3.2.2 复筛  60-61
  3.3 检测方法  61-62
    3.3.1 薄层层析法  61
    3.3.2 高效液相法  61-62
  3.4 结果  62-70
    3.4.1 人参皂苷 Rb1生物转化的菌株筛选  63-66
    3.4.2 人参皂苷 Rb_2生物转化的菌株筛选  66-67
    3.4.3 人参皂苷 Rc 生物转化的菌株筛选  67-68
    3.4.4 人参皂苷 Rd 生物转化的菌株筛选  68-69
    3.4.5 人参皂苷 Rg1生物转化的菌株筛选  69-70
  3.5 讨论  70-74
结论  74-76
参考文献  76-80
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  80-81
致谢  81

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中图分类: > 生物科学 > 微生物学
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