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紫花苜蓿高效再生体系的建立及其影响机理研究

作 者: 黄立皓
导 师: 安渊
学 校: 上海交通大学
专 业: 蔬菜学
关键词: 紫花苜蓿 愈伤组织诱导 愈伤组织分化 再生体系
分类号: S541.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 104次
引 用: 1次
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内容摘要


本论文以三得利紫花苜蓿为材料,采用正交实验设计和单因素实验设计相结合的方法,研究了紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化过程中不同的外植体类型和基础培养基类型、以及不同外源生长调节物质对紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响,从而建立一套高效的紫花苜蓿组织培养再生体系。实验结果如下:1.紫花苜蓿愈伤组织诱导的最佳外植体为下胚轴,最适宜的基础培养基为MS基础培养基,最优的外源激素组合和浓度为2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA+2.5mg/L KT+0.34 mg/L GA3,愈伤组织的诱导率为100%,愈伤组织结构极好。2.紫花苜蓿愈伤组织分化最适宜的基础培养基为SH基础培养基,最优的外源激素组合和浓度为1mg/L KT+0.1mg/L NAA,最佳的蔗糖、甘氨酸和Mg2+浓度依次为10g/L、4mg/L和400mg/L,愈伤组织分化率达到61.82%。3.外源NAA能够降低愈伤组织的可溶性糖含量,促进愈伤组织细胞吸收培养基中Fe2+和Mg2+,提高细胞叶绿素的含量。外源KT明显促进了愈伤组织细胞吸收培养基中的Fe2+和Cu2+,增加细胞叶绿素含量。4.外源甘氨酸有明显减少分化愈伤组织中可溶性糖含量,增加Cu2+、Fe2+、Mg2+含量的趋势,从而提高愈伤组织中细胞的渗透势,促进细胞中遗传物质的形成,提高愈伤组织细胞分化率。外源Mg2+浓度能够明显增加分化愈伤组织细胞内叶绿素含量,这是外源Mg2+导致愈伤组织分化率增加的直接原因。本研究结果表明,优化SH基础培养基的激素、蔗糖、甘氨酸和Mg2+浓度能够有效提高紫花苜蓿愈伤组织细胞的分化和形态建成。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
第一章 综述  8-18
  1.1 紫花苜蓿概述  8-10
    1.1.1 紫花苜蓿的分布  8
    1.1.2 紫花苜蓿的生物学特征  8
    1.1.3 紫花苜蓿的生长特性  8-9
    1.1.4 紫花苜蓿的经济价值  9-10
  1.2 紫花苜蓿组织培养的研究进展  10-16
    1.2.1 基因型的选择  11-12
    1.2.2 基本培养基的选择  12-13
    1.2.3 外植体的选择  13-14
    1.2.4 其它添加的营养成分  14-15
    1.2.5 生长调节剂的配比  15-16
  1.3 本研究的目的和意义  16-18
第二章 紫花苜蓿愈伤组织诱导体系的建立与优化  18-47
  2.1 材料与方法  18-20
    2.1.1 材料  18
    2.1.2 无菌苗培养  18
    2.1.3 外植体愈伤组织诱导  18-19
    2.1.4 实验设计  19
    2.1.5 数据分析  19-20
  2.2 结果与分析  20-47
    2.2.1 以MS 为基础培养基的愈伤组织诱导  20-27
    2.2.2 以B5 为基础培养基的愈伤组织诱导  27-35
    2.2.3 以SH 为基础培养基的愈伤组织诱导  35-44
    2.2.4 不同培养基和外植体的愈伤组织诱导率比较  44-45
    2.2.5 讨论  45-47
第三章 紫花苜蓿愈伤组织分化体系的建立与优化  47-59
  3.1 材料与方法  47-48
    3.1.1 实验材料  47
    3.1.2 实验方法  47
    3.1.3 实验设计  47-48
    3.1.4 数据分析  48
  3.2 结果与分析  48-57
    3.2.1 MS 基础培养基对愈伤组织分化的影响  48-51
    3.2.2 B5基础培养基对愈伤组织分化的影响  51-54
    3.2.3 SH 基础培养基对愈伤组织分化的影响  54-56
    3.2.4 三种培养基最佳愈伤组织分化率比较  56-57
  3.3 讨论  57-59
    3.3.1 基础培养基对愈伤组织分化的影响  57
    3.3.2 NAA 对愈伤组织分化的影响  57-58
    3.3.3 KT 对愈伤组织分化的影响  58-59
第四章 不同外源调节物质对紫花苜蓿愈伤组织分化的影响机理  59-81
  4.1 材料与方法  59-63
    4.1.1 实验材料  59
    4.1.2 实验方法  59-61
    4.1.3 测定指标与方法  61-63
    4.1.4 数据分析  63
  4.2 结果与分析  63-77
    4.2.1 不同外源调节物质对愈伤组织分化率的影响  63-64
    4.2.2 不同外源调节物质对愈伤组织中重要金属离子含量的影响  64-72
    4.2.3 不同外源调节物质对愈伤组织中叶绿素含量的影响  72-74
    4.2.4 不同外源调节物质对愈伤组织中可溶性糖含量的影响  74-77
  4.3 讨论  77-81
    4.3.1 NAA 对愈伤组织分化的影响  77-78
    4.3.2 KT 对愈伤组织分化的影响  78-79
    4.3.3 甘氨酸和Mg~(2+)对愈伤组织分化的影响  79-81
第五章 结论  81-83
参考文献  83-86
主要英文缩略词表(附录Ⅰ)  86-87
致谢  87-88
攻读硕士学位期间已发表或以录用的论文  88-90

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 饲料作物、牧草 > 多年生豆科牧草 > 其他
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