学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

人胶质母细胞瘤中白藜芦醇代谢产物及其代谢相关酶表达的分析

作　者: 师惠
导　师: 刘佳
学　校: 大连医科大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 白藜芦醇白藜芦醇单硫酸酯人胶质母细胞瘤硫酸酯转移酶
分类号: R739.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 23次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：1)研究人胶质母细胞瘤细胞系U251和LN18对白藜芦醇的敏感性差异；2)比较这两个细胞系中白藜芦醇的代谢特点;3)分析白藜芦醇作用前后,两细胞系硫酸酯转移酶SULT1A1、SULT1C2和SULT4A1的表达情况；4)分析上述三种硫酸酯转移酶在人胶质母细胞瘤组织中的表达方式；探讨人胶质母细胞瘤对白藜芦醇敏感度与白藜芦醇代谢酶表达程度之间是否存在某些相关性,以期为白藜芦醇抗癌功效的判定和癌症的个体化治疗提供实验依据。方法：人胶质母细胞瘤U251和LN18细胞分别培养于含10%胎牛血清的DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)培养液中,用100μM白藜芦醇处理细胞,分别收集细胞和培养液；通过HE染色观察用药前后细胞形态及其数量变化；培养液经固相萃取(SPE)纯化后,利用高效液相(HPLC)对白藜芦醇胶质母细胞瘤细胞中的主要代谢产物进行比较；采用免疫细胞化学(ICC)、RT-PCR和Western-blotting等方法检测白藜芦醇处理前后胶质母细胞瘤细胞中相关代谢酶的表达水平；利用石蜡组织微阵列技术及免疫组织化学染色(IHC)检测硫酸酯转移酶SULT1A1、SULT1C2和SULT4A1在人胶质母细胞瘤中的表达情况,并通过与瘤旁相对正常组织比较,分析相关代谢酶在正常组织与肿瘤组织中的表达特点。结果：1)HE染色结果显示,100μM白藜芦醇处理48小时后,人胶质母细胞瘤细胞系U251细胞的健康状态不佳,细胞生长受到明显抑制,细胞出现明显的凋亡现象,而人胶质母细胞瘤细胞系LN18无明显的生长抑制现象；2)HPLC的检测结果显示,LN18细胞中白藜芦醇出现了白藜芦醇单硫酸酯这种代谢产物,而U251细胞中则无此类代谢产物；3) RT-PCR、Western-blotting及ICC结果显示,在人胶质母细胞瘤细胞系U251细胞和LN18细胞中,在白藜芦醇作用前后,白藜芦醇相关代谢酶总体表达水平都有不同程度的上调,其中LN18细胞的1C2和4A1上调更为明显；4)免疫组织化学染色结果显示,在37例人胶质母细胞瘤组织样本中SULT 1A1阳性表达率为70.27%,SULT1C2阳性率为81.08%,SULT4A1阳性率为86.49%,而在所检测的10例瘤旁组织样本中这三种酶全部呈阳性表达。结论：1)本研究证实,人胶质母细胞瘤U251细胞对白藜芦醇反应敏感,而在人胶质母细胞瘤细胞系LN18细胞中白藜芦醇未呈现其抗肿瘤作用；2)与白藜芦醇耐受的LN18不同,在白藜芦醇敏感的人胶质母瘤U251中未检测到白藜芦醇代谢产物；3)白藜芦醇能上调人胶质母细胞瘤细胞中SULT1A1、SULT1C2和SULT4A1的总体表达水平,并且在LN18上调程度较为明显,在耐受的LN18中SULTs酶的表达水平高于敏感的U251细胞；4)主要分布于人和哺乳动物脑中的硫酸酯转移酶SULT1A1、SULT1C2和SULT4A1在人胶质母细胞瘤组织中的总体表达水平低于瘤旁相对正常组织。因此推测,胶质母细胞瘤细胞对白藜芦醇的代谢效率是决定其药物敏感性的主要因素之一。在SULTs表达阳性的U251细胞中未能检测到相应代谢产物的原因尚有待查明。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-10
材料及方法  10-19
结果  19-24
讨论  24-27
结论  27-28
参考文献  28-32
创新点  32-33
综述  33-43
  参考文献  39-43
附录  43-46
致谢  46-47
作者简介  47-48

人胶质母细胞瘤中白藜芦醇代谢产物及其代谢相关酶表达的分析

内容摘要

全文目录

相似论文