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油茶花药愈伤组织诱导及褐化材料的组织化学分析

作　者: 闻丽
导　师: 张日清
学　校: 中南林学院
专　业: 森林培育
关键词: 涌笨,拉茹培养愈伤组织诱导组织化学分析揭化
分类号: S794.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 379次
引　用: 5次
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内容摘要

油茶是我国南方主要的木本食用油料树种,在我国国民经济及人民生活中占有重要地位,但其产量偏低。为改变油茶低产现状,鉴于单倍体育种的诸多优势,本研究应用该技术进行油茶品种的改良。由于油茶花药培养方面的研究刚刚起步,所以重心放在单倍体育种最基础性的研究上。一、油茶花药愈伤组织的诱导为了提高油茶花药愈伤组织诱导率,以普通油茶、小果油茶、攸县油茶、浙江红花油茶、广宁红花油茶、腾冲红花油茶、越南油茶、宛田红花油茶为实验材料,通过一系列的实验,在建立油茶单倍体育种技术体系的研究中取得了阶段性进展。在找到了处于小孢子单核期花蕾的外部形态指标后,通过大量的实验,摸索到油茶花药愈伤组织诱导的基本方法,初步筛选出了适宜油茶花药愈伤组织诱导的技术方案。实验结果表明: (1) 在八个油茶物种中,普通油茶、小果油茶的诱导效果好于其他物种。 (2) 预处理:低温处理有利于油茶花药愈伤组织的诱导,只是不同物种的最佳处理时间不同;离心预处理同样可以提高诱导率。 (3) 激素:以2,4-D0.5mg/L、6-BA0.2mg/L为本实验得出的较佳的激素组合,其中6-BA为主导因素。在2,4-D、NAA的组合中,2,4-D起着主导作用,诱导率随着2,4-D的浓度增加而增加。 (4) 培养基:MS培养基适宜用于油茶花药培养,其中琼脂用量为0.7%、蔗糖浓度为3%～4%时,愈伤组织诱导效果较佳。 (5) 光照条件:黑暗条件下培养更有利于油茶花药愈伤组织的诱导。二、褐化愈伤组织的组织化学分析为了研究油茶花药培养出现的褐化问题,为找到有效减轻褐化的方法指明方向,从组织化学分析方面着手,在对褐化及无褐化愈伤组织细胞内含物质进行了细致对比后,发现油茶花药愈伤组织诱导过程中出现的花药及愈伤组织褐化多属于细胞程序性死亡或自然死亡,而非组织培养中传统所认为的酚类物质氧化引起的。这种组织细胞的死亡多是由于对外界环境条件的不适应而诱发的,所以可以通过改善培养方法及培养环境来减轻这种褐化现象。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第一部分文献综述  9-23
  1 油茶的用途及生物学特性  9-11
  2 油茶低产林改造  11-12
  3 花药培养与单倍体育种  12-22
    3．1 花药培养及单倍体育种原理  12-14
    3．2 花药培养在油茶育种中应用的优点  14-15
    3．3 国内外花药培养技术的发展与研究现状  15-21
    3．4 现代花药培养技术的研究方向  21-22
  4 展望  22-23
第二部分正文:油茶花药培养及愈伤组织材料的组织化学分析  23-57
  1 材料与方法  23-28
    1．1 实验材料  23
    1．2 主要的实验设备及药品  23
    1．3 实验方法  23-28
      1．3．1 供试材料的准备  23-24
      1．3．2 油茶花药的发育时期与外部形态的观察  24
      1．3．3 培养基的配制和灭菌  24
      1．3．4 花蕾的处理和花药接种培养方法  24
      1．3．5 油茶花药愈伤组织的诱导  24-26
      1．3．6 实验结果观测  26-27
      1．3．7 愈伤组织的组织化学分析  27-28
      1．3．8 数据统计分析方法  28
  2 结果与分析  28-49
    2．1 油茶小孢子的发育时期与外部形态的对应关系  29-30
    2．2 油茶花药愈伤组织的诱导  30-47
      2．2．1 预处理对于油茶花药愈伤组织诱导的影响  30-35
        2．2．1．1 低温预处理对八种材料花药愈伤组织诱导的影响  30-34
        2．2．1．2 离心处理对花药愈伤组织诱导的影响  34-35
      2．1．2 不同激素配比对花药愈伤组织诱导的影响  35-39
      2．1．3 蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响  39-40
      2．1．4 不同培养基对花药愈伤组织诱导的影响  40-42
      2．1．5 四因素对油茶花药愈伤组织诱导的影响  42-47
    2．3 油茶花药愈伤组织材料的组织化学分析  47-49
      2．3．1 愈伤组织细胞形态  47-48
      2．3．2 内含物  48-49
  3 讨论  49-55
    3．1 关于小孢子发育时期和花蕾外部形态的对应关系  49-50
    3．2 油茶花药愈伤组织诱导  50-53
      3．2．1 关于不同物种对花药愈伤组织诱导的影响  50
      3．2．2 关于预处理对花药愈伤组织诱导的影响  50-51
      3．2．3 关于培养基对于花药愈伤组织诱导的影响  51-53
      3．2．4 关于其它因素对花药愈伤组织诱导的影响  53
    3．3 关于油茶花药培养中的褐化问题  53-55
      3．3．1 褐化实质的分析  53-54
      3．3．2 褐化的组织化学分析  54-55
      3．3．3 褐化诱因的分析  55
  4 结论  55-57
    4．1 油茶花药愈伤组织诱导及褐化材料的组织化学分析实验总结  55-56
    4．2 有待进一步研究的内容  56-57
参考文献  57-65
附录A 愈伤组织照片  65-66
附录B 组织化学实验照片  66-69
附录C 培养基母液配制表  69-73
附录D 攻读学位期间的主要学术成果  73-74
致谢  74

油茶花药愈伤组织诱导及褐化材料的组织化学分析

内容摘要

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