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基于RRLC的川白芷主要香豆素含量测定及抑制PLA2药效指纹图谱研究

作　者: 邓瑞
导　师: 张艺
学　校: 成都中医药大学
专　业: 药物化学
关键词: 川白芷 RRLC 含量测定指纹图谱 PLA2 灰色关联分析
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Benth. et Hook. F.或杭白芷A. dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Benth.et Hook. F. var. formosann (Boiss.) Shan et Yuan的干燥根,是中医临床常用药物,始载于东汉《神农本草经》,其功效散风除湿,通窍止痛,消肿排脓,常用于感冒头痛,眉棱骨痛,牙痛,疮疡肿痛等。现代研究发现白芷有抗炎镇痛药效作用。目的：以道地药材川白芷为研究对象,考察川白芷抑制PLA2生物效应与RRLC化学指纹图谱的相关性,探索川白芷的药效物质基础和质量控制新方法；并用于不同产地川白芷药材的质量评价。方法：1.采用柱色谱、重结晶法等方法对川白芷进行化学成分研究,应用TLC、1H-NMR,13C-NMR进行结构鉴定；2.采用RRLC-UV法,建立了川白芷中6种主要香豆素成分含量的测定方法,并建立了不同产地川白芷的RRLC-UV指纹图谱；3.在川白芷的化学色谱指纹图谱基础上,采用灰色关联法分析各色谱峰与抑PLA2活性的相关性。结果：1.从川白芷中分离鉴定得到9个化合物,分别为欧前胡素、氧化前胡素、异欧前胡素、水合氧化前胡素、珊瑚菜素、佛手柑内酯、Cnidilin、蛇床子素和β-谷甾醇。2.以川白芷的RRLC-UV指纹图谱,将样品分为熏硫和未熏硫两类,相似度客观地表征了其化学特征信息的差异性。3.对比分析了不同产地川白芷中6种主要香豆素类成分(水合氧化前胡素、佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、Cnidilin和异欧前胡素)含量,所建立的RRLC含量方法在测定浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好(R≥0.9998),方法的回收率在99.42%-101.44%,RSD<2.4%。4.不同加工方法的川白芷药材提取液均能抑制PLA2,但样品作用强度差异较大。日晒、熏硫样品的IC50平均值为3.36 mg/mL和4.51 mg/mL,表明日晒样品较硫熏样品在抑制PLA2上活性更强,表明硫熏加工影响了川白芷抑制PLA2活性。5.综合分析可知,川白芷中共有成分与抑制PLA2均有不同程度的相关性。灰色关联度排序为：色谱峰13(佛手柑内酯)>色谱峰7(水合氧化前胡素)>色谱峰19>色谱峰3>色谱峰23>色谱峰10>色谱峰11>色谱峰9>色谱峰18>色谱峰20(Cnidilin)>色谱峰22(异欧前胡素)>色谱峰14>色谱峰1>色谱峰21(蛇床子素)>色谱峰8>色谱峰17(欧前胡素)>色谱峰3>色谱峰2>色谱峰12>色谱峰4>色谱峰5>色谱峰6>色谱峰15>色谱峰16(氧化前胡素),表明佛手柑内酯和水合氧化前胡素可能是抑制PLA2的主要有效成分。结论：1.建立了不同产地、不同加工方法的川白芷RRLC指纹图谱,以及6种主要香豆素成分含量测定方法,分析结果表明了其化学特征信息存在差异性,能较好地用于川白芷熏硫前后的化学成分分析和质量评价。2.从化学成分含量以及抑制PLA2活性的综合评价,发现川白芷道地产区遂宁市、达州市等产地的药材质量显示出一定的优势。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-9
中英文缩写词对照表  9-10
引言  10-14
第一章川白芷化学成分分离鉴定  14-20
  1 仪器和试剂  14
  2 药材来源与鉴定  14
  3 提取与分离  14-16
  4 化合物结构鉴定  16-19
  5 小结  19-20
第二章 RRLC-UV同时测定川白芷中6种香豆素成分含量的研究  20-36
  1 仪器与试药  20
  2 样品收集和预处理  20-23
  3 含量测定方法的建立  23-32
  4 样品测定  32-34
  5 小结  34-36
第三章川白芷药材RRLC化学指纹图谱研究  36-56
  1 仪器与试药  36
  2 样品收集和预处理  36
  3 指纹图谱方法的建立  36-39
  4 川白芷药材的RRLC指纹图谱建立  39-47
  5 色谱指纹图谱质量评价方法的确立  47-55
  6 小结  55-56
第四章基于川白芷指纹图谱与抑制PLA2生物效应的相关性分析  56-63
  1 抑制PLA2生物效应试验  56-57
  2 化学指纹图谱共有峰的归属  57
  3 化学指纹图谱与抑制PLA2生物效应相关性分析——灰色关联分析  57-61
  4 小结  61-63
第五章总结与讨论  63-66
  1 总结  63-64
  2 创新与研究特色  64
  3 存在的问题和展望  64-66
参考文献  66-68
附图  68-74
综述  74-80
  参考文献  78-80
致谢  80-81
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  81-82

基于RRLC的川白芷主要香豆素含量测定及抑制PLA2药效指纹图谱研究

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