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无核葡萄胚挽救育种技术的研究

作　者: 李桂荣
导　师: 王跃进
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 果树学
关键词: 无核葡萄 育种 胚挽救
分类号: S663.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
下　载: 187次
引　用: 5次
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内容摘要


2000年5月～2001年2月通过采集花粉并进行杂交授粉，共获得种内和种间杂交5个组合。然后离体培养底来特×爱莫无核、爱莫无核×黑龙江实生、爱莫无核×北醇、爱莫无核×江西－2、长穗无核白×黑龙江实生以及自然授粉的底来特、无核白和红光无核的胚珠，对影响无核葡萄胚珠培养的取材时期、基本培养基、不同外源激素类型及其浓度配比、蔗糖浓度、水解乳蛋白和低温处理程序等因素进行了研究。主要取得了以下研究结果：1．获得了一批杂交后代试管苗和部分移栽苗通过胚挽救技术，以无核葡萄品种作为母本的5个组合共获得了151株幼苗。其中种内杂交的底来特×爱莫无核100株；种间杂交的爱莫无核×江西－2 17株，长穗无核白×黑龙江实生16株，爱莫无核×北醇12株，爱莫无核×黑龙江实生6株；另外还有68株自然授粉的无核白，47株自然授粉的红光无核，35株自然授粉的底来特。营养钵移栽成活60株，并成功地栽植到大田。2．确定了不同品种及杂交组合的最佳取材时期不同品种及杂交组合胚挽救的最佳取材时期不同，大致介于授粉后20天～50天之间。具体表现为：自然授粉的底来特与底来特×爱莫无核两组合均是授粉后50天，自然授粉的无核白是授粉后37天，爱莫无核×黑龙江实生是授粉后30天，爱莫无核×北醇在授粉后47天浆果变软时取材最适宜，爱莫无核×江西－2在授粉后50天浆果变软时取材最适宜，长穗无核白×黑龙江实生是授粉后20天。3．筛选出了最适宜胚挽救的基本培养基取自然授粉后40天、43天、48天的红光无核离体胚珠分别接种在N5、Do、B5 三种基本培养基中培养。结果表明，以Nitsch为基本培养基培养效果最好。另外，在基本培养基上，一般在授粉后，取材培养时添加6%的蔗糖，80天～90天后，转接到2%蔗糖的胚萌发培养基上培养，幼胚萌发10天～20天后，再转接到2%蔗糖的成苗培养基上，促使胚发育、萌发及成苗效果最佳。4．探索了外源激素的作用及其适宜的浓度影响胚挽救的外源激素主要是IAA、BA和GA3，3者不同浓度配比对试管幼苗的获得影响较大。其中最适宜底来特×爱莫无核的是2.0mg/L IAA、0.5mg/L BA 、0.5mg/L GA3，而最适宜自然授粉的无核白的是1.0mg/L IAA 、0.5mg/L BA 、0.5mg/L GA3。5．建立了适宜无核葡萄胚挽救的应用操作程序本研究将无核葡萄胚挽救过程分为三级培养。首先将胚珠取出，接种在一级培养基——胚珠培养基上，培养80天～90天，挽救其中的幼胚；然后转移到二级培养基——胚萌发培养基上诱导胚萌发；最后将萌发10天～20天的幼胚转移到三级培养基——成苗培养基上使之直接成苗。

全文目录


1． 文献综述  7-18
  1．1 植物胚挽救技术研究的开端  7
  1．2 胚挽救技术在果树育种中的应用  7-8
  1．3 无核葡萄及其育种  8-10
    1．3．1 无核葡萄形成的机理  8-9
    1．3．2 无核葡萄育种  9-10
      1．3．2．1 常规杂交育种  9-10
      1．3．2．2 利用胚挽救技术培育无核葡萄品种及其研究进展  10
  1．4 影响无核葡萄胚挽救的因素  10-14
    1．4．1 胚龄  10-11
    1．4．2 基本培养基  11-12
    1．4．3 外源激素  12-13
    1．4．4 蔗糖浓度  13
    1．4．5 有机成分  13
    1．4．6 胚珠的处理方式  13-14
  1．5 胚挽救技术在葡萄育种中的应用前景  14-16
    1．5．1 胚挽救技术在无核葡萄育种中的应用  14-15
    1．5．2 幼胚培养获得早熟葡萄  15
    1．5．3 胚挽救技术应用于远缘杂交育种  15
    1．5．4 通过胚挽救技术获得葡萄三倍体  15
    1．5．5 利用胚挽救技术可以缩短育种周期  15-16
  1．6 展望  16-17
  1．7 本研究的目的和意义  17-18
2． 材料与方法  18-23
  2．1 材料  18-19
    2．1．1 供试葡萄品种及其杂交组合  18-19
  2．2 方法  19-23
    2．2．1 无核葡萄胚珠及其浆果重量的测定  19
    2．2．2 无菌材料的获得及培养  19-20
      2．2．2．1 消毒  19-20
      2．2．2．2 培养材料  20
      2．2．2．3 培养基  20
      2．2．2．4 培养容器及灭菌  20
      2．2．2．5 培养条件  20
    2．2．3 无核葡萄胚珠培养影响因素的试验  20-22
      2．2．3．1 不同组合取材时期的设置  20-21
      2．2．3．2 基本培养基筛选试验  21
      2．2．3．3 蔗糖浓度梯度试验  21
      2．2．3．4 外源激素设置试验  21
      2．2．3．5 不同外源激素配比对不同组合影响的试验  21
      2．2．3．6 添加水解乳蛋白的试验  21-22
      2．2．3．7 低温处理不同程序的试验  22
    2．2．4 无核葡萄品种×中国野生葡萄杂交后代试管苗的获得  22
      2．2．4．1 母本对获得杂交后代试管苗影响的试验  22
      2．2．4．2 父本对获得杂交后代试管苗影响的试验  22
    2．2．5 不同杂交组合胚珠培养之间的比较  22
    2．2．6 结果统计  22-23
3． 结果与分析  23-32
  3．1 无核葡萄胚珠及其浆果重量变化的测定结果  23-24
  3．2 无核葡萄胚珠培养的影响因素  24-30
    3．2．1 不同组合最佳取样时期的确定  24-26
    3．2．2 基本培养基对离体胚珠培养的影响  26
    3．2．3 蔗糖浓度对离体胚珠培养的影响  26-27
    3．2．4 外源激素对离体胚珠培养的影响  27-28
    3．2．5 不同外源激素配比对不同组合的影响  28-29
    3．2．6 水解乳蛋白对离体胚珠培养的影响  29
    3．2．7 低温处理不同程序对离体胚珠培养的影响  29-30
  3．3 无核葡萄品种×中国野生葡萄杂交后代试管苗的获得  30
    3．3．1 不同母本对杂交后代试管苗获得的影响  30
    3．3．2 不同父本对杂交后代试管苗获得的影响  30
  3．4 不同杂交组合胚珠培养之间的比较  30-31
  3．5 试管苗移栽结果  31-32
4． 讨论  32-36
  4．1 关于葡萄胚败育及无核葡萄的形成  32
  4．2 关于胚挽救获得无核葡萄植株的影响因素  32-34
  4．3 关于无核抗性品种的培育  34
  4．4 关于无核葡萄胚挽救的操作程序  34-36
5． 结论  36-37
参考文献  37-45
附录：无核葡萄胚珠培养的图版  45-51
致谢  51

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 浆果类 > 葡萄
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