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目的本文拟研究LPS,肿瘤细胞坏死释放物质(NTC-Ms)对小鼠黑色素瘤B16细胞侵袭、转移能力的影响,并从分子水平探讨其影响的可能机制,从而为肿瘤治疗提供新的思路。方法(1)分别用LPS,NTC-Ms,以及Resveratrol联合NTC-Ms作用于B16细胞48h,粘附实验检测三组刺激因素分别对B16细胞粘附能力的影响。(2)分别用LPS,NTC-Ms,以及Resveratrol联合NTC-Ms作用于B16细胞48h,软琼脂迁移实验检测三组刺激因素分别对B16细胞迁移能力的影响。(3)分别用LPS,NTC-Ms,以及Resveratrol联合NTC-Ms作用于B16细胞48h,运动实验(Transwell小室法)检测三组刺激因素分别对B16细胞侵袭和趋化运动能力的影响。(4)分别用LPS,NTC-Ms,以及Resveratrol联合NTC-Ms作用于B16细胞48h,RT-PCR法检测B16细胞TLR4,MMP-9 mRNA的表达。(5)分别用LPS,NTC-Ms,以及Resveratrol联合NTC-Ms作用于B16细胞48h,,明胶酶谱实验检测B16细胞分泌的MMP-9的活性。结果(1)LPS,NTC-Ms刺激后,B16细胞粘附基底膜的能力均增强;Resveratrol联合NTC-Ms刺激后,B16细胞对基底膜的粘附能力较单用NTC-Ms减弱。(2)LPS,NTC-Ms刺激后,迁移至软琼脂底面的B16细胞数均增多;Resveratrol联合NTC-Ms刺激后,迁移至软琼脂底面的B16细胞数减少。(3)LPS,NTC-Ms刺激后,B16细胞侵袭和趋化运动能力均增强;Resveratrol联合NTC-Ms刺激后,B16细胞侵袭和趋化运动能力减弱。(4)LPS,NTC-Ms刺激后,B16细胞TLR4, MMP-9 mRNA表达均上调;Resveratrol联合NTC-Ms刺激后,B16细胞TLR4, MMP-9 mRNA表达下调;(5)LPS,NTC-Ms刺激后, B16细胞分泌的MMP-9活性均增强;Resveratrol联合NTC-Ms刺激后,B16细胞分泌的MMP-9活性较单用NTC-Ms组减弱。结论LPS,肿瘤细胞坏死释放物质可以通过激活TLR4信号通路,提高B16细胞的侵袭转移能力。
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