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黄芩数字化指纹图谱研究
作 者: 时存义
导 师: 孙国祥
学 校: 沈阳药科大学
专 业: 药物分析学
关键词: 黄芩 高效液相色谱法 高效毛细管电泳法 数字化指纹图谱 超信息特征 统一化指纹图谱 DNA指纹图谱
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
本文分别采用高效液相色谱法和高效毛细管电泳法建立了黄芩的指纹图谱质量控制方法,对其进行了超信息特征数字化评价,对色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度进行了比较研究,同时应用毛细管区带电泳法对黄芩中的有效成分黄芩苷进行了定量研究。本文还利用RAPD技术建立了黄芩的DNA指纹图谱,旨在从分子水平上建立筛选纯化黄芩优良品种的快速、准确的科学方法,能够为黄芩的种质鉴定提供线索,为黄芩的栽培和育种提供理论依据。本文为黄芩的全面质量控制提供了新方法,为实现指纹图谱的定量功能和全面评价进行了深入的研究。1、以色谱指纹图谱指数F为量化指标评价和选择指纹图谱检测条件,建立了黄芩280nm波长下的HPLC指纹图谱。以黄芩苷为参照物,确定了30个共有指纹峰,采用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件对其进行了全面评价,并建立了黄芩HPLC统一化指纹图谱。同时本文还考察了峰缺失对双定性和双定量相似度的影响。2、建立了黄芩的毛细管电泳指纹图谱,考察了不同背景电解质、不同添加剂、不同pH对电泳图谱的影响,并采用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件进行了评价,从各化学成分分布比例和各化学成分含量两个侧面评价各产地药材与共有模式间的相似性。应用毛细管区带电泳法对黄芩中的有效成分黄芩苷进行了定量研究,方法操作简便,为黄芩的质量控制提供了新方法。3、利用RAPD技术建立了黄芩的DNA指纹图谱。考察了不同模板浓度、不同引物浓度、不同dNTPs浓度、不同TaqDNA聚合酶浓度以及不同退火温度对PCR反应体系的影响,采用琼脂糖凝胶电泳法获得了不同产地黄芩药材的电泳图谱,分析其遗传分化和遗传多样性,建立了DNA遗传图谱。
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全文目录
中文摘要 8-9 英文摘要 9-11 第一章 前言 11-22 1.1 中药质量控制发展历史 11 1.2 中药质量控制的新方法—指纹图谱技术 11-17 1.3 黄芩的研究概况 17-21 1.4 立题依据和研究思路 21-22 第二章 黄芩HPLC数字化指纹图谱研究 22-48 2.1 仪器与试剂 22 2.2 试验方法 22-28 2.3 结果与讨论 28-48 第三章 黄芩毛细管电泳数字化指纹图谱研究 48-57 3.1 仪器与材料 48 3.2 试验方法 48-50 3.3 结果与讨论 50-57 第四章 黄芩DNA指纹图谱研究 57-67 4.1 仪器与材料 57 4.2 试验方法 57-63 4.3 结果与讨论 63-67 第五章 结论 67-69 参考文献 69-75 致谢 75-76 作者简介及攻读学位期间发表论文 76
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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