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液—质联用检测虎仗和野生山葡萄中白藜芦醇及糖苷顺、反异构体研究

作　者: 季梅
导　师: 娄红祥
学　校: 山东大学
专　业: 药物化学
关键词: 高效液相色谱-质谱联用虎杖野生山葡萄白藜芦醇白藜芦醇苷
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

白藜芦醇(resveratrol,3,4′,5-三羟基二苯乙烯)是一种天然存在的二苯乙烯衍生物,具有显著的抗氧化和自由基清除作用,是目前极有发展前景的天然抗癌和保健药品,主要表现在对心血管和肝脏的保护作用、抗炎、抗肿瘤、植物雌激素作用及免疫调节等多种药理活性和生物活性。白藜芦醇广泛存在于蓼科的蓼属、葡萄科的葡萄属、豆科的落花生属、姚金娘科的桉属、百合科的藜属和桑科的木波罗属等多种植物体内,其中虎杖和葡萄植物中含量较高。白藜芦醇及其糖苷(piceid,3,4′,5-三羟基二苯乙烯-3-β-D-葡萄糖苷)在自然界有顺、反异构体存在,反式结构较稳定。在不同种属的植物体内,白藜芦醇的存在形式和含量不同;在同一植物中,白藜芦醇的含量因地域条件不同亦不相同,其含量随季节的变化有较大的差异。本课题对不同产地虎杖植物中白藜芦醇的存在形式及含量进行了检测,并对野生山葡萄的不同组织部位中,在不同季节时的白藜芦醇含量进行了研究,旨在寻求白藜芦醇最高含量的天然材药资源。本研究首先通过对文献报道的有关虎杖中自藜芦醇的提取方法进行比较,选择了提取效率高、操作简单的超生提取法。首次采用液相色谱-质谱联用法检测了11个产地虎杖中白藜芦醇及其糖苷的存在形式及含量。实验研究发现虎杖样品中除含有反式白藜芦醇糖苷、反式白藜芦醇外,还存在少量顺式白藜芦醇糖苷(文献鲜有报道)。可为虎杖植物有效成分的标准组分表征及质量标准的控制提供数据信息。为了考察野生山葡萄植物在不同季节、不同组织部位中白藜芦醇的存在形式及含量,本课题首次应用正交设计实验研究野生山葡萄植物中自藜芦醇的最佳提取方法。我们收集了(济南仲宫南山)1～12月份野生山葡萄的根茎、杆,3～10月份野生山葡萄叶,5～7月份果实为样本。经过水洗、切段、阴干,粉碎过40目筛,用最优提取方案进行提取,首次采用液质联合技术检测不同季节、不同组织部位野生山葡萄中白藜芦醇的存在形式及含量。实验结果表明野生山葡萄植物含反式白藜芦醇。9月份根茎中反式白藜芦醇的含量最高;果皮中白藜芦醇的含量较高,籽中含量较少;成熟果含量较未成熟果含量高。通过研究发现不同组织部位含量有显著差异并随季节变化。

全文目录

中文摘要  10-12
英文摘要  12-14
符号说明  14-15
第一章液相色谱-质谱联用法测定不同产地虎杖中白藜芦醇及其糖苷顺、反异构体的含量  15-24
  1 材料与方法  15-18
    1.1 仪器与试剂  15-16
    1.2 方法  16-18
      1.2.1 色谱条件  16
      1.2.2 质谱条件  16
      1.2.3 样品溶液的制备  16
      1.2.4 含量测定方法学研究  16-18
        1.2.4.1 标准曲线的建立  16-17
        1.2.4.2 精密度试验  17-18
        1.2.4.3 重复性实验  18
        1.2.4.4 稳定性试验  18
        1.2.4.5 回收率试验  18
  2 质谱分析  18-22
  3 含量测定结果  22-23
  4 讨论  23-24
第二章野生山葡萄不同季节不同组织部位白藜芦醇含量变化研究  24-28
  1 材料与方法  24-25
    1.1 仪器与试剂  24
    1.2 方法  24-25
      1.2.1 色谱条件  24
      1.2.2 质谱条件  24
      1.2.3 含量测定方法学研究  24-25
        1.2.3.1 标准曲线的建立  25
        1.2.3.2 样品溶液的制备  25
        1.2.3.3 精密度试验  25
        1.2.3.4 稳定性试验  25
        1.2.3.5 回收率试验  25
  2 质谱分析  25-27
  3 结果与讨论  27-28
第三章正交设计优化野生山葡萄根中白藜芦醇的提取工艺  28-32
  1 实验材料  28
    1.1 仪器  28
    1.2 试剂  28
  2 方法与结果  28-31
    2.1 分析方法  28-29
      2.1.1 色谱条件  28
      2.1.2 标准曲线的建立  28-29
      2.1.3 样品溶液的制备  29
      2.1.4 精密度与重复性实验  29
      2.1.5 稳定性试验  29
      2.1.6 回收率试验  29
      2.1.7 样品测定  29
    2.2 提取条件的选择  29-30
      2.2.1 提取溶媒的选择  29-30
      2.2.2 正交试验优选醇提工艺  30
    2.3 结果  30-31
    2.4 验证实验  31
  3 讨论  31-32
第四章白藜芦醇的植物化学与生物学效应(综述)  32-38
  1 白藜芦醇的植物化学特性  32-35
    1.1 白藜芦醇的理化性质  32-33
    1.2 提取、分离、纯化  33
    1.3 分析检测  33-34
      1.3.1 高效液相色谱法(HPLC)  33
      1.3.2 色谱-质谱联用技术  33-34
      1.3.3 高效毛细管电泳法(HPCE/CE)  34
      1.3.4 二次微分简易示波伏安法  34
    1.4 合成  34-35
      1.4.1 生物合成  34
      1.4.2 化学合成  34-35
      1.4.3 组织培养和悬浮培养生产白藜芦醇  35
  2 白藜芦醇的生物学效应  35-38
    2.1 白藜芦醇的体内代谢  35
    2.2 白藜芦醇的生物活性  35-38
      2.2.1 白藜芦醇与癌症  35-36
      2.2.2 白藜芦醇与心血管疾病  36
      2.2.3 肝脏保护作用  36
      2.2.4 激素调节作用  36-37
      2.2.5 抗病毒作用  37
      2.2.6 抗菌作用  37-38
附录1 不同产地虎杖样品高效液相色谱图  38-41
附录2 野生山葡萄样品高效液相色谱图  41-44
参考文献  44-50
致谢  50-51
攻读学位期间发表的学术论文目录  51-52
学位论文评阅及答辩情况表  52

液—质联用检测虎仗和野生山葡萄中白藜芦醇及糖苷顺、反异构体研究

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