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人类牙胚组织中SHH信号通路的表达检测

作　者: 张硕
导　师: 张彦定
学　校: 福建师范大学
专　业: 发育生物学
关键词: 人类牙胚 SHH信号通路转录因子生长因子
分类号: R321
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 34次
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内容摘要

SHH (Sonic Hedgehog)信号通路在小鼠早期牙胚的发育过程中起着关键的作用,对于其在小鼠磨牙中的分子生物学机制人们已经做了大量的研究。为了进一步探索SHH信号通路在人类牙胚发生发育过程中所起的调控作用以及可能的分子机制,本实验率先检测了SHH信号通路中的关键基因在人类牙胚发育早期的乳门牙和乳磨牙中的表达模式,这些基因包括了：SHH, PTCl, SMO, GLI1,GLI2以及GLI3,通过比对其在小鼠牙胚相应发育时期的表达模式来进一步揭示SHH信号通路在不同物种中的潜在表达调控机制。研究表明在蕾状期以及帽状期这些基因在人类与小鼠中的表达模式十分相近,但个别基因的表达模式存在差异,比如SHH信号在人类牙胚相应时期的表达区域就不局限在釉结节中,而是在整个内釉上皮中都可以检测到其表达,而下游信号分子的表达区域范围比小鼠中略大。在人类牙齿发育的钟状期SHH、PTCl的表达模式与小鼠中完全一致,但此时无论在人类的乳门牙还是乳磨牙中均检测不到其它基因的表达。通过对本实验结果的分析我们认为SHH信号通路在人类与小鼠牙胚发育的早期表达模式总体来说十分相近,很可能SHH信号通路在人类中以相同的调控模式调节着上皮和间充质细胞的增殖,诱导早期牙齿发育,而在人类牙齿的钟状期以后,SHH信号通路的调控作用很可能别别的家族的信号分子所取代,或者与其它分子通路之间形成新的信号转导网络。

全文目录

中文摘要  2-3
Abstract  3-4
中文文摘  4-7
目录  7-9
绪论  9-23
  1.1 课题背景  9-10
  1.2 文献综述  10-21
    1.2.1 哺乳动物牙胚发育的形态变化过程  10-11
    1.2.2 哺乳动物牙胚发育的分子机制  11-12
    1.2.3 Shh信号通路在牙胚的发育过程中的调控  12-15
    1.2.4 Shh信号通路在胚胎其它器官组织发育中的调控  15-18
    1.2.5 RNA原位杂交技术  18-20
    1.2.6 免疫组化技术  20-21
  1.3 本研究的创新之处及意义  21-23
第一章材料和方法  23-39
  1.1 材料  23-30
    1.1.1 主要仪器  23
    1.1.2 常用培养基和基本缓冲液  23-25
    1.1.3 RNA探针模板制备  25-30
  1.2 实验方法  30-39
    1.2.1 RNA探针模板制备  30-31
    1.2.2 RNA探针转录  31-32
    1.2.3 RNA探针的沉淀与纯化  32-33
    1.2.4 RNA电泳检测  33
    1.2.5 胚胎的收集与切片  33
    1.2.6 原位杂交  33-37
    1.2.7 免疫组织化学  37-39
第二章结果与分析  39-51
  1.1 质粒的酶切线性化  39
  1.2 探针的转录  39-42
  1.3 原位杂交以及免疫组织化学结果  42-51
    1.3.1 SHH在人类早期牙胚中的表达  42
    1.3.2 PTC1在人类早期牙胚中的表达  42-43
    1.3.3 SMO在人类早期牙胚中的表达  43
    1.3.4 GLI1在人类早期牙胚中的表达  43
    1.3.5 GLI2在人类早期牙胚中的表达  43
    1.3.6 GLI3在人类早期牙胚中的表达  43-51
第三章讨论  51-55
  1.1 SHH信号通路在人类蕾状期牙胚中的表达模式和可能的调控机制  51-52
  1.2 SHH信号通路在人类帽状期牙胚中的表达模式和可能的调控机制  52-53
  1.3 SHH信号通路在人类钟状期牙胚中的表达模式和可能的调控机制  53-55
第四章结论  55-57
附录  57-59
参考文献  59-67
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  67-69
致谢  69-71
个人简历  71-73

人类牙胚组织中SHH信号通路的表达检测

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